Microbial Limits

Was ist Microbial Limits?

Mikrobielle Grenztests bewerten die mikrobiologische Qualität von Produkten, die nicht steril sein müssen. Sie bestehen aus zwei Teilen: der Gesamtzahl der aeroben Mikroben zusammen mit der Gesamtzahl der Hefen und Schimmelpilze (Ph. Eur. 2.6.12) und der Prüfung auf bestimmte Mikroorganismen, bestimmt nach Produktkategorie (Ph. Eur. 2.6.13).

Zweck von Microbial Limits

Der Zweck besteht darin, nachzuweisen, dass das Produkt mikrobiologische Qualitätskriterien erfüllt und frei von den angegebenen Krankheitserregern ist. Die Kriterien variieren je nach Verabreichungsweg des Produkts.

Bei welchen Produkten wird Microbial Limits angewendet?

Orale feste und flüssige Formen
Topische Cremes, Gele und Salben
Inhalationsprodukte
Pflanzliche Arzneimittel
Hilfsstoffe

In welchen Branchen wird Microbial Limits eingesetzt?

ArzneimittelBiotechnologieKosmetika

Normen zu Microbial Limits

Ph. Eur. 2.6.12 (Mikrobenzählungstests)
Ph. Eur. 2.6.13 (Test auf spezifizierte Mikroorganismen)
Ph. Eur. 5.1.4 (Mikrobiologische Qualität nicht steriler Produkte)
USP <61>, <62> und <1111>

Prüfbedingungen für Microbial Limits

Methodeneignung: Es muss nachgewiesen werden, dass die antimikrobielle Wirkung des Produkts neutralisiert wurde
Inkubation: Medien, Temperatur und Dauer sind im Arzneibuch definiert
Spezifizierte Mikroorganismen: Die zu testende Liste variiert je nach Verabreichungsweg

Prüfgerät für Microbial Limits

Sterilschrank und Inkubatoren
Aufbau einer Membranfiltration
Autoklav und Medienvorbereitungssystem
Koloniezähler

Probenanforderungen für Microbial Limits

Exemplar in der ungeöffneten Originalverpackung
Für die Methodeneignungsstudie sind zusätzliche Proben erforderlich
Der Verabreichungsweg des Produkts muss angegeben werden — er bestimmt, auf welche Mikroorganismen getestet wird
Es müssen Informationen zur Formulierung und zum Konservierungssystem bereitgestellt werden

Dauer von Microbial Limits

Die Zählung und Prüfung bestimmter Mikroorganismen dauert so lange wie die im Arzneibuch festgelegten Inkubationszeiten. Wenn die Methodeneignungsstudie zum ersten Mal durchgeführt wird, verlängert sich die Dauer.

Ablauf von Microbial Limits

1Die Eignung der Methode wird überprüft; Die antimikrobielle Wirkung des Produkts wird neutralisiert.
2Die Probe wird aseptisch vorbereitet.
3Für die gesamte aerobe Keimzahl wird eine Ausplattierung durchgeführt.
4Für die Hefe- und Schimmelpilzzählung erfolgt eine getrennte Auswertung.
5Je nach Verabreichungsweg werden bestimmte Mikroorganismen getestet.
6Die Ergebnisse werden mit den Arzneibuchkriterien verglichen.

Annahmekriterien für Microbial Limits

Ph. Eur. 5.1.4 definiert die akzeptablen mikrobiellen Grenzwerte und die spezifizierten Mikroorganismen, auf die getestet werden soll, je nach Verabreichungsweg. Für orale, topische und inhalative Produkte gelten unterschiedliche Kriterien. Das Akzeptanzkriterium wird auf dieser Seite nicht angegeben: Für jeden Wirkstoff und jedes Produkt ergibt sich der Grenzwert aus der jeweiligen Arzneibuchmonographie oder der genehmigten Spezifikation im Zulassungsdossier. Das allgemeine Kapitel des Arzneibuchs definiert die Methode; Die Monographie setzt die Grenze.

Auswertung der Ergebnisse

Die Untersuchung der Methodeneignung kann nicht übersprungen werden: Wenn das Konservierungssystem des Produkts nicht neutralisiert wird, können die Mikroorganismen nicht auf dem Medium wachsen und das Ergebnis sieht besser aus, als es tatsächlich ist. Dies ist der häufigste Fehler bei der mikrobiellen Grenzwertprüfung.

Prüfbericht zu Microbial Limits

Produktidentifikation, Charge und Verabreichungsweg
Ergebnisse der Methodeneignungsstudie
Gesamte aerobe Anzahl und Hefe-/Schimmelpilzanzahl
Spezifizierte getestete Mikroorganismen und ihre Ergebnisse
Pharmakopöe-Kriterien im Vergleich dazu

Akkreditierung

EUROLAB verfügt über eine international anerkannte Akkreditierung, die von Akkreditierungsstellen erhalten wurde, die Vertragspartei der multilateralen Anerkennungsvereinbarungen IAF und ILAC sind, gemäß ISO/IEC 17025 für Labortests, ISO/IEC 17020 für Inspektion und Überwachung sowie ISO/IEC 17021-1 und ISO/IEC 17065 für System- und Produktzertifizierung. Diese Kette stellt sicher, dass die ausgestellten Berichte und Zertifikate weltweit akzeptiert werden.

Ob dieser Test im akkreditierten Rahmen angeboten werden kann, hängt von Ihrem Produkt und der angewandten Norm ab; Da die Akkreditierung methodenbasiert erfolgt, wird der Umfang bereits im Angebotsstadium schriftlich bestätigt.

Geltungsbereich und Berechtigungen

Pharmazeutische Analyse — Was umfasst dieser Prüfbereich?

Der folgende Abschnitt beschreibt das Gebiet, zu dem der Test Microbial Limits gehört; die Bedingungen und Abnahmekriterien dieses konkreten Tests stehen in den obigen Abschnitten. Der für Ihr Produkt spezifische Umfang wird schriftlich im Angebotsstadium festgelegt.

Die pharmazeutische Analyse dient der Bestimmung der Identität, Reinheit, Menge und des Verhaltens des Wirkstoffs und des Fertigarzneimittels. Das Besondere an diesem Bereich ist, dass die Methoden weitgehend in den PHARMAKOPÖEN definiert sind: Sowohl die Europäische Pharmakopöe (Ph. Eur.) als auch die Pharmakopöe der Vereinigten Staaten (USP) legen sowohl die Methode als auch den Rahmen für die Anerkennung fest.

Die Verbindlichkeit der Pharmakopöe-Methode bestimmt die Arbeitsweise in diesem Bereich. Während in anderen Branchen das Labor eine geeignete Methode auswählen kann, ist hier die in der Monografie beschriebene Methode maßgebend; soll eine alternative Methode verwendet werden, muss deren Gleichwertigkeit nachgewiesen werden. Dies gewährleistet, dass die Ergebnisse weltweit vergleichbar sind.

Die Analysen werden in mehreren Gruppen durchgeführt. Die Identifizierung und Quantifizierung (HPLC, UV, Titration) zeigen, um welches Produkt es sich handelt und wie viel Wirkstoff es enthält. Das Verunreinigungsprofil und die Untersuchung auf Lösungsmittelrückstände dienen der Erkennung unerwünschter Verbindungen, die aus dem Herstellungsprozess stammen. Elementverunreinigungen beziehen sich auf Metalle, die aus Katalysatoren und Anlagen stammen. Das Auflösungs- und Verteilungsverhalten ist der wichtigste In-vitro-Indikator für das Freisetzungsverhalten des Arzneimittels im Körper.

Der Auflösungsversuch ist eine der wichtigsten Messungen in diesem Bereich. Es reicht nicht aus, dass eine Tablette die richtige Menge an Wirkstoff enthält; dieser Wirkstoff muss sich auch mit der richtigen Geschwindigkeit auflösen. Das Auflösungsprofil wird zur Bewertung der Auswirkungen von Änderungen an der Formulierung auf die Bioverfügbarkeit herangezogen und spielt bei der Zulassung von Generika eine zentrale Rolle.

Die VALIDIERUNG DER METHODE ist in dieser Produktfamilie ein obligatorischer Schritt. Wird eine Pharmakopöe-Methode verwendet, wird überprüft, ob die Methode unter den Bedingungen des jeweiligen Labors ordnungsgemäß funktioniert. Wurde eine eigene Methode entwickelt, wird diese anhand von Parametern wie Linearität, Präzision, Richtigkeit, Selektivität, Nachweis- und Bestimmungsgrenze sowie Robustheit validiert. Ergebnisse, die mit einer nicht validierten Methode erzielt wurden, dürfen nicht in den Zulassungsunterlagen verwendet werden.

Stabilitätsuntersuchungen bestimmen die Haltbarkeitsdauer und sind der zeitaufwändigste Arbeitsschritt in diesem Bereich. Das Produkt wird unter den für das jeweilige Produkt festgelegten Temperatur- und Feuchtigkeitsbedingungen gelagert, in bestimmten Abständen analysiert, und die Ergebnisse dienen als Grundlage für die Angabe der Haltbarkeitsdauer und der Lagerbedingungen. Beschleunigte Tests liefern zwar erste Anhaltspunkte, doch entscheidend sind die Echtzeitdaten.

Der mikrobiologische Bereich ist ein eigenständiger Teilbereich: Bestimmung der Keimzahl, Nachweis bestimmter Mikroorganismen, Sterilitätsprüfung bei sterilen Produkten und Prüfung auf bakterielle Endotoxine. Bei sterilen Produkten kommen zudem die Überprüfung der Verpackungsintegrität und die Sterilisationsvalidierung hinzu.

Die Datenintegrität ist in den letzten Jahren in den Mittelpunkt der Inspektionen gerückt. Es genügt nicht, dass das Ergebnis korrekt ist; die Rohdaten müssen rückverfolgbar, unveränderbar und prüfbar sein. Die Validierung elektronischer Aufzeichnungssysteme ist daher zu einem untrennbaren Teil der Analyse geworden.

Methodengruppen in diesem Bereich

Identität und Gehalt
HPLC, UPLC, UV-Vis-Spektrophotometrie, Titration, Identitätsbestätigung mittels FTIR.
Verunreinigungen und Rückstände
Verwandte Verunreinigungen, Abbauprodukte, Restlösungsmittel (GC-Headspace), Nitrosamin-Screening.
Elementverunreinigungen
Bestimmung von Elementverunreinigungen mittels ICP-MS und ICP-OES sowie zugehörige Risikobewertung.
Physikalisch-chemisch
Freisetzung und Zerfall, Härte, Abrieb, Gleichförmigkeit der Dosiereinheiten, Wassergehalt (Karl Fischer), Partikelgröße.
Mikrobiologisch
Mikrobielle Keimzahlbestimmung, spezifizierte Mikroorganismen, Sterilität, bakterielles Endotoxin, Konservierungsmittelwirksamkeit.
Stabilität
Echtzeit- und beschleunigte Stabilitätsstudien; Photostabilität und Stabilität während der Anwendung.

Häufig verwechselt in diesem Bereich

Die Arzneibuchmethode ist bindend; eine alternative Methode darf nur durch Nachweis ihrer Gleichwertigkeit verwendet werden.
Ein ohne Methodenvalidierung erzeugtes Ergebnis darf nicht in einem Zulassungsdossier verwendet werden.
Die beschleunigte Stabilität ersetzt nicht die Echtzeitdaten; die Haltbarkeit wird durch Echtzeitergebnisse gestützt.
Das Freisetzungsprofil ist empfindlich gegenüber Apparatetyp, Rührgeschwindigkeit und Medium; die Bedingungen müssen im Bericht vollständig sein.
Ein Mangel an Datenintegrität führt bei einer Inspektion zu einer Nichtkonformität, selbst wenn das Ergebnis korrekt ist.
Eine Änderung der Formulierung oder des Lieferanten erfordert einen analytischen Vergleich und, falls erforderlich, eine neue Stabilitätsstudie.

Welche Entscheidungen diese Ergebnisse unterstützen

Zulassungsdossier und Chargenfreigabe
Bestimmung von Haltbarkeit und Lagerbedingungen
Methodentransfer und Methodenvalidierung
Wareneingangskontrolle von Rohstoffen der Lieferanten
Bewertung der Auswirkung einer Formulierungsänderung auf die Bioäquivalenz

Häufige Fragen zu Microbial Limits

Muss die Methodeneignung für jede Charge wiederholt werden?

Nein, dies erfolgt einmal pro Produkt und bleibt gültig, sofern sich die Formulierung oder Methode nicht ändert. Es muss jedoch erneuert werden, wenn sich die Formulierung, das Konservierungssystem oder die Methode ändert.