Salmonella چیست؟
تجزیه و تحلیل سالمونلا بررسی این است که آیا این پاتوژن در نمونه وجود دارد یا خیر. این یک تجزیه و تحلیل حضور/غیاب است، نه یک شمارش: به دنبال این است که در مقدار نمونه مشخصی وجود نداشته باشد. روش مرجع ISO 6579-1 است و شامل مراحل پیش غنی‌سازی، غنی‌سازی انتخابی، کشت در محیط‌های انتخابی و تأیید است.
هدف Salmonella
هدف این است که نشان داده شود سالمونلا، یکی از عوامل اصلی بیماری های ناشی از غذا، در محصول وجود ندارد. (EC) 2073/2005 این را به عنوان یک معیار ایمنی غذا برای بسیاری از دسته های مواد غذایی تعریف می کند.
Salmonella بر چه محصولاتی اعمال می‌شود؟
- گوشت مرغ و فراورده های تخم مرغ
- گوشت خام و گوشت چرخ کرده
- پودر شیر و غذای کودک
- ادویه و آجیل
- غذاهای آماده و محصولات آماده مصرف
Salmonella در چه صنایعی کاربرد دارد؟
استانداردهای مرتبط با Salmonella
- TS EN ISO 6579-1 (تشخیص گونه های سالمونلا — روش افقی)
- TS EN ISO 6579-3 (serotiplendirme)
- سری TS EN ISO 16140 (تأیید روش های جایگزین)
- سری TS EN ISO 6887 (تهیه نمونه)
شرایط Salmonella
- مقدار نمونه
- مقدار تعریف شده در استاندارد و قانون؛ معمولا 25 گرم
- پیش غنی سازی
- در آب پپتون بافر، تحت شرایط استاندارد تعریف شده
- غنی سازی انتخابی
- در رسانه های انتخابی تعریف شده در استاندارد
- تأیید
- تایید بیوشیمیایی و سرولوژیکی
تجهیزات Salmonella
- کابینت و دستگاه جوجه کشی استریل
- سیستم Real-time PCR (برای روش سریع)
- Stomacher
- اتوکلاو و آماده سازی متوسط
- Serolojik tiplendirme kitleri
الزامات نمونه برای Salmonella
- نمونه باید باز نشده و در بسته بندی اصلی خود با حفظ زنجیره سرد ارسال شود. اینکه آیا روش نمونه گیری نماینده دسته است یا خیر، اعتبار نتیجه را تعیین می کند. نتیجه یک واحد برای تصمیم گیری در مورد حزب کافی نیست.
- طرح نمونه گیری باید با تعداد نمونه های موجود در قانون مطابقت داشته باشد.
- واحدهای آنالیز 25 گرمی طبق استاندارد تهیه می شوند
- نمونه باید در بسته بندی اصلی و باز نشده ارسال شود.
مدت Salmonella
روش مرجع فرهنگی به دلیل مراحل پیش غنی سازی، غنی سازی انتخابی، کشت و اعتبارسنجی چندین روز طول می کشد. روش های سریع مبتنی بر PCR زودتر نتایج منفی می دهند، اما نتایج مثبت نیاز به تایید فرهنگی دارد.
روش اجرای Salmonella
- 1نمونه به صورت آسپتیک وزن شده و به محیط پیش غنی سازی اضافه می شود.
- 2در دما و زمان معین انکوبه می شود.
- 3به رسانه های غنی سازی انتخابی منتقل شد.
- 4کاشت بر روی محیط جامد انتخابی انجام می شود.
- 5کلنی های معمولی از نظر بیوشیمیایی و سرولوژیکی تایید می شوند.
- 6نتیجه به صورت موجود/غایب در مقدار نمونه تعریف شده گزارش می شود.
معیارهای پذیرش Salmonella
(EC) 2073/2005 عدم وجود سالمونلا را در مقادیر نمونه تعریف شده در بسیاری از دسته های غذایی به عنوان یک معیار ایمنی مواد غذایی تعیین می کند. مقداری که معیارها را برآورده نمی کند نمی تواند در بازار عرضه شود و رویه های موجود در قانون اعمال می شود.
ارزیابی نتایج
نتیجه فقط برای مقدار نمونه مورد تجزیه و تحلیل معتبر است. از آنجایی که سالمونلا می تواند به طور نابرابر در دسته توزیع شود، طرح نمونه گیری مستقیماً قابلیت اطمینان نتیجه را تعیین می کند. منفی بودن نمونه تنها تضمینی برای کل دسته ارائه نمی کند.
گزارش Salmonella
- توضیحات نمونه، اطلاعات دسته ای و نمونه برداری
- تعداد نمونه مورد تجزیه و تحلیل و تعداد واحدها
- استاندارد و روش اعمال شده
- نتیجه (موجود/غایب) و سروتیپ در صورت مثبت بودن
- معیار
اعتباربخشی
EUROLAB دارای اعتبار شناخته شده بین المللی است که از نهادهای اعتباربخشی طرف قراردادهای شناسایی چندجانبه IAF و ILAC، تحت ISO/IEC 17025 برای تست های آزمایشگاهی، ISO/IEC 17020 برای بازرسی و نظارت، و ISO/IEC 17021-1 و سیستم گواهی محصول ISO/IEC. این زنجیره تضمین می کند که گزارش ها و گواهی های صادر شده در سراسر جهان پذیرفته می شوند.
اینکه آیا این آزمون می تواند در محدوده معتبر ارائه شود به محصول شما و استاندارد اعمال شده بستگی دارد. از آنجایی که اعتبارسنجی مبتنی بر روش است، دامنه به صورت کتبی در مرحله نقل قول تأیید می شود.
محدوده و مجوزهامقررات مرتبط
- (EC) 2073/2005 مقررات ضوابط میکروبیولوژیکی
- (EC) 178/2002 قانون عمومی مواد غذایی
آزمون مواد غذایی — این حوزه آزمون چه چیزی را پوشش می‌دهد؟
بخش زیر حوزه‌ای را توصیف می‌کند که آزمون Salmonella به آن تعلق دارد؛ شرایط و معیارهای پذیرش این آزمون خاص در بخش‌های بالا آمده است. دامنه ویژه محصول شما در مرحله پیشنهاد قیمت به‌صورت مکتوب مشخص می‌شود.
آزمون‌های غذایی نشان می‌دهند که یک محصول برای مصرف ایمن است و همان چیزی را دارد که روی برچسبش نوشته شده. این خانواده در سه محور کار می‌کند: ایمنی میکروبیولوژیک، ایمنی شیمیایی و ترکیب تغذیه‌ای. هر سه به زیرساخت آزمایشگاهی متفاوت، مجموعه روش متفاوت و زمان تصمیم‌گیری متفاوتی نیاز دارند.
بارزترین ویژگی این حوزه فشار زمانی است. یک نمونه فولادی می‌تواند روی قفسه منتظر بماند؛ اما نمونه شیر خام یا گوشت تازه نمی‌تواند. زمان نمونه‌برداری، دمای حمل‌ونقل و مدت رسیدن به آزمایشگاه مستقیماً اعتبار نتیجه را تعیین می‌کنند. به همین دلیل، در میکروبیولوژی غذایی ثبت زنجیره سرد بخشی جدایی‌ناپذیر از گزارش آزمون است.
در سمت میکروبیولوژیک دو پرسش متفاوت وجود دارد که نباید با هم اشتباه گرفته شوند. شناسایی یک پاتوژن پرسشی کیفی است: آیا سالمونلا در نمونه وجود دارد یا نه؟ شمارش میکروارگانیسم‌های شاخص پرسشی کمی و شاخصی از بهداشت تولید است. نبود پاتوژن در یک محصول نشان‌دهنده خوب بودن بهداشت نیست؛ اگر شمارش کل هوازی‌های مزوفیل بالا باشد، در فرآیند مشکلی وجود دارد.
در سمت شیمیایی، باقیمانده آفت‌کش‌ها، مایکوتوکسین‌ها، فلزات سنگین، افزودنی‌ها، باقیمانده داروهای دامپزشکی و آلاینده‌های فرآیندی (اکریل‌آمید، فوران، PAH) اندازه‌گیری می‌شوند. روش‌های چندباقیمانده در این حوزه (LC-MS/MS و GC-MS/MS مبتنی بر QuEChERS) می‌توانند صدها ماده فعال را در یک تحلیل غربالگری کنند؛ حدود برای هر جفت محصول-ماده جداگانه تعریف می‌شوند.
در سمت ترکیب، پروتئین، چربی، رطوبت، خاکستر، فیبر، نمایه قند، ترکیب اسید چرب و محتوای ویتامین و مواد معدنی تعیین می‌شود. این مقادیر مبنای بیانیه تغذیه‌ای روی برچسب هستند و بازه‌های تلورانس در مقررات تعریف شده‌اند - تفاوت بین مقدار اعلام‌شده و مقدار اندازه‌گیری‌شده باید در این تلورانس باقی بماند.
هیچ نشان CEای برای مواد غذایی وجود ندارد و همین امر نحوه کار این حوزه را شکل می‌دهد. انطباق از طریق اجرای یک سیستم ایمنی غذایی مبتنی بر HACCP، رعایت قوانین برچسب‌گذاری و عدم تجاوز از حدود آلاینده، باقیمانده و میکروبیولوژیک نشان داده می‌شود. نتیجه آزمون مدرکی برای یک گواهی نیست بلکه مدرکی برای یک سیستم کارآمد است.
مدیریت آلرژن اهمیت ویژه‌ای دارد. وجود آلرژن اعلام‌نشده در یک محصول یکی از شایع‌ترین دلایل فراخوان مواد غذایی است. تحلیل در اینجا همراه با اعتبارسنجی تمیزکاری انجام می‌شود: نشان داده می‌شود که خط تولید پس از یک دوره تولید حاوی آلرژن به‌اندازه کافی تمیز شده و خطر آلودگی متقاطع تحت کنترل است.
طرح‌های داوطلبانه در این حوزه عملاً اجباری شده‌اند. زنجیره‌های خرده‌فروشی از تأمین‌کنندگان خود می‌خواهند گواهی تحت یک طرح تأییدشده توسط GFSI (مانند BRCGS، IFS، FSSC 22000) داشته باشند؛ بدون آن، رسیدن به قفسه عملاً غیرممکن است.
گروه‌های روش در این حوزه
شناسایی پاتوژن
شناسایی سالمونلا، لیستریا مونوسیتوژنز، کمپیلوباکتر، کرونوباکتر و ای‌کولای تولیدکننده توکسین شیگا؛ به روش‌های کشت و مولکولی.
شمارش شاخص‌ها
شمارش کل هوازی‌های مزوفیل، انتروباکتریاسه، کلیفرم و ای‌کولای، استافیلوکوک کواگولاز مثبت، مخمر و کپک، باکتری اسید لاکتیک، کلستریدیای احیاکننده سولفیت.
باقیمانده آفت‌کش و دامپزشکی
غربالگری چندباقیمانده با LC-MS/MS و GC-MS/MS همراه با استخراج QuEChERS.
مایکوتوکسین و آلاینده‌ها
آفلاتوکسین‌ها، اوکراتوکسین A، دی‌اکسی‌نیوالنول، پاتولین؛ فلزات سنگین (ICP-MS)، اکریل‌آمید و ترکیبات PAH.
ترکیب تغذیه‌ای
پروتئین کجلدال، نمایه چربی و اسید چرب، رطوبت، خاکستر، فیبر غذایی، نمایه قند، تحلیل ویتامین و مواد معدنی.
آلرژن و اصالت
تحلیل آلرژن گلوتن، شیر، تخم‌مرغ، آجیل و سویا؛ روش‌های مولکولی برای شناسایی گونه و کشف تقلب.
موارد رایج اشتباه‌گرفته‌شده در این حوزه
- نمونه‌برداری نیمی از نتیجه است. نمونه‌ای که در دمای نادرست حمل شده یا تأخیر داشته حتی اگر در آزمایشگاه به‌درستی تحلیل شود نتیجه نامعتبر می‌دهد.
- نبود پاتوژن نشان‌دهنده خوب بودن بهداشت نیست؛ شمارش شاخص‌ها اطلاعات جداگانه‌ای می‌دهد و این دو با هم خوانده می‌شوند.
- نتیجه نمونه‌ای که از یک محموله گرفته شده تنها در صورتی قابل تعمیم به کل محموله است که طرح نمونه‌برداری به‌صورت آماری تنظیم شده باشد.
- حدود در مقررات جداگانه بر اساس گروه محصول تعریف می‌شوند و به‌طور منظم به‌روزرسانی می‌شوند؛ تصمیم انطباق مبتنی بر جدول حدود قدیمی ممکن است نادرست باشد.
- در صادرات، حدود کشور مقصد ممکن است با حدود اتحادیه اروپا متفاوت باشد؛ یک محصول واحد ممکن است در یک بازار منطبق و در بازار دیگر نامنطبق باشد.
این نتایج از کدام تصمیم پشتیبانی می‌کنند
- راستی‌آزمایی طرح HACCP و پایش فرآیند
- مبنای بیانیه تغذیه‌ای و اطلاعات آلرژن روی برچسب
- گواهی بهداشتی پیش از صادرات و انطباق با حدود بازار مقصد
- کنترل پذیرش بر اساس تأمین‌کننده و محموله
- مطالعات عمر قفسه و تعیین شرایط نگهداری
- تولید مستندات برای ممیزی‌های طرح‌های تأییدشده GFSI
تست های مرتبط
پرسش‌های متداول درباره Salmonella
آیا روش سریع PCR پذیرفته شده است؟
پذیرفته شده است؛ با این حال، روش جایگزین باید با روش مرجع مطابق با سری ISO 16140 تأیید شود. علاوه بر این، انتظار می رود نتایج مثبت با روش فرهنگی تایید شود.
چند نمونه باید آنالیز کنم؟
تعداد نمونه ها بر اساس طرح نمونه گیری مقرر شده توسط EC 2073/2005 برای دسته بندی محصول تعیین می شود. اگر طرح پنج واحد را بخواهد، یک نمونه کافی نیست.