Анализ аллергенов — ИФА/ПЦР/ЖХ-МС/МС и аллергены в косметике · Испытания косметики

Что такое Allergen?

Анализ аллергенов охватывает две отдельные области. Наличие и количество аллергенов, перечисленных в Приложении II FOOD (ЕС) 1169/2011, определяют с помощью ИФА, ПЦР в реальном времени или ЖХ-МС/МС; Широко используется ИФА R5 на глютен. В КОСМЕТИКЕ парфюмерные аллергены, которые должны быть указаны в Приложении III (EC) 1223/2009, измеряются методом ГХ-МС.

Allergen: цель

Целью является проверка точности декларации на этикетке и эффективности контроля перекрестного загрязнения. Незаявленный аллерген является одной из наиболее частых причин отзыва продуктов питания.

К каким изделиям применяется Allergen?

Продукты заявлены как безглютеновые
Выпечка и закуски
Продукты, заявленные как безмолочные и без фундука
Готовые блюда и соусы
Парфюмированная косметическая продукция

В каких отраслях применяется Allergen?

Пищевая продукцияСельское хозяйствоРозничная торговляКосметика

Стандарты, связанные с Allergen

Серия TS EN 15634 (обнаружение аллергенов в пищевых продуктах — общие предположения и методы ПЦР)
AOAC 2012.01 (Определение глютена методом R5 ELISA)
TS EN ISO 21571 (экстракция нуклеиновой кислоты)
Серия ISO/TS 20224 (определение вида животных, ПЦР в реальном времени)
Серия TS EN 16274 (Определение аллергенных пахучих веществ в косметике методом ГХ-МС)

Allergen: условия

Выбор метода: Protein hedefliyse ELISA/LC-MS, DNA hedefliyse PCR
Эффект обработки: Термическая обработка может денатурировать белок и снизить результат ИФА.
Gluten: С помощью R5 ELISA; Определен порог для декларации «без глютена».
Kozmetik alerjen: Вещества, перечисленные в Приложении III, проверяются методом ГХ-МС.

Оборудование для Allergen

Устройство для чтения планшетов ИФА и инкубатор
Система ПЦР в реальном времени
ЖХ-МС/МС
ГХ-МС (на косметические аллергены)
Гомогенизатор и измельчитель

Требования к образцам для Allergen

Гомогенизированный репрезентативный образец
Также можно взять пробы мазков с линии, если исследуется перекрестное загрязнение.
Параметры обработки должны быть объявлены
В косметике должна быть представлена парфюмерная композиция и список INCI.

Allergen: продолжительность

Результаты ИФА доступны относительно быстро. Анализы ПЦР и ЖХ-МС/МС занимают несколько рабочих дней; Скрининг косметических аллергенов занимает такое же время из-за измерений методом ГХ-МС.

Allergen: порядок проведения

1Определяют целевой аллерген и соответствующий метод.
2Образец гомогенизируют и экстрагируют.
3В ИФА измерения проводятся на основе антител.
4В ПЦР применяются экстракция ДНК и видоспецифичная амплификация.
5Целевые пептиды измеряют с помощью ЖХ-МС/МС.
6В косметике аллергенные душистые вещества проверяются методом ГХ-МС.

Allergen: критерии приёмки

В пищевом продукте (ЕС) 1169/2011 аллергены Приложения II должны быть указаны выделенными в списке ингредиентов. Он устанавливает пороговый уровень (ЕС) 828/2014 для заявления о «безглютеновом» продукте. Приложение III к косметике (ЕС) 1223/2009 требует, чтобы перечисленные парфюмерные аллергены были указаны на этикетке отдельно, если они присутствуют в концентрациях, превышающих определенные.

Оценка результатов

Отрицательный результат ограничен пределом обнаружения метода и не гарантирует отсутствия аллергенов. Кроме того, обработка может изменить целевой белок, ухудшив результат ELISA; В этом случае ПЦР или ЖХ-МС/МС более надежны. Управление перекрестным загрязнением достигается за счет разделения производства и проверки очистки, а не анализа.

Allergen: протокол

Описание образца и список целевых аллергенов
Применяемый метод и его обоснование
Результат и предел обнаружения для каждого аллергена
Информация о параметрах обработки
Сравнение законодательного порога или заявления

Аккредитация

EUROLAB имеет международно признанную аккредитацию, полученную от органов по аккредитации, являющихся участниками многосторонних соглашений о признании IAF и ILAC, в соответствии с ISO/IEC 17025 для лабораторных испытаний, ISO/IEC 17020 для инспекций и надзора, а также ISO/IEC 17021-1 и ISO/IEC 17065 для сертификации систем и продукции. Эта цепочка гарантирует, что выданные отчеты и сертификаты принимаются по всему миру.

Возможность проведения этого теста в рамках аккредитованной области зависит от вашего продукта и применяемого стандарта; поскольку аккредитация основана на методе, объем работ подтверждается в письменной форме на этапе предложения.

Область применения и разрешения

Соответствующие правила

Регламент (ЕС) 1169/2011 «Информация о пищевых продуктах для потребителей», Приложение II
Декларация о безглютеновой продукции Регламент (ЕС) 828/2014
(EC) 1223/2009 Регламент косметической продукции, Приложение III

Kozmetik Testleri — Что охватывает эта область испытаний?

В разделе ниже описывается область, к которой относится испытание Allergen; условия и критерии приемки именно этого испытания приведены в разделах выше. Объём, специфичный для вашего продукта, подтверждается письменно на этапе коммерческого предложения.

Испытания косметики показывают, что продукт остаётся микробиологически безопасным на протяжении всего использования, обеспечивает заявленные свойства и не содержит ограниченных веществ. В этой отрасли НЕТ ОДОБРЕНИЯ ПРОДУКТА: ни один орган не утверждает косметическое средство; ответственность полностью лежит на производителе и ответственном лице, учреждённом в ЕС.

Эта модель ответственности определяет работу отрасли. До выхода продукта на рынок готовится информационный файл продукта (PIF), проводится оценка безопасности (CPSR) и завершается уведомление. Контроль наступает позже и требует файл; если он неполон, продукт отзывается с рынка. Протоколы испытаний формируют доказательную базу этого файла.

С микробиологической стороны есть два разных вопроса, и каждый решается отдельным испытанием. ТЕКУЩЕЕ микробиологическое качество продукта измеряется подсчётом и поиском определённых микроорганизмов. ЭФФЕКТИВНОСТЬ консервирующей системы проверяется путём преднамеренного заражения продукта микроорганизмами (challenge-тест): способен ли продукт противостоять повторному загрязнению на протяжении использования? Баночку крема касаются пальцем при каждом применении; консервирующая система должна с этим справляться.

На стороне эффективности проводятся исследования, подтверждающие заявления. Для солнцезащитных средств определение SPF и защиты от UVA, а также измерение водостойкости обязательны и служат основой заявленного на этикетке значения. Также in vivo или in vitro методами формируются доказательства для таких заявлений, как увлажнение, внешний вид морщин, уход за волосами и стойкость цвета.

С химической стороны проверяются запрещённые и ограниченные вещества: тяжёлые металлы, запрещённые красители, концентрации консервантов, уровни УФ-фильтров и загрязнители, такие как нитрозамины. Продукты с наноматериалами подлежат отдельному уведомлению.

ЗАПРЕТ НА ИСПЫТАНИЯ НА ЖИВОТНЫХ — самое определяющее ограничение отрасли. Испытания на животных нельзя проводить ни на готовой продукции, ни на ингредиентах, а продукт, испытанный на животных, нельзя выводить на рынок. Поэтому альтернативные методы in vitro (реконструированные модели человеческой кожи, тесты на клеточных культурах) находятся в центре отрасли, а токсикологическая оценка в значительной степени опирается на существующие данные, подходы read-across и результаты in vitro.

Исследования стабильности и совместимости с упаковкой определяют срок годности и период после вскрытия (PAO). Также оценивается взаимодействие продукта с упаковкой: активное вещество может мигрировать в упаковку, а вещества, которых не должно быть в продукте, могут переходить из упаковки в продукт.

В части процесса надлежащая производственная практика подтверждается по ISO 22716; это отдельно от испытаний продукта, но обязательная часть файла.

Группы методов в этой области

Микробиологическое качество
Подсчёт аэробных мезофильных бактерий, дрожжей и плесени; выявление Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Candida albicans и E. coli.
Эффективность консерванта
Устойчивость консервирующей системы к повторному загрязнению по challenge-тесту (ISO 11930).
Солнцезащита
Определение SPF in vivo, определение защиты от UVA in vitro, водостойкость и измерения критической длины волны.
Химический анализ
Тяжёлые металлы, запрещённые и ограниченные вещества, количественное определение консервантов и УФ-фильтров, скрининг загрязнителей.
Оценка безопасности
Методы in vitro для раздражения и сенсибилизации, оценка токсикологического риска, расчёты воздействия.
Стабильность и совместимость
Стабильность в реальном времени и ускоренная, совместимость с упаковкой, определение PAO, сенсорный и физико-химический мониторинг.

Часто путаемое в этой области

На косметике НЕТ маркировки CE; соответствие подтверждается через PIF, оценку безопасности и уведомление.
Ответственное лицо должно быть учреждено в ЕС; если экспортёр не организует это, продукт нельзя выводить на рынок.
Микробиологическое качество и эффективность консерванта — разные испытания; продукт с чистым результатом может всё же иметь слабую консервирующую систему.
Запрет на испытания на животных распространяется и на ингредиенты; данные испытаний на животных, полученные для другого рынка, создают проблему использования.
Заявление о SPF должно быть подтверждено измерением; изменение состава требует нового измерения.
Изменение упаковки может потребовать повторения исследований стабильности и совместимости.

Какие решения подкрепляют эти результаты

Информационный файл продукта и оценка безопасности
Проверка конструкции консервирующей системы
Обоснование заявлений о SPF и эффективности
Определение срока годности и периода после вскрытия
Соблюдение ограничений целевого рынка при экспорте

Связанные тесты

Allergen: частые вопросы

Разве нам не следует провести анализ вместо предупреждения «может содержать»?

Анализ является частью демонстрации того, что риск перекрестного загрязнения контролируется, но одного этого недостаточно. Предупреждающее заявление должно быть основано на реальной оценке риска; Анализ поддерживает, а не заменяет эту оценку.

Почему уровень ИФА в термообработанных продуктах низкий?

Термическая обработка меняет структуру белка и может разрушить участки, распознаваемые антителом. В этом случае результат может быть ниже истины; ПЦР, нацеленная на ДНК, или ЖХ-МС/МС, нацеленная на пептиды, будут более подходящими.