Method Validation چیست؟
اعتبار سنجی روش تحلیلی نشان دادن تجربی است که یک روش برای استفاده مورد نظرش مناسب است. ICH Q2 (R2) ویژگی های عملکردی را که باید ارزیابی شوند تعریف می کند: ویژگی، خطی بودن و برد، دقت، دقت (تکرارپذیری و دقت متوسط)، محدودیت های تشخیص و کمی سازی، و استحکام.
هدف Method Validation
هدف، نشان دادن قابل اعتماد بودن داده های تحلیلی است. نتیجه تولید شده با روشی نامعتبر در پرونده مجوز بازاریابی یا تحت GMP پذیرفته نمی شود.
Method Validation بر چه محصولاتی اعمال می‌شود؟
- روش های سنجش و ناخالصی
- روش های تست انحلال
- روش های تأیید تمیز کردن
- روش های میکروبیولوژیکی
- روش های بیوآنالیز
Method Validation در چه صنایعی کاربرد دارد؟
استانداردهای مرتبط با Method Validation
- ICH Q2(R2) (اعتبارسنجی رویه های تحلیلی)
- ICH Q14 (توسعه رویه تحلیلی)
- Ph. Eur. 5.21 (روش های شیمی سنجی) و فصول کلی مربوطه
- USP <1225> (تایید رویه های تکمیلی)
- USP <1226> (تأیید رویه های تکمیلی)
شرایط Method Validation
- نوع روش
- شناسایی، سنجش، آزمایش حد برای ناخالصی ها، یا آزمایش کمی ناخالصی؛ پارامترهای مورد نیاز بر این اساس متفاوت است
- معیارهای پذیرش
- در پروتکل اعتبار سنجی از پیش تعریف شده است
- تخریب اجباری
- برای روش‌های نشان‌دهنده پایداری به عنوان شواهدی از ویژگی مورد نیاز است
تجهیزات Method Validation
- سیستم های HPLC / UPLC / GC
- اسپکتروفتومترها
- استانداردهای مرجع و استانداردهای ناخالصی
- نرم افزار ارزیابی آماری
الزامات نمونه برای Method Validation
- نمونه های ماده فعال، محصول و دارونما
- استانداردهای ناخالصی شناخته شده
- نمونه های تخریب اجباری
- پیش نویس روش و شرح استفاده مورد نظر باید ارائه شود
مدت Method Validation
یک مطالعه اعتبار سنجی کامل به دلیل تعداد پارامترها و نیازهای تکرار هفته ها طول می کشد. تأیید یک روش تکمیلی کوتاه‌تر است.
روش اجرای Method Validation
- 1نوع و کاربرد مورد نظر روش تعریف شده است.
- 2پروتکل اعتبار سنجی و معیارهای پذیرش آماده شده است.
- 3یک مطالعه اختصاصی انجام می شود. در صورت نیاز، تخریب اجباری اعمال می شود.
- 4مطالعه خطی و محدوده انجام شده است.
- 5دقت (بازیابی) و مطالعات دقیق انجام می شود.
- 6محدودیت‌های تشخیص/کمی‌سنجی و استحکام ارزیابی می‌شوند. گزارش تهیه می شود.
معیارهای پذیرش Method Validation
معیارهای پذیرش در پروتکل اعتبار سنجی قبل از مطالعه تعریف شده و با توجه به استفاده مورد نظر روش تنظیم می شوند. ICH Q2(R2) تعیین می کند که کدام پارامترها باید ارزیابی شوند. سازمان آستانه های پذیرش عددی را با توجیه خود تعیین می کند.
ارزیابی نتایج
اعتبار سنجی نشان می دهد که روش برای استفاده تعریف شده مناسب است، نه اینکه تحت هر شرایطی کار کند. اگر قرار است روش در ماتریس متفاوت یا محدوده غلظت متفاوت استفاده شود، ارزیابی مجدد مورد نیاز است. برای روش های فارمکوپه، تأیید ممکن است به جای تأیید کامل کافی باشد.
گزارش Method Validation
- شرح روش و استفاده مورد نظر
- پروتکل اعتبار سنجی و معیارهای پذیرش
- داده های خام و ارزیابی آماری برای هر پارامتر
- مقایسه نتایج با معیارها
- نتیجه گیری و دامنه روایی روش
اعتباربخشی
EUROLAB دارای اعتبار شناخته شده بین المللی است که از نهادهای اعتباربخشی طرف قراردادهای شناسایی چندجانبه IAF و ILAC، تحت ISO/IEC 17025 برای تست های آزمایشگاهی، ISO/IEC 17020 برای بازرسی و نظارت، و ISO/IEC 17021-1 و سیستم گواهی محصول ISO/IEC. این زنجیره تضمین می کند که گزارش ها و گواهی های صادر شده در سراسر جهان پذیرفته می شوند.
اینکه آیا این آزمون می تواند در محدوده معتبر ارائه شود به محصول شما و استاندارد اعمال شده بستگی دارد. از آنجایی که اعتبارسنجی مبتنی بر روش است، دامنه به صورت کتبی در مرحله نقل قول تأیید می شود.
محدوده و مجوزهامقررات مرتبط
- دستورالعمل 2001/83/EC در مورد محصولات دارویی برای استفاده انسانی
- راهنمای GMP (EudraLex جلد 4)
آنالیز دارویی — این حوزه آزمون چه چیزی را پوشش می‌دهد؟
بخش زیر حوزه‌ای را توصیف می‌کند که آزمون Method Validation به آن تعلق دارد؛ شرایط و معیارهای پذیرش این آزمون خاص در بخش‌های بالا آمده است. دامنه ویژه محصول شما در مرحله پیشنهاد قیمت به‌صورت مکتوب مشخص می‌شود.
تحلیل دارویی هویت، خلوص، مقدار و رفتار ماده مؤثره دارو و محصول نهایی را تعیین می‌کند. آنچه این حوزه را از سایرین متمایز می‌کند این است که روش‌ها عمدتاً در داروخانه‌ها تعریف شده‌اند: هم فارماکوپه اروپا (Ph. Eur.) و هم فارماکوپه ایالات متحده (USP) هم روش و هم چارچوب پذیرش را ارائه می‌دهند.
ماهیت الزام‌آور روش فارماکوپه شیوه کار این حوزه را تعیین می‌کند. در حالی که در بخش‌های دیگر آزمایشگاه می‌تواند روش مناسبی را انتخاب کند، در اینجا روش ذکرشده در مونوگراف ملاک است؛ اگر قرار باشد روش جایگزینی استفاده شود، باید معادل‌بودن آن اثبات شود. این امر تضمین می‌کند که نتایج در سراسر جهان قابل مقایسه باشند.
تحلیل‌ها در چند گروه انجام می‌شود. شناسایی و تعیین مقدار (HPLC، UV، تیتراسیون) نشان می‌دهد محصول چیست و چه مقدار ماده مؤثره دارد. پروفایل ناخالصی و حلال‌های باقیمانده ترکیبات ناخواسته حاصل از فرآیند تولید را بررسی می‌کند. ناخالصی‌های عنصری به فلزات ناشی از کاتالیزورها و تجهیزات می‌پردازد. رفتار انحلال و پراکندگی مهم‌ترین شاخص برون‌تنی مرتبط با رفتار رهاسازی دارو در بدن است.
آزمون انحلال یکی از حیاتی‌ترین اندازه‌گیری‌های این حوزه است. کافی نیست یک قرص مقدار صحیح ماده مؤثره را داشته باشد؛ آن ماده باید با سرعت مناسب نیز حل شود. پروفایل انحلال برای ارزیابی تأثیر تغییرات فرمولاسیون بر زیست‌فراهمی استفاده می‌شود و در مجوز داروهای ژنریک جایگاه محوری دارد.
اعتبارسنجی روش گامی الزامی در این خانواده است. اگر از روش فارماکوپه استفاده شود، تأیید می‌شود که روش تحت شرایط آن آزمایشگاه به‌درستی کار می‌کند. اگر روش اختصاصی توسعه یافته باشد، با پارامترهایی مانند خطی‌بودن، دقت، صحت، گزینش‌پذیری، حد تشخیص و تعیین، و استحکام اعتبارسنجی می‌شود. نتایج حاصل از روشی که اعتبارسنجی نشده نمی‌تواند در پرونده مجوز استفاده شود.
مطالعات پایداری عمر قفسه را تعیین می‌کنند و طولانی‌ترین فرآیند این حوزه‌اند. محصول تحت شرایط دما و رطوبت تعریف‌شده نگهداری می‌شود، در فواصل معین تحلیل می‌شود و نتایج مبنای ادعاهای عمر قفسه و شرایط نگهداری قرار می‌گیرند. شرایط تسریع‌شده اطلاعات مقدماتی می‌دهند اما داده‌های زمان واقعی اساسی هستند.
بخش میکروبیولوژیک بخشی مستقل است: شمارش بار میکروبی، جست‌وجوی میکروارگانیسم‌های خاص، آزمون استریلیتی برای محصولات استریل و آزمون اندوتوکسین باکتریایی. برای محصولات استریل، بررسی یکپارچگی بسته‌بندی و اعتبارسنجی استریل‌سازی نیز مطرح می‌شود.
یکپارچگی داده (data integrity) در سال‌های اخیر به مرکز بازرسی‌ها تبدیل شده است. درست بودن نتیجه کافی نیست؛ داده خام باید ردیابی‌پذیر، غیرقابل‌تغییر و قابل ممیزی باشد. بنابراین اعتبارسنجی سیستم‌های ثبت الکترونیکی به بخش جدایی‌ناپذیر تحلیل تبدیل شده است.
گروه‌های روش در این حوزه
هویت و سنجش
HPLC، UPLC، اسپکتروفتومتری UV-Vis، تیتراسیون، تأیید هویت با FTIR.
ناخالصی و باقیمانده
ناخالصی‌های مرتبط، فرآورده‌های تجزیه، حلال‌های باقیمانده (GC-headspace)، غربالگری نیتروزامین.
ناخالصی‌های عنصری
تعیین ناخالصی‌های عنصری با ICP-MS و ICP-OES و ارزیابی ریسک مرتبط.
فیزیکوشیمیایی
انحلال و تفکیک، سختی، پودرشوندگی، یکنواختی واحد دوز، محتوای آب (کارل فیشر)، اندازه ذرات.
میکروبیولوژیک
شمارش میکروبی، میکروارگانیسم‌های مشخص‌شده، استریلیتی، اندوتوکسین باکتریایی، اثربخشی نگهدارنده.
پایداری
مطالعات پایداری زمان‌واقعی و تسریع‌شده؛ نورپایداری و پایداری حین استفاده.
موارد رایج اشتباه‌گرفته‌شده در این حوزه
- روش دستور دارویی الزام‌آور است؛ روش جایگزین تنها با اثبات هم‌ارزی آن قابل استفاده است.
- نتیجه تولیدشده بدون اعتبارسنجی روش را نمی‌توان در پرونده مجوز استفاده کرد.
- پایداری تسریع‌شده جایگزین داده زمان‌واقعی نمی‌شود؛ عمر قفسه با نتایج زمان‌واقعی پشتیبانی می‌شود.
- نمایه انحلال به نوع دستگاه، سرعت همزدن و محیط حساس است؛ شرایط باید در گزارش کامل باشد.
- کاستی در یکپارچگی داده حتی اگر نتیجه درست باشد در بازرسی عدم انطباق ایجاد می‌کند.
- تغییر فرمولاسیون یا تأمین‌کننده نیازمند مقایسه تحلیلی و در صورت لزوم مطالعه پایداری جدید است.
این نتایج از کدام تصمیم پشتیبانی می‌کنند
- پرونده مجوز و ترخیص محموله
- تعیین عمر قفسه و شرایط نگهداری
- انتقال روش و اعتبارسنجی روش
- کنترل پذیرش مواد اولیه ورودی از تأمین‌کنندگان
- ارزیابی اثر تغییر فرمولاسیون بر بیواکی‌والانس
تست های مرتبط
پرسش‌های متداول درباره Method Validation
آیا برای یک روش دارویی نیاز به اعتبارسنجی است؟
اعتبار سنجی کامل معمولاً مورد نیاز نیست، اما تأیید این است: باید نشان داده شود که روش با نمونه شما در آزمایشگاه کار می کند. USP <1226> این رویکرد را تعریف می کند.
اگر روش را تغییر دهیم، آیا اعتبار مجدد اجباری است؟
بستگی به دامنه تغییر دارد. برای تغییرات جزئی، ارزیابی مجدد پارامترهای تحت تأثیر ممکن است کافی باشد. تغییری که اصل جداسازی را تغییر می‌دهد نیاز به اعتبارسنجی کامل دارد.