ما هو Assay؟
يقيس الفحص كمية المادة الفعالة في المنتج. HPLC هي الطريقة الأكثر شيوعًا؛ يمكن أيضًا استخدام طرق قياس المعايرة أو قياس الطيف الضوئي في الدراسة. يتم التعبير عن النتيجة كنسبة مئوية من المحتوى المعلن.
الغرض من Assay
والغرض من ذلك هو التحقق من أن المنتج يحتوي على الجرعة المعلنة. يشكل انحراف الجرعة خطرًا مباشرًا على الفعالية والسلامة.
على أي منتجات يُطبَّق Assay؟
- أقراص وكبسولات ومشروبات
- شراب ومعلقات وقطرات
- المحاليل القابلة للحقن
- الكريمات والمواد الهلامية والمراهم
- المكونات الصيدلانية الفعالة
في أي قطاعات يُستخدم Assay؟
المواصفات المتعلقة بـ Assay
- دكتوراه يورو. 2.2.29 (الكروماتوغرافيا السائلة)
- دكتوراه يورو. 2.2.46 (تقنيات الفصل الكروماتوغرافي)
- USP <621> (الكروماتوغرافيا)
- ICH Q2(R2) (التحقق من صحة الإجراءات التحليلية)
- دراسات المنتج ذات الصلة
شروط Assay
- ملاءمة النظام
- يجب استيفاء معايير ملاءمة النظام الواردة في الدراسة في كل عملية تشغيل
- المعيار المرجعي
- دستور الأدوية أو معيار العمل المؤهل
- تحضير العينة
- الاستخراج والتخفيف المحددة في الدراسة
جهاز Assay
- HPLC / UPLC (مع كاشف DAD أو الأشعة فوق البنفسجية)
- المعايرة التلقائية
- مقياس الطيف الضوئي للأشعة فوق البنفسجية/الرؤية المرئية
- ميزان تحليلي (0.00001 جم)
- حمام بالموجات فوق الصوتية وأجهزة الطرد المركزي
متطلبات العينة لـ Assay
- عدد الوحدات المحددة في الدراسة (قرص، كبسولة، الخ)
- يجب توفير رقم الدفعة والجرعة المعلنة
- يجب إرسال العينة في عبوتها الأصلية
- يجب توفير المعلومات القياسية المرجعية
مدة Assay
يستغرق الفحص الكروماتوغرافي، بالإضافة إلى إعداد العينة وتشغيل مدى ملاءمة النظام، عدة أيام عمل.
إجراء Assay
- 1تم إعداد الطريقة والشروط الواردة في الدراسة.
- 2تم إعداد الحل القياسي المرجعي.
- 3يتم إجراء تشغيل مدى ملاءمة النظام ويتم التحقق من المعايير.
- 4يتم إعداد العينة في الدراسة.
- 5يتم إجراء القياس الكروماتوغرافي أو المعايرة.
- 6يتم حساب محتوى المادة الفعالة كنسبة مئوية من القيمة المعلنة.
معايير قبول Assay
لا يتم ذكر معيار القبول في هذه الصفحة: بالنسبة لكل مادة فعالة وكل منتج، يأتي الحد من دراسة دستور الأدوية ذات الصلة أو المواصفات المعتمدة في ملف ترخيص التسويق. يحدد الفصل العام لدستور الأدوية الطريقة؛ الدراسة تحدد الحد.
تقييم النتائج
النتيجة التي تم الحصول عليها دون استيفاء معايير ملاءمة النظام غير صالحة؛ تثبت هذه المعايير أن الطريقة عملت بشكل صحيح في ذلك اليوم. كما أن نتيجة الفحص وحدها ليست كافية أيضًا: يُظهر اختبار توحيد المحتوى والذوبان أن كل وحدة من المنتج تقدم الجرعة الصحيحة.
تقرير Assay
- تحديد العينة والدفعة والجرعة المعلنة
- تم تطبيق شروط الدراسة والطريقة
- نتائج ملاءمة النظام
- نتيجة الفحص (٪ من المعلنة)
- الكروماتوجرام والحسابات
الاعتماد
حصلت EUROLAB على اعتماد معترف به دوليًا تم الحصول عليه من هيئات الاعتماد الأطراف في ترتيبات الاعتراف المتعددة الأطراف IAF وILAC، بموجب ISO/IEC 17025 للاختبارات المعملية، وISO/IEC 17020 للتفتيش والمراقبة، وISO/IEC 17021-1 وISO/IEC 17065 لشهادة النظام والمنتجات. تضمن هذه السلسلة قبول التقارير والشهادات الصادرة في جميع أنحاء العالم.
تعتمد إمكانية تقديم هذا الاختبار ضمن النطاق المعتمد على منتجك والمعيار المطبق؛ وبما أن الاعتماد يعتمد على الطريقة، يتم تأكيد النطاق كتابيًا في مرحلة عرض الأسعار.
النطاق والتفويضاتاللوائح ذات الصلة
- توجيه 2001/83/EC بشأن المنتجات الطبية للاستخدام البشري
- دليل ممارسات التصنيع الجيدة (EudraLex المجلد 4)
التحليل الصيدلاني — ما الذي يغطيه مجال الاختبار هذا؟
يصف القسم أدناه المجال الذي ينتمي إليه اختبار Assay؛ أما شروط ومعايير قبول هذا الاختبار تحديدًا فترد في الأقسام أعلاه. يتم تأكيد النطاق الخاص بمنتجكم كتابيًا في مرحلة العرض السعري.
يحدد التحليل الصيدلاني هوية المادة الفعالة الدوائية والمنتج النهائي ونقاءه وكميته وسلوكه. وما يميز هذا المجال عن غيره هو أن الطرق مُحددة إلى حد كبير في دساتير الأدوية: حيث يوفر كل من دستور الأدوية الأوروبي (Ph. Eur.) ودستور الأدوية للولايات المتحدة (USP) الطريقة وإطار القبول معًا.
تحدد الطبيعة الملزمة لطريقة دستور الأدوية طريقة العمل في هذا المجال. ففي حين يمكن للمختبر في القطاعات الأخرى اختيار طريقة مناسبة، فإن الطريقة الموصوفة في الدراسة المرجعية هنا هي الأساس؛ وإذا تم استخدام طريقة بديلة، فيجب إثبات تكافؤها. وهذا يضمن قابلية مقارنة النتائج على مستوى العالم.
تُجرى التحليلات في عدة مجموعات. يُظهر تحديد الهوية والتحديد الكمي (HPLC، الأشعة فوق البنفسجية، المعايرة) ماهية المنتج وكمية المادة الفعالة التي يحتوي عليها. يبحث ملف الشوائب والمذيبات المتبقية عن المركبات غير المرغوب فيها الناتجة عن عملية الإنتاج. تتناول شوائب العناصر المعادن الناتجة عن المحفزات والمعدات. يُعد سلوك الذوبان والتوزيع أهم مؤشر مختبري يتعلق بسلوك إفراز الدواء في الجسم.
يُعد اختبار الذوبان أحد أهم القياسات الحاسمة في هذا المجال. فلا يكفي أن يحتوي القرص على الكمية الصحيحة من المادة الفعالة؛ بل يجب أن تذوب تلك المادة بالسرعة المناسبة. يُستخدم ملف تعريف الذوبان في تقييم تأثير التغييرات في التركيبة على الاستفادة الحيوية، ويحتل مكانة مركزية في ترخيص الأدوية الجنيسة.
يُعد «التحقق من صحة الطريقة» خطوة إلزامية في هذه المجموعة. في حال استخدام طريقة دستور الأدوية، يتم التحقق من أن الطريقة تعمل بشكل مناسب في ظروف ذلك المختبر. أما في حالة تطوير طريقة خاصة، فيتم التحقق من صلاحيتها من خلال معايير مثل الخطية والدقة والصحة والانتقائية وحدود الكشف والتحديد والمتانة. ولا يمكن استخدام النتائج التي تم الحصول عليها باستخدام طريقة لم يتم التحقق من صلاحيتها في ملف الترخيص.
تحدد اختبارات الاستقرار مدة الصلاحية، وهي أطول عملية في هذا المجال. حيث يتم تخزين المنتج في ظروف درجة الحرارة والرطوبة المحددة له، ويتم تحليله على فترات زمنية محددة، وتشكل النتائج أساسًا لادعاءات مدة الصلاحية وظروف التخزين. وتوفر الظروف المسرَّعة معلومات أولية، لكن البيانات في الوقت الفعلي هي الأساسية.
يُشكل الجانب الميكروبيولوجي جزءًا منفصلاً: حساب الحمل الميكروبي، والبحث عن الكائنات الحية الدقيقة المحددة، واختبار التعقيم للمنتجات المعقمة، واختبار الذيفان الداخلي البكتيري. كما تدخل في المنتجات المعقمة عملية التحقق من سلامة العبوة والتحقق من صحة عملية التعقيم.
أصبحت سلامة البيانات في السنوات الأخيرة محور عمليات التفتيش. فلا يكفي أن تكون النتيجة صحيحة؛ بل يجب أن تكون البيانات الخام قابلة للتتبع وغير قابلة للتعديل وقابلة للتدقيق. لذلك أصبح التحقق من صحة أنظمة السجلات الإلكترونية جزءًا لا يتجزأ من التحليل.
مجموعات الطرق في هذا المجال
الهوية والمقايسة
HPLC وUPLC والتحليل الطيفي فوق البنفسجي والمرئي والمعايرة، وتأكيد الهوية بواسطة FTIR.
الشوائب والمخلفات
الشوائب ذات الصلة، ومنتجات التحلل، والمذيبات المتبقية (GC-headspace)، وفحص النيتروزامين.
الشوائب العنصرية
تحديد الشوائب العنصرية بواسطة ICP-MS وICP-OES وتقييم المخاطر المرتبط بها.
فيزيوكيميائي
الانحلال والتفتت، والصلادة، والتفتت الهش، وتجانس وحدات الجرعة، ومحتوى الماء (كارل فيشر)، وحجم الجسيمات.
ميكروبيولوجي
العد الميكروبي، والكائنات الدقيقة المحددة، والتعقيم، والذيفان الداخلي البكتيري، وفعالية الحافظة.
الثبات
دراسات الثبات الفعلي والمسرَّع؛ والثبات الضوئي والثبات أثناء الاستخدام.
أمور يشيع الخلط بينها في هذا المجال
- طريقة دستور الأدوية ملزمة؛ ولا يمكن استخدام طريقة بديلة إلا بإثبات تكافؤها.
- لا يمكن استخدام نتيجة أُنتجت دون التحقق من صحة الطريقة في ملف الترخيص.
- لا يحل الثبات المسرَّع محل البيانات الفعلية الزمن؛ إذ تُدعَم مدة الصلاحية بنتائج فعلية الزمن.
- يكون ملف الانحلال حساسًا لنوع الجهاز وسرعة التحريك والوسط؛ ويجب أن تكون الظروف كاملة في التقرير.
- يُنتج القصور في سلامة البيانات عدم مطابقة في التفتيش حتى لو كانت النتيجة صحيحة.
- يتطلب تغيير التركيبة أو المورّد مقارنة تحليلية، وعند الحاجة، دراسة ثبات جديدة.
ما القرارات التي تدعمها هذه النتائج
- ملف الترخيص والإفراج عن الدفعة
- تحديد مدة الصلاحية وشروط التخزين
- نقل الطريقة والتحقق من صحتها
- مراقبة قبول المواد الخام الواردة من الموردين
- تقييم أثر تغيير التركيبة على التكافؤ الحيوي
الاختبارات ذات الصلة
الأسئلة الشائعة حول Assay
تم اجتياز نتيجة الفحص - هل المنتج متوافق؟
ليس من تلقاء نفسها. الفحص يعطي متوسط المحتوى؛ هناك حاجة إلى توحيد المحتوى بشكل منفصل للتوزيع من وحدة إلى وحدة، واختبار الذوبان للتنبؤ بالتوافر البيولوجي.