Τι είναι η UV-VIS — ανάλυση;
Ένα φασματοφωτόμετρο UV-VIS μετρά πόσο φως στην υπεριώδη και ορατή περιοχή απορροφά ένα διάλυμα. Η απορρόφηση είναι ευθέως ανάλογη με τη συγκέντρωση, σύμφωνα με τη σχέση Beer-Lambert.
Σκοπός της UV-VIS — ανάλυση
Σκοπός είναι να προσδιοριστεί η συγκέντρωση των ενώσεων που απορροφούν το φως γρήγορα και με χαμηλό κόστος. Σε συνδυασμό με αντιδραστήρια που σχηματίζουν χρώμα, ουσίες που δεν απορροφώνται από μόνες τους γίνονται επίσης μετρήσιμες.
Σε ποια προϊόντα εφαρμόζεται η UV-VIS — ανάλυση;
- Παράμετροι όπως νιτρικά, φωσφορικά, COD στα πόσιμα και λύματα
- Δοκιμασία ενεργών συστατικών σε φαρμακευτικά προϊόντα
- Μέτρηση χρώματος και πρόσθετων σε τρόφιμα και ποτά
- Συγκέντρωση φίλτρου UV στα καλλυντικά
- Μετρήσεις συγκέντρωσης ενζύμων και πρωτεϊνών
Σε ποιους τομείς χρησιμοποιείται η UV-VIS — ανάλυση;
Πρότυπα σχετικά με τη UV-VIS — ανάλυση
- European Pharmacopoeia 2.2.25 (φασματοφωτομετρία απορρόφησης)
- ISO 7887 (ποιότητα νερού — προσδιορισμός χρώματος)
- ISO 6060 / ISO 15705 (χημική ζήτηση οξυγόνου)
Συνθήκες της UV-VIS — ανάλυση
- Dalga boyu
- Μέγιστη απορρόφηση της αναλυόμενης ουσίας. ορίζεται στη μέθοδο
- Μπανιέρα
- Χαλαζίας στην περιοχή UV, γυαλί ή πλαστικό στην ορατή περιοχή
- γραμμικό εύρος
- Μελετάται στο εύρος απορρόφησης όπου ισχύει η Lambert-Beer.
- Τυφλός
- Ο μηδενισμός γίνεται με διαλύτη ή τυφλό αντιδραστηρίου
Εξοπλισμός για τη UV-VIS — ανάλυση
- Φασματοφωτόμετρο UV-VIS
- Κουβέτες χαλαζία και γυαλί
- Αυτόματη αλλαγή κυβετών
- Υποδοχή κυβέτας ελεγχόμενης θερμοκρασίας (για κινητικές μετρήσεις)
Απαιτήσεις δείγματος για τη UV-VIS — ανάλυση
- Το δείγμα πρέπει να είναι διαυγές διάλυμα. η θολότητα αλλοιώνει το αποτέλεσμα
- Εφόσον απαιτείται, εφαρμόζεται διήθηση ή φυγοκέντρηση
- Αραιώνεται εάν η συγκέντρωση είναι πάνω από το γραμμικό εύρος
- Λίγα χιλιοστόλιτρα δείγματος είναι γενικά επαρκή
Διάρκεια της UV-VIS — ανάλυση
Μια μεμονωμένη μέτρηση διαρκεί δευτερόλεπτα. Η προετοιμασία του δείγματος και οι χρόνοι αναμονής των αντιδράσεων σχηματισμού χρώματος καθορίζουν τη συνολική διάρκεια.
Διαδικασία της UV-VIS — ανάλυση
- 1Το δείγμα διαλύεται, διηθείται εάν απαιτείται και αραιώνεται.
- 2Ένα αντιδραστήριο που σχηματίζει χρώμα, εάν χρησιμοποιείται, προστίθεται και τηρείται ο καθορισμένος χρόνος αναμονής.
- 3Το όργανο μηδενίζεται με το τυφλό διάλυμα.
- 4Μετράται η απορρόφηση των διαλυμάτων βαθμονόμησης.
- 5Διαβάζεται η απορρόφηση του δείγματος.
- 6Η συγκέντρωση υπολογίζεται από την καμπύλη βαθμονόμησης.
Κριτήρια αποδοχής της UV-VIS — ανάλυση
Η αποδοχή του αποτελέσματος προσδιορίζεται με σύγκριση με τις τιμές στη μονογραφία της φαρμακοποιίας, τα όρια απόρριψης ή τις προδιαγραφές του προϊόντος.
Αξιολόγηση Αποτελεσμάτων
Η μέτρηση ισχύει μόνο εντός του εύρους όπου η σχέση Beer-Lambert είναι γραμμική. Η απόκλιση αρχίζει σε υψηλές τιμές απορρόφησης. Στην περίπτωση αυτή ένα αποτέλεσμα που λαμβάνεται χωρίς αραίωση δεν είναι αξιόπιστο.
Έκθεση της UV-VIS — ανάλυση
- Περιγραφή δείγματος, ημερομηνία παραλαβής και αριθμός εργαστηρίου
- Εφαρμοσμένη μέθοδος και πρότυπο αναφοράς, εάν υπάρχει
- Όργανο και συνθήκες μέτρησης
- Βήματα προετοιμασίας δειγμάτων
- Αποτελέσματα μέτρησης και μονάδες
- Αβεβαιότητα μέτρησης (εάν ζητηθεί)
- Δήλωση ότι τα αποτελέσματα αφορούν μόνο το δείγμα που υποβλήθηκε για δοκιμή
Διαπίστευση
Η EUROLAB κατέχει διεθνώς αναγνωρισμένη διαπίστευση που λαμβάνεται από φορείς διαπίστευσης που συμμετείχαν στις συμφωνίες πολυμερούς αναγνώρισης IAF και ILAC, σύμφωνα με το ISO/IEC 17025 για εργαστηριακές δοκιμές, το ISO/IEC 17020 για την επιθεώρηση και την επιτήρηση και το ISO/IEC 17021-1 και το σύστημα πιστοποίησης προϊόντων ISO/IEC. Αυτή η αλυσίδα διασφαλίζει ότι οι εκθέσεις και τα πιστοποιητικά που εκδίδονται γίνονται αποδεκτά παγκοσμίως.
Το εάν αυτή η δοκιμή μπορεί να προσφερθεί εντός αναγνωρισμένου πεδίου εξαρτάται από το προϊόν σας και το πρότυπο που εφαρμόζεται. Δεδομένου ότι η διαπίστευση βασίζεται στη μέθοδο, το πεδίο εφαρμογής επιβεβαιώνεται γραπτώς στο στάδιο της προσφοράς.
Πεδίο εφαρμογής και εξουσιοδοτήσειςΣχετικοί Κανονισμοί
- Κανονισμός Ελέγχου Ρύπανσης Νερών
- Κανονισμός για το νερό που προορίζεται για ανθρώπινη κατανάλωση
- Μονογραφίες της Ευρωπαϊκής Φαρμακοποιίας
Σελίδες όπου χρησιμοποιείται αυτή η μέθοδος
Αναλυτικές μέθοδοι — Τι κάνει αυτή η ομάδα μεθόδων;
Η παρακάτω ενότητα περιγράφει τον τομέα στον οποίο ανήκει η δοκιμή UV-VIS — ανάλυση· οι συνθήκες και τα κριτήρια αποδοχής αυτής της συγκεκριμένης δοκιμής δίνονται στις παραπάνω ενότητες. Το πεδίο εφαρμογής που αφορά το προϊόν σας επιβεβαιώνεται εγγράφως στο στάδιο της προσφοράς.
Οι σελίδες αναλυτικών μεθόδων είναι σελίδες για μια ΤΕΧΝΙΚΗ ΜΕΤΡΗΣΗΣ παρά για μια δοκιμή. Αυτή η διαφορά έχει σημασία: η «δοκιμή αλατονέφωσης» είναι δοκιμή και απαντά σε μία ερώτηση· το «ICP-MS» είναι τεχνική και χρησιμοποιείται σε δεκάδες διαφορετικές δοκιμές. Μερικές φορές ο χρήστης δεν αναζητά τη δοκιμή αλλά την τεχνική — επειδή το όνομα της μεθόδου είναι αυτό που εμφανίζεται στην προδιαγραφή του.
Αυτή η διάκριση γίνεται καθοριστική στην επιλογή εργαστηρίου. Όταν ένας πελάτης ζητά «ανάλυση βαρέων μετάλλων», το πραγματικό ερώτημα είναι με ποια τεχνική θα γίνει: το XRF είναι γρήγορο και μη καταστροφικό αλλά δεν διακρίνει ενώσεις· το AAS είναι οικονομικό για ένα μόνο στοιχείο· το ICP-OES ανιχνεύει πολλαπλά στοιχεία· το ICP-MS βλέπει επίπεδα ιχνών. Το ίδιο δείγμα δίνει αποτελέσματα με διαφορετικά όρια ανίχνευσης και διαφορετικές αβεβαιότητες στις τέσσερις τεχνικές.
Η επιλογή μεθόδου γίνεται με βάση τρία κριτήρια. ΟΡΙΟ ΑΝΙΧΝΕΥΣΗΣ: βρίσκεται η αναζητούμενη συγκέντρωση εντός του εύρους που μπορεί να δει η μέθοδος; ΣΥΜΒΑΤΟΤΗΤΑ ΥΠΟΣΤΡΩΜΑΤΟΣ: είναι το υπόστρωμα του δείγματος (πλαστικό, τρόφιμο, έδαφος, μέταλλο) κάτι που μπορεί να χειριστεί η μέθοδος, και απαιτείται προεπεξεργασία; ΣΥΝΔΕΣΗ ΜΕ ΠΡΟΔΙΑΓΡΑΦΗ: επιβάλλει το πρότυπο προϊόντος ή η νομοθεσία συγκεκριμένη μέθοδο; Το τρίτο συχνά υπερισχύει των δύο πρώτων — η προδιαγραφή δεσμεύει τη μέθοδο.
Οι σελίδες μεθόδων δημιουργούν μια ΑΛΥΣΙΔΑ. Μια τεχνική συνδέεται με τις δοκιμαστικές σελίδες όπου χρησιμοποιείται, με τα πρότυπα στα οποία βασίζονται αυτές τις δοκιμές, με τη νομοθεσία με τα οποία συνδέονται αυτά τα πρότυπα και, τελικά, με τα καθεστώτα πρόσβασης στην αγορά. Το παράδειγμα αλυσίδας στο έγγραφο προέλευσης λειτουργεί ως εξής: XRF → ανάλυση μετάλλων → Συμμόρφωση με RoHS → περιορισμός βαρέων μετάλλων → σελίδες επικάλυψης. Από όποιο σύνδεσμο και αν εισέλθει ο χρήστης, φτάνει στους άλλους.
Η προετοιμασία του δείγματος είναι το αόρατο μισό του αποτελέσματος σε αυτήν την οικογένεια και είναι μεγαλύτερη πηγή λάθους από την ίδια την τεχνική. Η μέθοδος πέψης, ο βαθμός λείανσης, ο διαλύτης εκχύλισης και η αναλογία αραίωσης αλλάζουν σημαντικά το αποτέλεσμα. Το ίδιο δείγμα στο ίδιο όργανο δίνει διαφορετικό αποτέλεσμα με διαφορετική προετοιμασία. Συνεπώς, ο ορισμός της μεθόδου καλύπτει και την προετοιμασία.
Η βαθμονόμηση και η επαλήθευση είναι το τρίτο καθοριστικό στοιχείο. Ένα όργανο βαθμονομείται με πιστοποιημένο υλικό αναφοράς, η καμπύλη βαθμονόμησης επαληθεύεται περιοδικά και ένα δείγμα ελέγχου εκτελείται σε κάθε παρτίδα. Χωρίς αυτά τα βήματα, ένας αριθμός που παράγεται δεν είναι ανιχνεύσιμος ακόμα κι αν το όργανο λειτουργεί σωστά.
Ομάδες μεθόδων σε αυτόν τον τομέα
Στοιχειακή ανάλυση
ICP-OES, ICP-MS, AAS και XRF. Διαφέρουν ως προς το όριο ανίχνευσης, την ανοχή μήτρας και την χωρητικότητα πολλαπλών στοιχείων.
Χρωματογραφία
GC, GC-MS, HPLC, LC-MS/MS και χρωματογραφία ιόντων. Διαχωρίζει ένα μείγμα στα συστατικά του και μετρά το καθένα ξεχωριστά.
Φασματοσκοπία
FTIR, Raman, UV-Vis και οπτική εκπομπή. Για ταυτότητα υλικού, αναγνώριση λειτουργικής ομάδας και σύνθεση κράματος.
Θερμική ανάλυση
DSC, TGA, DMA και διαλατομετρία. Θερμοκρασίες μετάβασης, σύνθεση, αποσύνθεση και διαστατική συμπεριφορά.
Μικροσκοπία και απεικόνιση
Οπτική μικροσκοπία, SEM-EDS, ακτινογραφία και τομογραφία. Δομή, ελαττώματα και στοιχειακή κατανομή.
Κλασική (υγρή) χημεία
Τιτλοδότηση, βαρυμετρία και χρωματομετρία. Χρησιμοποιείται ως μέθοδος αναφοράς και για την επιβεβαίωση των αποτελεσμάτων οργάνων.
Συχνές συγχύσεις σε αυτόν τον τομέα
- Το XRF είναι ένα εργαλείο διαλογής. βλέπει στοιχεία και δεν διακρίνει ενώσεις. Μια απόφαση για μια περιορισμένη ένωση απαιτεί επιβεβαίωση με υγρή χημεία.
- Η φράση «δεν ανιχνεύθηκε» δεν αποτελεί απόδειξη απουσίας· διαβάζεται μαζί με το όριο ανίχνευσης της μεθόδου.
- Η προδιαγραφή δεσμεύει τη μέθοδο. Μια τεχνικά καλύτερη μέθοδος δεν γίνεται αποδεκτή εάν η προδιαγραφή απαιτεί άλλη.
- Η προετοιμασία του δείγματος είναι μέρος του αποτελέσματος. μια αναφορά που δεν αναφέρει την προετοιμασία δεν μπορεί να αναπαραχθεί.
- Τα αποτελέσματα που λαμβάνονται με διαφορετικές τεχνικές δεν μπορούν να συγκριθούν άμεσα. Τα όρια ανίχνευσης και οι αβεβαιότητες διαφέρουν.
- Μια σελίδα μεθόδου δεν είναι δοκιμαστική σελίδα. ποια μέθοδος εφαρμόζεται σε ποια δοκιμή προέρχεται από το πρότυπο προϊόντος.
Ποιες αποφάσεις υποστηρίζουν αυτά τα αποτελέσματα
- Αντιστοίχιση της μεθόδου της προδιαγραφής με το πεδίο του εργαστηρίου
- Επιλογή μεθόδου βάσει ορίου ανίχνευσης και συμβατότητας μήτρας
- Επιβεβαίωση οργανικού αποτελέσματος με μέθοδο αναφοράς
- Εξάλειψη αποκλίσεων που προκύπτουν από την προετοιμασία δείγματος
Σχετικά τεστ
Συχνές ερωτήσεις για τη UV-VIS — ανάλυση
Μπορεί να μετρηθεί ένα θολό δείγμα;
Όχι. Η θολότητα διαχέει το φως, αυξάνοντας τεχνητά την απορρόφηση. Το δείγμα πρέπει πρώτα να φιλτραριστεί ή να φυγοκεντρηθεί.
Μπορεί να μετρηθεί ένα μόνο συστατικό σε ένα μείγμα;
Μόνο αν τα άλλα συστατικά δεν απορροφούν στο ίδιο μήκος κύματος. Εάν υπάρχει παρεμβολή, απαιτείται χρωματογραφική μέθοδος.