Analyse des allergènes — ELISA / PCR / LC-MS/MS et Allergènes en Cosmétique · Essais cosmétiques

Qu'est-ce que Allergen ?

L’analyse des allergènes couvre deux domaines distincts. La présence et la quantité des allergènes répertoriés à l'annexe II du FOOD (EU) 1169/2011 sont déterminées par ELISA, PCR en temps réel ou LC-MS/MS ; L’ELISA R5 pour le gluten est largement utilisé. EN COSMÉTIQUE, les allergènes des parfums, qui doivent être étiquetés dans le règlement (CE) 1223/2009 Annexe III, sont mesurés par GC-MS.

Objectif de Allergen

L’objectif est de vérifier l’exactitude de la déclaration sur l’étiquette et l’efficacité du contrôle de la contamination croisée. Les allergènes non déclarés sont l’une des causes les plus courantes de rappels d’aliments.

À quels produits Allergen s'applique-t-il ?

Produits déclarés sans gluten
Produits de boulangerie et collations
Produits déclarés sans produits laitiers et sans noisettes
Plats cuisinés et sauces
Produits cosmétiques parfumés

Dans quels secteurs Allergen est-il utilisé ?

AlimentationAgricultureVente au détailProduits de beauté

Normes relatives à Allergen

Série TS EN 15634 (détection des allergènes dans les aliments — hypothèses générales et méthodes PCR)
AOAC 2012.01 (Détermination du gluten par R5 ELISA)
TS EN ISO 21571 (extraction d'acide nucléique)
Série ISO/TS 20224 (détermination des espèces animales, PCR en temps réel)
Série TS EN 16274 (Détermination des substances odorantes allergènes dans les cosmétiques par GC-MS)

Conditions de Allergen

Sélection de la méthode: Protein hedefliyse ELISA/LC-MS, DNA hedefliyse PCR
Effet de traitement: Le traitement thermique peut dénaturer la protéine et réduire le résultat ELISA
Gluten: Par ELISA R5 ; Seuil défini pour la déclaration « sans gluten »
Kozmetik alerjen: Les substances répertoriées à l'Annexe III sont examinées par GC-MS

Équipement pour Allergen

Lecteur de plaques ELISA et incubateur
Système PCR en temps réel
LC-MS/MS
GC-MS (pour les allergènes cosmétiques)
Homogénéisateur et broyeur

Exigences d'échantillon pour Allergen

Échantillon représentatif homogénéisé
Des échantillons sur écouvillon peuvent également être prélevés si une contamination croisée est étudiée.
Les paramètres de traitement doivent être déclarés
La composition du parfum et la liste INCI doivent être présentées dans les cosmétiques

Durée de Allergen

Les résultats ELISA sont disponibles relativement rapidement. Les analyses PCR et LC-MS/MS prennent plusieurs jours ouvrés ; Le dépistage des allergènes cosmétiques prend un temps similaire en raison de la mesure GC-MS.

Procédure de Allergen

1L'allergène cible et la méthode appropriée sont déterminés.
2L'échantillon est homogénéisé et extrait.
3En ELISA, une mesure basée sur les anticorps est effectuée.
4En PCR, l’extraction de l’ADN et l’amplification spécifique à l’espèce sont appliquées.
5Les peptides cibles sont mesurés en LC-MS/MS.
6En cosmétique, les substances parfumées allergènes sont criblées par GC-MS.

Critères d'acceptation de Allergen

Dans les aliments (UE) 1169/2011, les allergènes de l'annexe II doivent être déclarés en surbrillance dans la liste des ingrédients. Il fixe le seuil défini par le règlement (UE) 828/2014 pour l'allégation « sans gluten ». L'Annexe III du Règlement Cosmétiques (CE) 1223/2009 exige que les allergènes de parfum répertoriés soient indiqués séparément sur l'étiquette s'ils sont présents au-delà de certaines concentrations.

Évaluation des résultats

Un résultat négatif est limité à la limite de détection de la méthode et ne garantit pas « sans allergène ». De plus, le traitement peut modifier la protéine cible, diminuant ainsi le résultat ELISA ; Dans ce cas, la PCR ou la LC-MS/MS sont plus fiables. La gestion de la contamination croisée est obtenue par la séparation de la production et la vérification du nettoyage, et non par l'analyse.

Rapport de Allergen

Exemple de description et liste d’allergènes cibles
La méthode appliquée et sa justification
Résultat et limite de détection pour chaque allergène
Informations sur les paramètres de traitement
Comparaison des seuils ou des déclarations législatives

Accréditation

EUROLAB détient une accréditation internationalement reconnue obtenue auprès des organismes d'accréditation parties aux accords de reconnaissance multilatérale de l'IAF et de l'ILAC, selon ISO/IEC 17025 pour les tests en laboratoire, ISO/IEC 17020 pour l'inspection et la surveillance, et ISO/IEC 17021-1 et ISO/IEC 17065 pour la certification des systèmes et des produits. Cette chaîne garantit que les rapports et certificats délivrés sont acceptés dans le monde entier.

La possibilité de proposer ce test dans le cadre d'une accréditation dépend de votre produit et de la norme appliquée ; l'accréditation étant méthodologique, le périmètre est confirmé par écrit au stade du devis.

Portée et autorisations

Règlements connexes

Règlement (UE) 1169/2011 relatif à l'information des consommateurs sur les denrées alimentaires, Annexe II
Déclaration sans gluten Règlement (UE) 828/2014
(CE) 1223/2009 Règlement Produits Cosmétiques Annexe III

Kozmetik Testleri — Que couvre ce domaine d'essai ?

La section ci-dessous décrit le domaine auquel appartient l'essai Allergen ; les conditions et critères d'acceptation de cet essai figurent dans les sections ci-dessus. Le périmètre propre à votre produit est confirmé par écrit au stade du devis.

Les essais cosmétiques montrent qu'un produit reste microbiologiquement sûr pendant toute sa durée d'utilisation, offre les performances revendiquées et ne contient aucune substance restreinte. Il N'Y A PAS D'APPROBATION DE PRODUIT dans cette famille : aucune autorité n'approuve un produit cosmétique ; la responsabilité incombe entièrement au fabricant et à la personne responsable établie dans l'UE.

Ce modèle de responsabilité façonne le fonctionnement du domaine. Avant la mise sur le marché, un dossier d'information sur le produit (DIP) est préparé, une évaluation de la sécurité (CPSR) est réalisée et la notification est effectuée. Le contrôle intervient ensuite et exige le dossier ; s'il est incomplet, le produit est retiré du marché. Les rapports d'essai constituent la base de preuves de ce dossier.

Du côté microbiologique, deux questions distinctes se posent, chacune répondue par un essai séparé. La qualité microbiologique ACTUELLE du produit est mesurée par dénombrement et recherche de micro-organismes spécifiés. L'EFFICACITÉ du système conservateur est examinée en inoculant délibérément le produit avec des micro-organismes (test de challenge) : le produit peut-il résister à une contamination répétée pendant son utilisation ? Un pot de crème est touché du doigt à chaque utilisation ; le système conservateur doit y faire face.

Du côté des performances, des études de justification des allégations sont menées. Pour les écrans solaires, la détermination du FPS et de la protection UVA ainsi que la mesure de la résistance à l'eau sont obligatoires et constituent la base de la valeur déclarée sur l'étiquette. Des preuves sont également produites par des méthodes in vivo ou in vitro pour des allégations telles que l'hydratation, l'aspect des rides, le soin des cheveux et la tenue de la couleur.

Du côté chimique, les substances interdites et restreintes sont recherchées : métaux lourds, colorants interdits, concentrations de conservateurs, niveaux de filtres UV et contaminants tels que les nitrosamines. Les produits contenant des nanomatériaux sont soumis à une obligation de notification distincte.

L'INTERDICTION DES ESSAIS SUR LES ANIMAUX est la contrainte la plus déterminante du domaine. Les essais sur les animaux ne peuvent être réalisés ni sur les produits finis ni sur les ingrédients, et un produit testé sur les animaux ne peut être mis sur le marché. Les méthodes alternatives in vitro (modèles de peau humaine reconstruite, tests basés sur des cultures cellulaires) sont donc au cœur du domaine, et l'évaluation toxicologique repose largement sur les données existantes, les approches par extrapolation (read-across) et les résultats in vitro.

Les études de stabilité et de compatibilité avec l'emballage déterminent la durée de conservation et la période après ouverture (PAO). L'interaction du produit avec son emballage est également évaluée : une substance active peut migrer vers l'emballage, et des substances qui ne devraient pas être présentes peuvent passer de l'emballage au produit.

Du côté du processus, les bonnes pratiques de fabrication sont démontrées par la norme ISO 22716 ; ceci est distinct des essais sur le produit mais constitue une partie obligatoire du dossier.

Groupes de méthodes dans ce domaine

Qualité microbiologique
Dénombrement des bactéries aérobies mésophiles, des levures et des moisissures ; recherche de Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Candida albicans et E. coli.
Efficacité conservatrice
Résistance du système conservateur à une contamination répétée par test de challenge (ISO 11930).
Protection solaire
Détermination in vivo du FPS, détermination in vitro de la protection UVA, mesures de résistance à l'eau et de longueur d'onde critique.
Analyse chimique
Métaux lourds, substances interdites et restreintes, quantification des conservateurs et des filtres UV, dépistage des contaminants.
Évaluation de la sécurité
Méthodes in vitro d'irritation et de sensibilisation, évaluation du risque toxicologique, calculs d'exposition.
Stabilité et compatibilité
Stabilité en temps réel et accélérée, compatibilité avec l'emballage, détermination de la PAO, suivi sensoriel et physico-chimique.

Confusions fréquentes dans ce domaine

Il N'Y A PAS de marquage CE sur les cosmétiques ; la conformité est démontrée par le DIP, l'évaluation de sécurité et la notification.
La personne responsable doit être établie dans l'UE ; à moins que l'exportateur ne s'en charge, le produit ne peut pas être mis sur le marché.
La qualité microbiologique et l'efficacité conservatrice sont des essais différents ; un produit qui ressort propre peut néanmoins avoir un système conservateur faible.
L'interdiction des essais sur les animaux couvre aussi les ingrédients ; des données d'essais sur les animaux générées pour un autre marché posent un problème d'utilisation.
Une allégation de FPS doit être étayée par une mesure ; un changement de formulation nécessite une nouvelle mesure.
Un changement d'emballage peut nécessiter de répéter les études de stabilité et de compatibilité.

Quelles décisions ces résultats étayent

Le dossier d'information sur le produit et l'évaluation de sécurité
Vérification de la conception du système conservateur
Justification des allégations de FPS et d'efficacité
Détermination de la durée de conservation et de la période après ouverture
Conformité aux restrictions du marché de destination à l'exportation

Tests associés

Questions fréquentes sur Allergen

Ne devrions-nous pas avoir une analyse au lieu d'un avertissement « peut contenir » ?

L’analyse contribue à démontrer que le risque de contamination croisée est géré, mais elle ne suffit pas à elle seule. La déclaration d'avertissement doit être basée sur une véritable évaluation des risques ; L’analyse soutient, et non remplace, cette évaluation.

Pourquoi l'ELISA contient-elle peu de produits traités thermiquement ?

Le traitement thermique modifie la structure de la protéine et peut perturber les régions reconnues par l'anticorps. Dans ce cas, le résultat peut être inférieur à la vérité ; Une PCR ciblée sur l’ADN ou une LC-MS/MS ciblée sur les peptides seraient plus appropriées.