ما هو Method Validation؟
التحقق من صحة الطريقة التحليلية هو العرض التجريبي الذي يثبت أن الطريقة مناسبة للاستخدام المقصود. تحدد ICH Q2(R2) خصائص الأداء التي سيتم تقييمها: الخصوصية، والخطية والمدى، والدقة، والدقة (التكرار والدقة المتوسطة)، وحدود الكشف والقياس الكمي، والمتانة.
الغرض من Method Validation
والغرض من ذلك هو إظهار أن البيانات التحليلية المنتجة موثوقة. لا يتم قبول النتيجة الناتجة عن طريقة غير معتمدة في ملف ترخيص التسويق أو بموجب ممارسات التصنيع الجيدة.
على أي منتجات يُطبَّق Method Validation؟
- طرق الفحص والشوائب
- طرق اختبار الذوبان
- طرق التحقق من التنظيف
- الطرق الميكروبيولوجية
- طرق التحليل الحيوي
في أي قطاعات يُستخدم Method Validation؟
المواصفات المتعلقة بـ Method Validation
- ICH Q2(R2) (التحقق من صحة الإجراءات التحليلية)
- ICH Q14 (تطوير الإجراءات التحليلية)
- دكتوراه يورو. 5.21 (الطرق الكيميائية) والفصول العامة ذات الصلة
- USP <1225> (التحقق من صحة الإجراءات الموجزة)
- USP <1226> (التحقق من الإجراءات الموجزة)
شروط Method Validation
- نوع الطريقة
- الهوية، أو الفحص، أو اختبار الحد للشوائب، أو اختبار الشوائب الكمي؛ تختلف المعلمات المطلوبة وفقًا لذلك
- معايير القبول
- محددة مسبقًا في بروتوكول التحقق من الصحة
- التدهور القسري
- مطلوب لطرق الإشارة إلى الاستقرار كدليل على الخصوصية
جهاز Method Validation
- أنظمة HPLC/UPLC/GC
- مقاييس الطيف الضوئي
- المعايير المرجعية ومعايير الشوائب
- برامج التقييم الإحصائي
متطلبات العينة لـ Method Validation
- المادة الفعالة والمنتج وعينات الدواء الوهمي
- معايير النجاسة المعروفة
- عينات التحلل القسري
- ويجب توفير مسودة الطريقة ووصف الاستخدام المقصود
مدة Method Validation
تستغرق دراسة التحقق الكاملة أسابيع بسبب عدد المعلمات ومتطلبات التكرار. التحقق من الطريقة المختصرة أقصر.
إجراء Method Validation
- 1يتم تحديد الاستخدام والنوع المقصود للطريقة.
- 2تم إعداد بروتوكول التحقق ومعايير القبول.
- 3يتم إجراء دراسة خصوصية. يتم تطبيق التدهور القسري إذا لزم الأمر.
- 4يتم إجراء الدراسة الخطية والمدى.
- 5يتم إجراء دراسات الدقة (الاسترداد) والدقة.
- 6ويتم تقييم حدود الكشف/القياس الكمي والمتانة؛ تم إعداد التقرير.
معايير قبول Method Validation
يتم تحديد معايير القبول في بروتوكول التحقق من الصحة قبل الدراسة ويتم تحديدها وفقًا للاستخدام المقصود للطريقة. يحدد ICH Q2(R2) المعلمات التي سيتم تقييمها؛ وتحدد المنظمة عتبات القبول العددية مع مبرراتها الخاصة.
تقييم النتائج
يُظهر التحقق من الصحة أن الطريقة مناسبة للاستخدام المحدد، وليس أنها ستعمل في كل الظروف. هناك حاجة إلى إعادة التقييم إذا كان سيتم استخدام الطريقة في مصفوفة مختلفة أو نطاق تركيز مختلف. بالنسبة لطرق دستور الأدوية، قد يكون التحقق كافيًا بدلاً من التحقق الكامل.
تقرير Method Validation
- وصف الطريقة والاستخدام المقصود
- بروتوكول التحقق ومعايير القبول
- البيانات الأولية والتقييم الإحصائي لكل معلمة
- مقارنة النتائج مع المعايير
- الاستنتاج ونطاق صلاحية الطريقة
الاعتماد
حصلت EUROLAB على اعتماد معترف به دوليًا تم الحصول عليه من هيئات الاعتماد الأطراف في ترتيبات الاعتراف المتعددة الأطراف IAF وILAC، بموجب ISO/IEC 17025 للاختبارات المعملية، وISO/IEC 17020 للتفتيش والمراقبة، وISO/IEC 17021-1 وISO/IEC 17065 لشهادة النظام والمنتجات. تضمن هذه السلسلة قبول التقارير والشهادات الصادرة في جميع أنحاء العالم.
تعتمد إمكانية تقديم هذا الاختبار ضمن النطاق المعتمد على منتجك والمعيار المطبق؛ وبما أن الاعتماد يعتمد على الطريقة، يتم تأكيد النطاق كتابيًا في مرحلة عرض الأسعار.
النطاق والتفويضاتاللوائح ذات الصلة
- توجيه 2001/83/EC بشأن المنتجات الطبية للاستخدام البشري
- دليل ممارسات التصنيع الجيدة (EudraLex المجلد 4)
التحليل الصيدلاني — ما الذي يغطيه مجال الاختبار هذا؟
يصف القسم أدناه المجال الذي ينتمي إليه اختبار Method Validation؛ أما شروط ومعايير قبول هذا الاختبار تحديدًا فترد في الأقسام أعلاه. يتم تأكيد النطاق الخاص بمنتجكم كتابيًا في مرحلة العرض السعري.
يحدد التحليل الصيدلاني هوية المادة الفعالة الدوائية والمنتج النهائي ونقاءه وكميته وسلوكه. وما يميز هذا المجال عن غيره هو أن الطرق مُحددة إلى حد كبير في دساتير الأدوية: حيث يوفر كل من دستور الأدوية الأوروبي (Ph. Eur.) ودستور الأدوية للولايات المتحدة (USP) الطريقة وإطار القبول معًا.
تحدد الطبيعة الملزمة لطريقة دستور الأدوية طريقة العمل في هذا المجال. ففي حين يمكن للمختبر في القطاعات الأخرى اختيار طريقة مناسبة، فإن الطريقة الموصوفة في الدراسة المرجعية هنا هي الأساس؛ وإذا تم استخدام طريقة بديلة، فيجب إثبات تكافؤها. وهذا يضمن قابلية مقارنة النتائج على مستوى العالم.
تُجرى التحليلات في عدة مجموعات. يُظهر تحديد الهوية والتحديد الكمي (HPLC، الأشعة فوق البنفسجية، المعايرة) ماهية المنتج وكمية المادة الفعالة التي يحتوي عليها. يبحث ملف الشوائب والمذيبات المتبقية عن المركبات غير المرغوب فيها الناتجة عن عملية الإنتاج. تتناول شوائب العناصر المعادن الناتجة عن المحفزات والمعدات. يُعد سلوك الذوبان والتوزيع أهم مؤشر مختبري يتعلق بسلوك إفراز الدواء في الجسم.
يُعد اختبار الذوبان أحد أهم القياسات الحاسمة في هذا المجال. فلا يكفي أن يحتوي القرص على الكمية الصحيحة من المادة الفعالة؛ بل يجب أن تذوب تلك المادة بالسرعة المناسبة. يُستخدم ملف تعريف الذوبان في تقييم تأثير التغييرات في التركيبة على الاستفادة الحيوية، ويحتل مكانة مركزية في ترخيص الأدوية الجنيسة.
يُعد «التحقق من صحة الطريقة» خطوة إلزامية في هذه المجموعة. في حال استخدام طريقة دستور الأدوية، يتم التحقق من أن الطريقة تعمل بشكل مناسب في ظروف ذلك المختبر. أما في حالة تطوير طريقة خاصة، فيتم التحقق من صلاحيتها من خلال معايير مثل الخطية والدقة والصحة والانتقائية وحدود الكشف والتحديد والمتانة. ولا يمكن استخدام النتائج التي تم الحصول عليها باستخدام طريقة لم يتم التحقق من صلاحيتها في ملف الترخيص.
تحدد اختبارات الاستقرار مدة الصلاحية، وهي أطول عملية في هذا المجال. حيث يتم تخزين المنتج في ظروف درجة الحرارة والرطوبة المحددة له، ويتم تحليله على فترات زمنية محددة، وتشكل النتائج أساسًا لادعاءات مدة الصلاحية وظروف التخزين. وتوفر الظروف المسرَّعة معلومات أولية، لكن البيانات في الوقت الفعلي هي الأساسية.
يُشكل الجانب الميكروبيولوجي جزءًا منفصلاً: حساب الحمل الميكروبي، والبحث عن الكائنات الحية الدقيقة المحددة، واختبار التعقيم للمنتجات المعقمة، واختبار الذيفان الداخلي البكتيري. كما تدخل في المنتجات المعقمة عملية التحقق من سلامة العبوة والتحقق من صحة عملية التعقيم.
أصبحت سلامة البيانات في السنوات الأخيرة محور عمليات التفتيش. فلا يكفي أن تكون النتيجة صحيحة؛ بل يجب أن تكون البيانات الخام قابلة للتتبع وغير قابلة للتعديل وقابلة للتدقيق. لذلك أصبح التحقق من صحة أنظمة السجلات الإلكترونية جزءًا لا يتجزأ من التحليل.
مجموعات الطرق في هذا المجال
الهوية والمقايسة
HPLC وUPLC والتحليل الطيفي فوق البنفسجي والمرئي والمعايرة، وتأكيد الهوية بواسطة FTIR.
الشوائب والمخلفات
الشوائب ذات الصلة، ومنتجات التحلل، والمذيبات المتبقية (GC-headspace)، وفحص النيتروزامين.
الشوائب العنصرية
تحديد الشوائب العنصرية بواسطة ICP-MS وICP-OES وتقييم المخاطر المرتبط بها.
فيزيوكيميائي
الانحلال والتفتت، والصلادة، والتفتت الهش، وتجانس وحدات الجرعة، ومحتوى الماء (كارل فيشر)، وحجم الجسيمات.
ميكروبيولوجي
العد الميكروبي، والكائنات الدقيقة المحددة، والتعقيم، والذيفان الداخلي البكتيري، وفعالية الحافظة.
الثبات
دراسات الثبات الفعلي والمسرَّع؛ والثبات الضوئي والثبات أثناء الاستخدام.
أمور يشيع الخلط بينها في هذا المجال
- طريقة دستور الأدوية ملزمة؛ ولا يمكن استخدام طريقة بديلة إلا بإثبات تكافؤها.
- لا يمكن استخدام نتيجة أُنتجت دون التحقق من صحة الطريقة في ملف الترخيص.
- لا يحل الثبات المسرَّع محل البيانات الفعلية الزمن؛ إذ تُدعَم مدة الصلاحية بنتائج فعلية الزمن.
- يكون ملف الانحلال حساسًا لنوع الجهاز وسرعة التحريك والوسط؛ ويجب أن تكون الظروف كاملة في التقرير.
- يُنتج القصور في سلامة البيانات عدم مطابقة في التفتيش حتى لو كانت النتيجة صحيحة.
- يتطلب تغيير التركيبة أو المورّد مقارنة تحليلية، وعند الحاجة، دراسة ثبات جديدة.
ما القرارات التي تدعمها هذه النتائج
- ملف الترخيص والإفراج عن الدفعة
- تحديد مدة الصلاحية وشروط التخزين
- نقل الطريقة والتحقق من صحتها
- مراقبة قبول المواد الخام الواردة من الموردين
- تقييم أثر تغيير التركيبة على التكافؤ الحيوي
الاختبارات ذات الصلة
الأسئلة الشائعة حول Method Validation
هل التحقق من الصحة مطلوب لطريقة دستور الأدوية؟
عادةً لا يكون التحقق الكامل مطلوبًا، ولكن التحقق هو: يجب إظهار الطريقة التي تعمل مع العينة الخاصة بك في المختبر الخاص بك. USP <1226> يحدد هذا النهج.
إذا قمنا بتغيير الطريقة، فهل إعادة التحقق إلزامية؟
ذلك يعتمد على نطاق التغيير. بالنسبة للتغييرات الطفيفة، قد تكون إعادة تقييم المعلمات المتأثرة كافية؛ التغيير الذي يغير مبدأ الفصل يتطلب التحقق الكامل.