Bioburden چیست؟
آزمایش بار زیستی تعداد و ماهیت جمعیت میکروارگانیسم های زنده موجود در محصول را قبل از عقیم سازی تعیین می کند. از آنجایی که تعیین دوز و فرآیند عقیم سازی به طور مستقیم به بار زیستی بستگی دارد، این یک ورودی اساسی برای اعتبار سنجی عقیم سازی است.
هدف Bioburden
هدف تولید داده‌های پایه میکروبیولوژیکی مورد نیاز برای طراحی و تأیید فرآیند استریل‌سازی و نظارت بر تداوم بهداشت تولید است.
Bioburden بر چه محصولاتی اعمال می‌شود؟
- دستگاه های پزشکی قبل از عقیم سازی
- ایمپلنت و ابزار جراحی
- مجموعه های یکبار مصرف
- اجزای بسته بندی استریل
- محصولات مراقبت از زخم
Bioburden در چه صنایعی کاربرد دارد؟
استانداردهای مرتبط با Bioburden
- ISO 11737-1تعیین بار میکروبی در تجهیزات پزشکی تست کنید
- ISO 11135
- ISO 11137-1
- ISO 11137-2
- USP <61>
شرایط Bioburden
- بازیابی
- روش حذف میکروارگانیسم ها از نمونه (تکان دادن، فراصوت، شستشو) باید تایید شود.
- کارایی بازیابی
- اینکه این روش چقدر میکروارگانیسم را بازیابی می کند، به عنوان یک فاکتور اصلاحی تعیین و در نتیجه اعمال می شود
- رسانه فرهنگ
- محیط کشت و شرایط جوجه کشی را برای تعداد باکتری و قارچ جدا کنید
تجهیزات Bioburden
- دستگاه سونیکاتور و شیکر
- واحد فیلتراسیون غشایی
- دستگاه های جوجه کشی
- سیستم شمارش کلونی
- کابینت ایمنی زیستی
الزامات نمونه برای Bioburden
- محصول گرفته شده از خط تولید، قبل از عقیم سازی
- تعداد نمونه ها بر اساس ISO 11737-1 تعیین می شود
- تاریخ نمونه برداری، خط و اطلاعات دسته باید ثبت شود
- نمونه ها باید تحت شرایطی حمل شوند که اجازه رشد میکروبی را ندهد
مدت Bioburden
مطالعه اولیه، از جمله مطالعه بهبودی، چند هفته طول می کشد. بسته به دوره نهفتگی، نتایج پایش معمول در عرض چند روز به دست می آید.
روش اجرای Bioburden
- 1روش بازیابی انتخاب شده و کارایی آن مشخص می شود.
- 2نمونه ها در شرایط آسپتیک گرفته می شوند.
- 3میکروارگانیسم ها از محصول حذف می شوند.
- 4مایع حاصل به محیط کشت تلقیح یا فیلتر می شود.
- 5در دما و مدت زمان مناسب انکوبه می شود.
- 6کلنی ها با فاکتور بازیابی شمارش و تصحیح می شوند.
- 7نتیجه به صورت CFU در هر محصول گزارش می شود.
معیارهای پذیرش Bioburden
آزمون بار زیستی به خودی خود محدودیت پذیرش ندارد. نتیجه یک ورودی است. این سازمان یک محدودیت هشدار و اقدام برای سطح بار زیستی مورد استفاده در اعتبار سنجی عقیم سازی تعریف می کند و نتایج معمول را با این محدودیت ها مقایسه می کند.
ارزیابی نتایج
نتایج به عنوان یک روند در طول زمان ارزیابی می شوند. افزایش بار زیستی ممکن است نیاز به ارزیابی مجدد دوز استریلیزاسیون داشته باشد. بنابراین نظارت معمول بخشی از حفظ اعتبار عقیم سازی است.
گزارش Bioburden
- استاندارد و روش اعمال شده
- شرح نمونه، دسته و تاریخ نمونه برداری
- روش بازیابی و ضریب کارایی
- محیط کشت و شرایط جوجه کشی
- نتایج CFU در هر محصول
- مقایسه با محدودیت های هشدار/عمل
اعتباربخشی
EUROLAB دارای اعتبار شناخته شده بین المللی است که از نهادهای اعتباربخشی طرف قراردادهای شناسایی چندجانبه IAF و ILAC، تحت ISO/IEC 17025 برای تست های آزمایشگاهی، ISO/IEC 17020 برای بازرسی و نظارت، و ISO/IEC 17021-1 و سیستم گواهی محصول ISO/IEC. این زنجیره تضمین می کند که گزارش ها و گواهی های صادر شده در سراسر جهان پذیرفته می شوند.
اینکه آیا این آزمون می تواند در محدوده معتبر ارائه شود به محصول شما و استاندارد اعمال شده بستگی دارد. از آنجایی که اعتبارسنجی مبتنی بر روش است، دامنه به صورت کتبی در مرحله نقل قول تأیید می شود.
محدوده و مجوزهامقررات مرتبط
- MDR (EU) 2017/745
- ISO 11135 / ISO 11137
آنالیز دارویی — این حوزه آزمون چه چیزی را پوشش می‌دهد؟
بخش زیر حوزه‌ای را توصیف می‌کند که آزمون Bioburden به آن تعلق دارد؛ شرایط و معیارهای پذیرش این آزمون خاص در بخش‌های بالا آمده است. دامنه ویژه محصول شما در مرحله پیشنهاد قیمت به‌صورت مکتوب مشخص می‌شود.
تحلیل دارویی هویت، خلوص، مقدار و رفتار ماده مؤثره دارو و محصول نهایی را تعیین می‌کند. آنچه این حوزه را از سایرین متمایز می‌کند این است که روش‌ها عمدتاً در داروخانه‌ها تعریف شده‌اند: هم فارماکوپه اروپا (Ph. Eur.) و هم فارماکوپه ایالات متحده (USP) هم روش و هم چارچوب پذیرش را ارائه می‌دهند.
ماهیت الزام‌آور روش فارماکوپه شیوه کار این حوزه را تعیین می‌کند. در حالی که در بخش‌های دیگر آزمایشگاه می‌تواند روش مناسبی را انتخاب کند، در اینجا روش ذکرشده در مونوگراف ملاک است؛ اگر قرار باشد روش جایگزینی استفاده شود، باید معادل‌بودن آن اثبات شود. این امر تضمین می‌کند که نتایج در سراسر جهان قابل مقایسه باشند.
تحلیل‌ها در چند گروه انجام می‌شود. شناسایی و تعیین مقدار (HPLC، UV، تیتراسیون) نشان می‌دهد محصول چیست و چه مقدار ماده مؤثره دارد. پروفایل ناخالصی و حلال‌های باقیمانده ترکیبات ناخواسته حاصل از فرآیند تولید را بررسی می‌کند. ناخالصی‌های عنصری به فلزات ناشی از کاتالیزورها و تجهیزات می‌پردازد. رفتار انحلال و پراکندگی مهم‌ترین شاخص برون‌تنی مرتبط با رفتار رهاسازی دارو در بدن است.
آزمون انحلال یکی از حیاتی‌ترین اندازه‌گیری‌های این حوزه است. کافی نیست یک قرص مقدار صحیح ماده مؤثره را داشته باشد؛ آن ماده باید با سرعت مناسب نیز حل شود. پروفایل انحلال برای ارزیابی تأثیر تغییرات فرمولاسیون بر زیست‌فراهمی استفاده می‌شود و در مجوز داروهای ژنریک جایگاه محوری دارد.
اعتبارسنجی روش گامی الزامی در این خانواده است. اگر از روش فارماکوپه استفاده شود، تأیید می‌شود که روش تحت شرایط آن آزمایشگاه به‌درستی کار می‌کند. اگر روش اختصاصی توسعه یافته باشد، با پارامترهایی مانند خطی‌بودن، دقت، صحت، گزینش‌پذیری، حد تشخیص و تعیین، و استحکام اعتبارسنجی می‌شود. نتایج حاصل از روشی که اعتبارسنجی نشده نمی‌تواند در پرونده مجوز استفاده شود.
مطالعات پایداری عمر قفسه را تعیین می‌کنند و طولانی‌ترین فرآیند این حوزه‌اند. محصول تحت شرایط دما و رطوبت تعریف‌شده نگهداری می‌شود، در فواصل معین تحلیل می‌شود و نتایج مبنای ادعاهای عمر قفسه و شرایط نگهداری قرار می‌گیرند. شرایط تسریع‌شده اطلاعات مقدماتی می‌دهند اما داده‌های زمان واقعی اساسی هستند.
بخش میکروبیولوژیک بخشی مستقل است: شمارش بار میکروبی، جست‌وجوی میکروارگانیسم‌های خاص، آزمون استریلیتی برای محصولات استریل و آزمون اندوتوکسین باکتریایی. برای محصولات استریل، بررسی یکپارچگی بسته‌بندی و اعتبارسنجی استریل‌سازی نیز مطرح می‌شود.
یکپارچگی داده (data integrity) در سال‌های اخیر به مرکز بازرسی‌ها تبدیل شده است. درست بودن نتیجه کافی نیست؛ داده خام باید ردیابی‌پذیر، غیرقابل‌تغییر و قابل ممیزی باشد. بنابراین اعتبارسنجی سیستم‌های ثبت الکترونیکی به بخش جدایی‌ناپذیر تحلیل تبدیل شده است.
گروه‌های روش در این حوزه
هویت و سنجش
HPLC، UPLC، اسپکتروفتومتری UV-Vis، تیتراسیون، تأیید هویت با FTIR.
ناخالصی و باقیمانده
ناخالصی‌های مرتبط، فرآورده‌های تجزیه، حلال‌های باقیمانده (GC-headspace)، غربالگری نیتروزامین.
ناخالصی‌های عنصری
تعیین ناخالصی‌های عنصری با ICP-MS و ICP-OES و ارزیابی ریسک مرتبط.
فیزیکوشیمیایی
انحلال و تفکیک، سختی، پودرشوندگی، یکنواختی واحد دوز، محتوای آب (کارل فیشر)، اندازه ذرات.
میکروبیولوژیک
شمارش میکروبی، میکروارگانیسم‌های مشخص‌شده، استریلیتی، اندوتوکسین باکتریایی، اثربخشی نگهدارنده.
پایداری
مطالعات پایداری زمان‌واقعی و تسریع‌شده؛ نورپایداری و پایداری حین استفاده.
موارد رایج اشتباه‌گرفته‌شده در این حوزه
- روش دستور دارویی الزام‌آور است؛ روش جایگزین تنها با اثبات هم‌ارزی آن قابل استفاده است.
- نتیجه تولیدشده بدون اعتبارسنجی روش را نمی‌توان در پرونده مجوز استفاده کرد.
- پایداری تسریع‌شده جایگزین داده زمان‌واقعی نمی‌شود؛ عمر قفسه با نتایج زمان‌واقعی پشتیبانی می‌شود.
- نمایه انحلال به نوع دستگاه، سرعت همزدن و محیط حساس است؛ شرایط باید در گزارش کامل باشد.
- کاستی در یکپارچگی داده حتی اگر نتیجه درست باشد در بازرسی عدم انطباق ایجاد می‌کند.
- تغییر فرمولاسیون یا تأمین‌کننده نیازمند مقایسه تحلیلی و در صورت لزوم مطالعه پایداری جدید است.
این نتایج از کدام تصمیم پشتیبانی می‌کنند
- پرونده مجوز و ترخیص محموله
- تعیین عمر قفسه و شرایط نگهداری
- انتقال روش و اعتبارسنجی روش
- کنترل پذیرش مواد اولیه ورودی از تأمین‌کنندگان
- ارزیابی اثر تغییر فرمولاسیون بر بیواکی‌والانس
تست های مرتبط
پرسش‌های متداول درباره Bioburden
چرا بار زیستی بر دوز استریلیزاسیون تأثیر می گذارد؟
عقیم سازی تعداد میکروارگانیسم ها را به صورت لگاریتمی کاهش می دهد. هر چه تعداد میکروارگانیسم های اولیه بیشتر باشد، دوز بالاتر یا زمان بیشتری برای رسیدن به همان سطح تضمین عقیمی (SAL) لازم است. بنابراین بار زیستی یک ورودی مستقیم برای تعیین دوز است.
چرا بازده بازیابی اندازه گیری می شود؟
همه میکروارگانیسم ها را نمی توان از محصول حذف کرد. اگر فاکتور کارایی مشخص نباشد، بار زیستی واقعی کمتر از آنچه هست به نظر می رسد و دوز استریلیزاسیون ناکافی تعیین می شود. این یک خطر مستقیم ایمنی است.