Microbial Limits是什麼？
微生物限度測試評估不需要無菌的產品的微生物品質。它們包括兩個部分：需氧微生物總數以及酵母菌和黴菌總數（Ph. Eur. 2.6.12），以及根據產品類別確定的特定微生物測試（Ph. Eur. 2.6.13）。
Microbial Limits的目的
目的是證明產品符合微生物品質標準且不含指定病原體。標準因產品的給藥途徑而異。
Microbial Limits適用於哪些產品？
- 口服固體和液體形式
- 外用乳霜、凝膠和軟膏
- 吸入產品
- 草本產品
- 輔料
Microbial Limits應用於哪些行業？
與Microbial Limits相關的標準
- 歐洲博士。 2.6.12（微生物計數試驗）
- 歐洲博士。 2.6.13（特定微生物的測試）
- 歐洲博士。 5.1.4（非無菌產品微生物品質）
- USP <61>、<62> 和 <1111>
Microbial Limits的測試條件
- 方法適用性
- 必須驗證產品的抗菌作用已被中和
- 孵
- 藥典中定義的介質、溫度和持續時間
- 特定微生物
- 測試的清單因給藥途徑而異
Microbial Limits的測試設備
- 無菌櫃及培養箱
- 薄膜過濾裝置
- 高壓滅菌器和介質製備系統
- 菌落計數器
Microbial Limits的樣品要求
- 樣本處於未開封的原始包裝中
- 方法適用性研究需要額外的樣品
- 必須提供產品的給藥途徑—它決定了要測試哪些微生物
- 必須提供配方和防腐系統訊息
Microbial Limits的測試時程
對特定微生物的計數和檢測需要與藥典中規定的潛伏期一樣長的時間。如果第一次進行方法適用性研究，則會增加持續時間。
Microbial Limits的測試程序
- 1驗證方法的適用性；該產品的抗菌作用被中和。
- 2標本是在無菌條件下製備的。
- 3進行平板接種以獲得需氧微生物總數。
- 4對酵母和黴菌計數進行單獨的平板接種。
- 5根據給藥途徑檢測特定的微生物。
- 6將結果與藥典標準進行比較。
Microbial Limits的允收準則
歐洲博士。 5.1.4 規定了可接受的微生物限度和按給藥途徑測試的指定微生物。口服、外用和吸入產品的標準有所不同。本頁未給予接受標準：對於每種活性物質和每種產品，限量來自相關藥典專論或上市許可檔案中批准的規範。藥典通則章節定義了此方法；專著設定了限制。
結果評估
方法適用性研究是不可跳過的：如果產品的防腐系統沒有被中和，微生物就無法在培養基上生長，結果看起來比實際好。這是微生物限度測試中最常見的錯誤。
Microbial Limits測試報告
- 產品識別、批次和給藥途徑
- 方法適用性研究結果
- 需氧總數和酵母/黴菌計數
- 測試的特定微生物及其結果
- 藥典標準比
認證
EUROLAB 擁有 IAF 和 ILAC 多邊認可安排締約方認證機構獲得的國際認可認證，根據 ISO/IEC 17025 實驗室測試、ISO/IEC 17020 檢查和監督以及 ISO/IEC 17021-1 和 ISO/IEC 17065 系統和產品認證。該鏈條確保所發布的報告和證書在全球範圍內得到接受。
是否可以在認可範圍內提供此測試取決於您的產品和所採用的標準；由於認證是基於方法的，因此範圍在報價階段以書面形式確認。
範圍和授權相關規定
- 2001/83/EC 人用醫藥產品指令
- GMP 指南（EudraLex 第 4 卷）
藥物分析 — 此測試領域涵蓋哪些內容？
以下段落說明 Microbial Limits 測試所屬的領域；此測試本身的條件與允收標準列於上方各節。您產品專屬的範圍將在報價階段以書面確認。
药学分析用以确定药品活性成分及成品的成分、纯度、含量及其特性。此领域与其他领域的区别在于,相关方法大多载於药典中:《欧洲药典》(Ph. Eur.)与《美国药典》(USP)均同时提供分析方法及接受标准。
药典方法的约束力决定了该领域的工作模式。虽然其他产业的实验室可以选择合适的方法,但在此领域中,专论中所载明的方法才是依归;若要采用替代方法,则必须证明其等效性。这确保了结果在全球范围内具有可比性。
分析工作分为几个组别进行。鉴别与含量测定(HPLC、UV、滴定)可显示产品的成分及其所含有效成分的量。杂质图谱与残留溶剂分析,旨在检测生产过程中产生的非预期化合物。元素杂质分析,针对源自催化剂及设备的金属进行处理。溶解与分散行为,是反映药物在体内释放行为最重要的体外指标。
溶解度试验是该领域中最关键的测量项目之一。一片药锭仅含有正确剂量的有效成分是不够的;该成分还必须以适当的速率溶解。溶解曲线可用於评估配方变更对生体可用率的影响,并在通用药品的许可审查中占据核心地位。
方法验证是此系列中不可或缺的一环。若采用药典方法,则须确认该方法在该实验室的条件下能正常运作。若开发自有方法,则须依据线性度、精密度、准确度、选择性、检测限与定量限、稳健性等参数进行验证。以未经验证的方法所产生的结果,不得用於许可申请文件中。
稳定性研究决定产品保质期,也是该领域中耗时最长的作业。产品会在指定的温度和湿度条件下静置,并於特定间隔进行分析,其结果将作为保质期及储存条件声明的依据。加速条件可提供初步资讯,但即时数据才是关键所在。
微生物学方面则是一项独立的环节:包括微生物总数计数、特定微生物的检测、无菌产品的无菌试验,以及细菌内毒素试验。针对无菌产品,还须进行包装完整性检测与灭菌验证。
数据完整性近年来已成为检查的核心。结果正确还不够;原始数据必须可追溯、不可篡改且可审计。因此,电子记录系统的验证已成为分析工作不可分割的一部分。
此領域的方法群組
鉴别与含量测定
HPLC、UPLC、紫外-可见分光光度法、滴定法,FTIR鉴别确认。
杂质与残留物
相关杂质、降解产物、残留溶剂(顶空GC)、亚硝胺筛查。
元素杂质
通过ICP-MS及ICP-OES测定元素杂质并进行相应风险评估。
理化
溶出与崩解、硬度、脆碎度、剂量单位均匀度、水分含量(卡尔费休法)、粒度。
微生物学
微生物计数、特定微生物、无菌检查、细菌内毒素、防腐剂效力。
稳定性
实时及加速稳定性研究;光稳定性及使用中稳定性。
此領域常見混淆之處
- 药典方法具有约束力;替代方法只有在证明其等效性后方可使用。
- 未经方法验证得出的结果不能用于注册申报档案。
- 加速稳定性不能替代实时数据;保质期须以实时结果为支撑。
- 溶出曲线对仪器类型、搅拌速度及介质敏感;报告中须完整记录相关条件。
- 即使结果正确,数据完整性方面的缺陷仍会在检查中导致不合规。
- 配方或供应商变更须进行分析比对,必要时须开展新的稳定性研究。
這些結果支持哪些決策
- 注册档案及批次放行
- 确定保质期及储存条件
- 方法转移及方法验证
- 供应商来料原料验收控制
- 评估配方变更对生物等效性的影响
相關測試
關於Microbial Limits的常見問題
必須對每個批次重複方法適用性嗎？
不需要，每個產品只需執行一次，除非配方或方法發生變化，否則一直有效。然而，如果配方、防腐系統或方法發生變化，則必須重做。