Allergen چیست؟
تجزیه و تحلیل آلرژن دو حوزه مجزا را پوشش می دهد. وجود و کمیت آلرژن های فهرست شده در پیوست II FOOD (EU) 1169/2011 توسط ELISA، Real-time PCR یا LC-MS/MS تعیین می شود. R5 ELISA برای گلوتن به طور گسترده استفاده می شود. در لوازم آرایشی، آلرژن های عطر، که باید در (EC) 1223/2009 پیوست III برچسب زده شوند، توسط GC-MS اندازه گیری می شوند.
هدف Allergen
هدف بررسی صحت اعلامیه برچسب و اثربخشی کنترل آلودگی متقابل است. آلرژن اعلام نشده یکی از شایع ترین علل به یاد آوردن مواد غذایی است.
Allergen بر چه محصولاتی اعمال میشود؟
- محصولات اعلام شده فاقد گلوتن
- محصولات پخته شده و تنقلات
- محصولات اعلام شده بدون لبنیات و بدون فندق
- غذاهای آماده و سس
- محصولات آرایشی و بهداشتی معطر
Allergen در چه صنایعی کاربرد دارد؟
استانداردهای مرتبط با Allergen
- سری TS EN 15634 (تشخیص آلرژن در مواد غذایی — فرضیات کلی و روش های PCR)
- AOAC 2012.01 (تعیین گلوتن توسط R5 ELISA)
- TS EN ISO 21571 (استخراج اسید نوکلئیک)
- سری ISO/TS 20224 (تعیین گونه های جانوری، PCR بلادرنگ)
- سری TS EN 16274 (تعیین مواد بودار آلرژی زا در لوازم آرایشی توسط GC-MS)
شرایط Allergen
- انتخاب روش
- Protein hedefliyse ELISA/LC-MS, DNA hedefliyse PCR
- اثر پردازش
- عملیات حرارتی ممکن است پروتئین را دناتوره کند و نتیجه ELISA را کاهش دهد
- Gluten
- توسط R5 ELISA; آستانه تعریف شده برای اعلام «بدون گلوتن».
- Kozmetik alerjen
- مواد فهرست شده در پیوست III توسط GC-MS غربالگری می شوند
تجهیزات Allergen
- صفحه خوان و دستگاه جوجه کشی الایزا
- سیستم Real-time PCR
- LC-MS/MS
- GC-MS (برای آلرژن های آرایشی)
- هموژنایزر و آسیاب
الزامات نمونه برای Allergen
- نمونه نماینده همگن شده
- در صورت بررسی آلودگی متقاطع نیز ممکن است نمونه سواب خطی گرفته شود.
- پارامترهای پردازش باید اعلام شوند
- ترکیب عطر و لیست INCI باید در لوازم آرایشی ارائه شود
مدت Allergen
نتایج ELISA نسبتاً سریع در دسترس هستند. تجزیه و تحلیل PCR و LC-MS/MS چند روز کاری طول می کشد. غربالگری آلرژن های آرایشی به دلیل اندازه گیری GC-MS زمان مشابهی را می طلبد.
روش اجرای Allergen
- 1آلرژن هدف و روش مناسب تعیین می شود.
- 2نمونه همگن شده و استخراج می شود.
- 3در الایزا، اندازه گیری مبتنی بر آنتی بادی انجام می شود.
- 4در PCR، استخراج DNA و تکثیر گونه خاص اعمال می شود.
- 5پپتیدهای هدف در LC-MS/MS اندازه گیری می شوند.
- 6در لوازم آرایشی، مواد معطر حساسیت زا با GC-MS غربالگری می شوند.
معیارهای پذیرش Allergen
در مواد غذایی (EU) 1169/2011، آلرژن های ضمیمه II باید در لیست مواد تشکیل دهنده مشخص شوند. آستانه تعریف شده 828/2014 (EU) را برای ادعای "بدون گلوتن" تعیین می کند. ضمیمه III از لوازم آرایشی (EC) 1223/2009 ایجاب میکند که آلرژنهای عطر فهرستشده در صورت وجود غلظتهای بالاتر از معین، به طور جداگانه روی برچسب ذکر شوند.
ارزیابی نتایج
نتیجه منفی محدود به حد تشخیص روش است و تضمینی برای "فاقد آلرژن" نیست. علاوه بر این، پردازش ممکن است پروتئین هدف را تغییر دهد و نتیجه ELISA را کاهش دهد. در این مورد PCR یا LC-MS/MS قابل اعتمادتر است. مدیریت آلودگی متقابل از طریق جداسازی تولید و تأیید تمیز کردن به دست میآید، نه تجزیه و تحلیل.
گزارش Allergen
- شرح نمونه و لیست آلرژن هدف
- روش اعمال شده و دلیل آن
- نتیجه و محدودیت تشخیص برای هر آلرژن
- پردازش اطلاعات پارامترها
- مقایسه آستانه یا بیانیه قانون
اعتباربخشی
EUROLAB دارای اعتبار شناخته شده بین المللی است که از نهادهای اعتباربخشی طرف قراردادهای شناسایی چندجانبه IAF و ILAC، تحت ISO/IEC 17025 برای تست های آزمایشگاهی، ISO/IEC 17020 برای بازرسی و نظارت، و ISO/IEC 17021-1 و سیستم گواهی محصول ISO/IEC. این زنجیره تضمین می کند که گزارش ها و گواهی های صادر شده در سراسر جهان پذیرفته می شوند.
اینکه آیا این آزمون می تواند در محدوده معتبر ارائه شود به محصول شما و استاندارد اعمال شده بستگی دارد. از آنجایی که اعتبارسنجی مبتنی بر روش است، دامنه به صورت کتبی در مرحله نقل قول تأیید می شود.
محدوده و مجوزهامقررات مرتبط
- مقررات (EU) 1169/2011 در مورد اطلاعات غذایی به مصرف کنندگان پیوست II
- مقررات اعلامیه بدون گلوتن (EU) 828/2014
- (EC) 1223/2009 مقررات محصولات آرایشی و بهداشتی پیوست III
آزمون مواد غذایی — این حوزه آزمون چه چیزی را پوشش میدهد؟
بخش زیر حوزهای را توصیف میکند که آزمون Allergen به آن تعلق دارد؛ شرایط و معیارهای پذیرش این آزمون خاص در بخشهای بالا آمده است. دامنه ویژه محصول شما در مرحله پیشنهاد قیمت بهصورت مکتوب مشخص میشود.
آزمونهای غذایی نشان میدهند که یک محصول برای مصرف ایمن است و همان چیزی را دارد که روی برچسبش نوشته شده. این خانواده در سه محور کار میکند: ایمنی میکروبیولوژیک، ایمنی شیمیایی و ترکیب تغذیهای. هر سه به زیرساخت آزمایشگاهی متفاوت، مجموعه روش متفاوت و زمان تصمیمگیری متفاوتی نیاز دارند.
بارزترین ویژگی این حوزه فشار زمانی است. یک نمونه فولادی میتواند روی قفسه منتظر بماند؛ اما نمونه شیر خام یا گوشت تازه نمیتواند. زمان نمونهبرداری، دمای حملونقل و مدت رسیدن به آزمایشگاه مستقیماً اعتبار نتیجه را تعیین میکنند. به همین دلیل، در میکروبیولوژی غذایی ثبت زنجیره سرد بخشی جداییناپذیر از گزارش آزمون است.
در سمت میکروبیولوژیک دو پرسش متفاوت وجود دارد که نباید با هم اشتباه گرفته شوند. شناسایی یک پاتوژن پرسشی کیفی است: آیا سالمونلا در نمونه وجود دارد یا نه؟ شمارش میکروارگانیسمهای شاخص پرسشی کمی و شاخصی از بهداشت تولید است. نبود پاتوژن در یک محصول نشاندهنده خوب بودن بهداشت نیست؛ اگر شمارش کل هوازیهای مزوفیل بالا باشد، در فرآیند مشکلی وجود دارد.
در سمت شیمیایی، باقیمانده آفتکشها، مایکوتوکسینها، فلزات سنگین، افزودنیها، باقیمانده داروهای دامپزشکی و آلایندههای فرآیندی (اکریلآمید، فوران، PAH) اندازهگیری میشوند. روشهای چندباقیمانده در این حوزه (LC-MS/MS و GC-MS/MS مبتنی بر QuEChERS) میتوانند صدها ماده فعال را در یک تحلیل غربالگری کنند؛ حدود برای هر جفت محصول-ماده جداگانه تعریف میشوند.
در سمت ترکیب، پروتئین، چربی، رطوبت، خاکستر، فیبر، نمایه قند، ترکیب اسید چرب و محتوای ویتامین و مواد معدنی تعیین میشود. این مقادیر مبنای بیانیه تغذیهای روی برچسب هستند و بازههای تلورانس در مقررات تعریف شدهاند - تفاوت بین مقدار اعلامشده و مقدار اندازهگیریشده باید در این تلورانس باقی بماند.
هیچ نشان CEای برای مواد غذایی وجود ندارد و همین امر نحوه کار این حوزه را شکل میدهد. انطباق از طریق اجرای یک سیستم ایمنی غذایی مبتنی بر HACCP، رعایت قوانین برچسبگذاری و عدم تجاوز از حدود آلاینده، باقیمانده و میکروبیولوژیک نشان داده میشود. نتیجه آزمون مدرکی برای یک گواهی نیست بلکه مدرکی برای یک سیستم کارآمد است.
مدیریت آلرژن اهمیت ویژهای دارد. وجود آلرژن اعلامنشده در یک محصول یکی از شایعترین دلایل فراخوان مواد غذایی است. تحلیل در اینجا همراه با اعتبارسنجی تمیزکاری انجام میشود: نشان داده میشود که خط تولید پس از یک دوره تولید حاوی آلرژن بهاندازه کافی تمیز شده و خطر آلودگی متقاطع تحت کنترل است.
طرحهای داوطلبانه در این حوزه عملاً اجباری شدهاند. زنجیرههای خردهفروشی از تأمینکنندگان خود میخواهند گواهی تحت یک طرح تأییدشده توسط GFSI (مانند BRCGS، IFS، FSSC 22000) داشته باشند؛ بدون آن، رسیدن به قفسه عملاً غیرممکن است.
گروههای روش در این حوزه
شناسایی پاتوژن
شناسایی سالمونلا، لیستریا مونوسیتوژنز، کمپیلوباکتر، کرونوباکتر و ایکولای تولیدکننده توکسین شیگا؛ به روشهای کشت و مولکولی.
شمارش شاخصها
شمارش کل هوازیهای مزوفیل، انتروباکتریاسه، کلیفرم و ایکولای، استافیلوکوک کواگولاز مثبت، مخمر و کپک، باکتری اسید لاکتیک، کلستریدیای احیاکننده سولفیت.
باقیمانده آفتکش و دامپزشکی
غربالگری چندباقیمانده با LC-MS/MS و GC-MS/MS همراه با استخراج QuEChERS.
مایکوتوکسین و آلایندهها
آفلاتوکسینها، اوکراتوکسین A، دیاکسینیوالنول، پاتولین؛ فلزات سنگین (ICP-MS)، اکریلآمید و ترکیبات PAH.
ترکیب تغذیهای
پروتئین کجلدال، نمایه چربی و اسید چرب، رطوبت، خاکستر، فیبر غذایی، نمایه قند، تحلیل ویتامین و مواد معدنی.
آلرژن و اصالت
تحلیل آلرژن گلوتن، شیر، تخممرغ، آجیل و سویا؛ روشهای مولکولی برای شناسایی گونه و کشف تقلب.
موارد رایج اشتباهگرفتهشده در این حوزه
- نمونهبرداری نیمی از نتیجه است. نمونهای که در دمای نادرست حمل شده یا تأخیر داشته حتی اگر در آزمایشگاه بهدرستی تحلیل شود نتیجه نامعتبر میدهد.
- نبود پاتوژن نشاندهنده خوب بودن بهداشت نیست؛ شمارش شاخصها اطلاعات جداگانهای میدهد و این دو با هم خوانده میشوند.
- نتیجه نمونهای که از یک محموله گرفته شده تنها در صورتی قابل تعمیم به کل محموله است که طرح نمونهبرداری بهصورت آماری تنظیم شده باشد.
- حدود در مقررات جداگانه بر اساس گروه محصول تعریف میشوند و بهطور منظم بهروزرسانی میشوند؛ تصمیم انطباق مبتنی بر جدول حدود قدیمی ممکن است نادرست باشد.
- در صادرات، حدود کشور مقصد ممکن است با حدود اتحادیه اروپا متفاوت باشد؛ یک محصول واحد ممکن است در یک بازار منطبق و در بازار دیگر نامنطبق باشد.
این نتایج از کدام تصمیم پشتیبانی میکنند
- راستیآزمایی طرح HACCP و پایش فرآیند
- مبنای بیانیه تغذیهای و اطلاعات آلرژن روی برچسب
- گواهی بهداشتی پیش از صادرات و انطباق با حدود بازار مقصد
- کنترل پذیرش بر اساس تأمینکننده و محموله
- مطالعات عمر قفسه و تعیین شرایط نگهداری
- تولید مستندات برای ممیزیهای طرحهای تأییدشده GFSI
تست های مرتبط
پرسشهای متداول درباره Allergen
آیا نباید به جای هشدار «ممکن است حاوی» تحلیلی داشته باشیم؟
تجزیه و تحلیل بخشی از نشان دادن این است که خطر آلودگی متقابل مدیریت می شود، اما به تنهایی کافی نیست. بیانیه هشدار باید بر اساس یک ارزیابی واقعی خطر باشد. تجزیه و تحلیل این ارزیابی را پشتیبانی می کند، نه جایگزین می کند.
چرا ELISA در محصولات عملیات حرارتی کم است؟
عملیات حرارتی ساختار پروتئین را تغییر می دهد و می تواند مناطق شناسایی شده توسط آنتی بادی را مختل کند. در این صورت ممکن است نتیجه کمتر از حقیقت باشد; PCR هدفمند با DNA یا LC-MS/MS با هدف پپتید مناسب تر خواهد بود.











