Qu'est-ce que Method Validation ?
La validation d'une méthode analytique est la démonstration expérimentale qu'une méthode est adaptée à l'usage auquel elle est destinée. ICH Q2(R2) définit les caractéristiques de performance à évaluer : spécificité, linéarité et portée, exactitude, précision (répétabilité et précision intermédiaire), limites de détection et de quantification et robustesse.
Objectif de Method Validation
Le but est de montrer que les données analytiques produites sont fiables. Un résultat produit par une méthode non validée n'est pas accepté dans le dossier d'autorisation de mise sur le marché ou sous BPF.
À quels produits Method Validation s'applique-t-il ?
- Méthodes de dosage et d'impuretés
- Méthodes de test de dissolution
- Méthodes de vérification du nettoyage
- Méthodes microbiologiques
- Méthodes bioanalytiques
Dans quels secteurs Method Validation est-il utilisé ?
Normes relatives à Method Validation
- ICH Q2(R2) (validation des procédures analytiques)
- ICH Q14 (développement de procédures analytiques)
- Ph.Eur. 5.21 (méthodes chimiométriques) et chapitres généraux pertinents
- USP <1225> (validation des procédures officinales)
- USP <1226> (vérification des procédures officinales)
Conditions de Method Validation
- Type de méthode
- Identité, test, test limite pour les impuretés ou test quantitatif des impuretés ; les paramètres requis varient en conséquence
- Critères d'acceptation
- Prédéfini dans le protocole de validation
- Dégradation forcée
- Requis pour les méthodes indiquant la stabilité comme preuve de spécificité
Équipement pour Method Validation
- Systèmes HPLC/UPLC/GC
- Spectrophotomètres
- Étalons de référence et étalons d’impuretés
- Logiciel d'évaluation statistique
Exigences d'échantillon pour Method Validation
- Échantillons de substance active, de produit et de placebo
- Normes d'impuretés connues
- Échantillons de dégradation forcée
- Le projet de méthode et la description de l’utilisation prévue doivent être fournis
Durée de Method Validation
Une étude de validation complète prend des semaines en raison du nombre de paramètres et des exigences de répétition. La vérification d'une méthode officinale est plus courte.
Procédure de Method Validation
- 1L'utilisation prévue et le type de la méthode sont définis.
- 2Le protocole de validation et les critères d'acceptation sont préparés.
- 3Une étude de spécificité est réalisée ; une dégradation forcée est appliquée si nécessaire.
- 4L'étude de linéarité et de portée est réalisée.
- 5Des études d'exactitude (récupération) et de précision sont réalisées.
- 6Les limites de détection/quantification et la robustesse sont évaluées ; le rapport est préparé.
Critères d'acceptation de Method Validation
Les critères d'acceptation sont définis dans le protocole de validation AVANT l'étude et sont fixés en fonction de l'usage prévu de la méthode. ICH Q2(R2) définit quels paramètres doivent être évalués ; l'organisation fixe les seuils numériques d'acceptation avec sa propre justification.
Évaluation des résultats
La validation montre que la méthode est adaptée à l'utilisation définie, et non qu'elle fonctionnera dans toutes les conditions. Une réévaluation est nécessaire si la méthode doit être utilisée dans une matrice différente ou dans une plage de concentrations différente. Pour les méthodes pharmacopées, la vérification peut être suffisante au lieu d’une validation complète.
Rapport de Method Validation
- Description de la méthode et utilisation prévue
- Protocole de validation et critères d'acceptation
- Données brutes et évaluation statistique pour chaque paramètre
- Comparaison des résultats par rapport aux critères
- Conclusion et champ de validité de la méthode
Accréditation
EUROLAB détient une accréditation internationalement reconnue obtenue auprès des organismes d'accréditation parties aux accords de reconnaissance multilatérale de l'IAF et de l'ILAC, selon ISO/IEC 17025 pour les tests en laboratoire, ISO/IEC 17020 pour l'inspection et la surveillance, et ISO/IEC 17021-1 et ISO/IEC 17065 pour la certification des systèmes et des produits. Cette chaîne garantit que les rapports et certificats délivrés sont acceptés dans le monde entier.
La possibilité de proposer ce test dans le cadre d'une accréditation dépend de votre produit et de la norme appliquée ; l'accréditation étant méthodologique, le périmètre est confirmé par écrit au stade du devis.
Portée et autorisationsRèglements connexes
- Directive 2001/83/CE relative aux médicaments à usage humain
- Guide BPF (EudraLex Volume 4)
Analyse pharmaceutique — Que couvre ce domaine d'essai ?
La section ci-dessous décrit le domaine auquel appartient l'essai Method Validation ; les conditions et critères d'acceptation de cet essai figurent dans les sections ci-dessus. Le périmètre propre à votre produit est confirmé par écrit au stade du devis.
L'analyse pharmaceutique permet de déterminer l'identité, la pureté, la quantité et le comportement du principe actif d'un médicament et du produit fini. Ce qui distingue cette discipline des autres, c'est que les méthodes sont en grande partie définies dans les pharmacopées : la Pharmacopée européenne (Ph. Eur.) et la Pharmacopée des États-Unis (USP) fournissent à la fois la méthode et le cadre de référence.
Le caractère contraignant de la méthode de la pharmacopée détermine le mode de fonctionnement du secteur. Alors que dans d'autres secteurs, un laboratoire peut choisir une méthode appropriée, ici, c'est la méthode décrite dans la monographie qui fait autorité ; si une méthode alternative doit être utilisée, il faut en démontrer l'équivalence. Cela garantit la comparabilité des résultats à l'échelle mondiale.
Les analyses sont réalisées selon plusieurs groupes. L'identification et la quantification (HPLC, UV, titrage) permettent de déterminer la nature du produit et sa teneur en principe actif. Le profil d'impuretés et les résidus de solvants permettent de détecter les composés indésirables issus du processus de fabrication. Les impuretés élémentaires concernent les métaux provenant des catalyseurs et des équipements. Le comportement de dissolution et de dispersion constitue le principal indicateur in vitro du comportement de libération du médicament dans l'organisme.
L'ESSAI DE DISSOLUTION est l'une des mesures les plus critiques dans ce domaine. Il ne suffit pas qu'un comprimé contienne la quantité adéquate de principe actif ; celui-ci doit également se dissoudre à une vitesse appropriée. Le profil de dissolution sert à évaluer l'impact des modifications de la formulation sur la biodisponibilité et occupe une place centrale dans l'autorisation de mise sur le marché des médicaments génériques.
La VALIDATION DE LA MÉTHODE est une étape obligatoire dans cette famille. Si la méthode de la pharmacopée est utilisée, on vérifie qu'elle fonctionne correctement dans les conditions propres à ce laboratoire. Si une méthode propre a été mise au point, elle est validée à l'aide de paramètres tels que la linéarité, la précision, l'exactitude, la sélectivité, les limites de détection et de quantification, ainsi que la robustesse. Les résultats obtenus à l'aide d'une méthode non validée ne peuvent pas être utilisés dans le dossier d'autorisation de mise sur le marché.
Les essais de stabilité déterminent la durée de conservation et constituent le processus le plus long dans ce domaine. Le produit est conservé dans des conditions de température et d'humidité définies, puis analysé à intervalles réguliers ; les résultats servent de base à l'établissement de la durée de conservation et des conditions de stockage. Les essais en conditions accélérées fournissent des informations préliminaires, mais les données en temps réel sont essentielles.
Le volet microbiologique constitue un domaine à part entière : comptage de la charge microbienne, recherche de micro-organismes ciblés, test de stérilité des produits stériles et test de détection des endotoxines bactériennes. Pour les produits stériles, l'intégrité de l'emballage et la validation de la stérilisation entrent également en ligne de compte.
L'intégrité des données est devenue ces dernières années le point central des inspections. Il ne suffit pas que le résultat soit correct ; les données brutes doivent être traçables, inaltérables et auditables. La validation des systèmes d'enregistrement électronique est ainsi devenue une part indissociable de l'analyse.
Groupes de méthodes dans ce domaine
Identité et dosage
HPLC, UPLC, spectrophotométrie UV-Vis, titrage, confirmation d'identité par FTIR.
Impuretés et résidus
Impuretés apparentées, produits de dégradation, solvants résiduels (GC-headspace), criblage des nitrosamines.
Impuretés élémentaires
Détermination des impuretés élémentaires par ICP-MS et ICP-OES et évaluation du risque associée.
Physico-chimique
Dissolution et désagrégation, dureté, friabilité, uniformité des unités de dose, teneur en eau (Karl Fischer), taille des particules.
Microbiologique
Dénombrement microbien, micro-organismes spécifiés, stérilité, endotoxine bactérienne, efficacité du conservateur.
Stabilité
Études de stabilité en temps réel et accélérée ; photostabilité et stabilité en cours d'utilisation.
Confusions fréquentes dans ce domaine
- La méthode pharmacopéique est contraignante ; une méthode alternative ne peut être utilisée qu'en démontrant son équivalence.
- Un résultat produit sans validation de méthode ne peut être utilisé dans un dossier d'autorisation.
- La stabilité accélérée ne remplace pas les données en temps réel ; la durée de conservation est étayée par des résultats en temps réel.
- Le profil de dissolution est sensible au type d'appareil, à la vitesse d'agitation et au milieu ; les conditions doivent être complètes dans le rapport.
- Une lacune dans l'intégrité des données produit une non-conformité lors d'une inspection, même si le résultat est correct.
- Un changement de formulation ou de fournisseur nécessite une comparaison analytique et, si besoin, une nouvelle étude de stabilité.
Quelles décisions ces résultats étayent
- Le dossier d'autorisation et la libération des lots
- Détermination de la durée de conservation et des conditions de stockage
- Transfert de méthode et validation de méthode
- Contrôle d'acceptation des matières premières entrantes des fournisseurs
- Évaluation de l'effet d'un changement de formulation sur la bioéquivalence
Tests associés
Questions fréquentes sur Method Validation
La validation est-elle requise pour une méthode pharmacopée ?
Une validation complète n'est généralement pas requise, mais une vérification l'est : elle doit être démontrée que la méthode fonctionne avec votre échantillon dans votre laboratoire. L'USP <1226> définit cette approche.
Si on change de méthode, la revalidation est-elle obligatoire ?
Cela dépend de l'ampleur du changement. Pour des changements mineurs, une réévaluation des paramètres concernés peut suffire ; un changement qui modifie le principe de séparation nécessite une validation complète.