Che cos'è UV-VIS — analisi?
Uno spettrofotometro UV-VIS misura la quantità di luce nella regione dell'ultravioletto e del visibile assorbita da una soluzione. L'assorbanza è direttamente proporzionale alla concentrazione, secondo la relazione Beer-Lambert.
Scopo di UV-VIS — analisi
Lo scopo è determinare la concentrazione dei composti che assorbono la luce in modo rapido ed economico. In combinazione con i reagenti che formano il colore, diventano misurabili anche le sostanze che non si assorbono da sole.
A quali prodotti si applica UV-VIS — analisi?
- Parametri come nitrati, fosfati, COD nelle acque potabili e reflue
- Dosaggio dei principi attivi nei prodotti farmaceutici
- Misurazione del colore e degli additivi negli alimenti e nelle bevande
- Concentrazione dei filtri UV nei cosmetici
- Misure di concentrazione di enzimi e proteine
In quali settori si utilizza UV-VIS — analisi?
Norme relative a UV-VIS — analisi
- Farmacopea Europea 2.2.25 (spettrofotometria di assorbimento)
- ISO 7887 (qualità dell'acqua — determinazione del colore)
- ISO 6060 / ISO 15705 (domanda chimica di ossigeno)
Condizioni di UV-VIS — analisi
- Dalga boyu
- Massimo assorbimento dell'analita; definito nel metodo
- Vasca
- Quarzo nella regione UV, vetro o plastica nella regione visibile
- intervallo lineare
- È studiato nell'intervallo di assorbanza in cui è valido Lambert-Beer.
- Cieco
- L'azzeramento viene effettuato con solvente o bianco reagente
Apparecchiatura per UV-VIS — analisi
- Spettrofotometro UV-VIS
- Cuvette in quarzo e vetro
- Cambiacuvette automatico
- Portacuvette a temperatura controllata (per misurazioni cinetiche)
Requisiti del campione per UV-VIS — analisi
- Il campione deve essere una soluzione limpida; la torbidità distorce il risultato
- Se necessario viene applicata la filtrazione o la centrifugazione
- Diluito se la concentrazione è superiore all'intervallo lineare
- In genere sono sufficienti pochi millilitri di campione
Durata di UV-VIS — analisi
Una singola misurazione richiede pochi secondi. La preparazione del campione e i tempi di attesa delle reazioni di formazione del colore determinano la durata totale.
Procedura di UV-VIS — analisi
- 1Il campione viene sciolto, filtrato se necessario e diluito.
- 2Si aggiunge un reagente colorante, se utilizzato, e si rispetta il tempo di attesa definito.
- 3Lo strumento viene azzerato con la soluzione del bianco.
- 4Viene misurata l'assorbanza delle soluzioni di calibrazione.
- 5Viene letta l'assorbanza del campione.
- 6La concentrazione viene calcolata dalla curva di calibrazione.
Criteri di accettazione di UV-VIS — analisi
L'accettabilità del risultato è determinata dal confronto con i valori della monografia della farmacopea, dei limiti di scarico o delle specifiche del prodotto.
Valutazione dei risultati
La misurazione è valida solo all'interno dell'intervallo in cui la relazione Beer-Lambert è lineare. La deviazione inizia con valori di assorbanza elevati; in tal caso un risultato ottenuto senza diluizione non è affidabile.
Rapporto di UV-VIS — analisi
- Descrizione del campione, data di ricevimento e numero di laboratorio
- Metodo applicato ed eventuale norma di riferimento
- Strumento e condizioni di misura
- Fasi di preparazione del campione
- Risultati e unità di misura
- Incertezza di misura (se richiesta)
- Una dichiarazione secondo cui i risultati si riferiscono solo al campione presentato per il test
Accreditamento
EUROLAB detiene un accreditamento riconosciuto a livello internazionale ottenuto da organismi di accreditamento parte degli accordi di riconoscimento multilaterale IAF e ILAC, secondo ISO / IEC 17025 per prove di laboratorio, ISO / IEC 17020 per ispezione e sorveglianza e ISO / IEC 17021-1 e ISO / IEC 17065 per certificazione di sistema e prodotto. Questa catena garantisce che i rapporti e i certificati emessi siano accettati in tutto il mondo.
Se questo test può essere offerto nell'ambito accreditato dipende dal prodotto e dallo standard applicato; poiché l'accreditamento è basato sul metodo, l'ambito viene confermato per iscritto in fase di offerta.
Ambito e autorizzazioniRegolamenti correlati
- Regolamento sul controllo dell'inquinamento idrico
- Regolamento sull'acqua destinata al consumo umano
- Monografie della Farmacopea Europea
Pagine in cui viene utilizzato questo metodo
Metodi analitici — Cosa fa questo gruppo di metodi?
La sezione seguente descrive l'ambito a cui appartiene la prova UV-VIS — analisi; le condizioni e i criteri di accettazione di questa prova specifica sono riportati nelle sezioni precedenti. L'ambito specifico del vostro prodotto viene confermato per iscritto in fase di offerta.
Le pagine sui metodi analitici sono pagine su una TECNICA DI MISURA piuttosto che su una prova. Questa differenza è importante: «prova alla nebbia salina» è una prova e risponde a una domanda; «ICP-MS» è una tecnica e viene utilizzata in decine di prove diverse. A volte l'utente non cerca la prova ma la tecnica, perché il nome del metodo è ciò che compare nella sua specifica.
Questa distinzione diventa decisiva nella scelta di un laboratorio. Quando un cliente chiede un'«analisi dei metalli pesanti», la vera domanda è con quale tecnica verrà eseguita: la XRF è rapida e non distruttiva ma non distingue i composti; l'AAS è economica per un singolo elemento; l'ICP-OES rileva più elementi; l'ICP-MS vede livelli in tracce. Lo stesso campione fornisce risultati con limiti di rilevazione e incertezze diverse tra le quattro tecniche.
La scelta del metodo avviene secondo tre criteri. LIMITE DI RILEVAZIONE: la concentrazione ricercata rientra nell'intervallo che il metodo può rilevare? COMPATIBILITÀ DI MATRICE: la matrice del campione (plastica, alimento, suolo, metallo) è una che il metodo può gestire, ed è richiesto un pretrattamento? LEGAME CON LA SPECIFICA: la norma di prodotto o la normativa impone un metodo particolare? Il terzo spesso prevale sui primi due — la specifica vincola il metodo.
Le pagine dei metodi creano una CATENA. Una tecnica è legata alle pagine di test in cui viene utilizzata, agli standard su cui si basano, alla legislazione a cui quegli standard sono legati e, in ultima analisi, ai regimi di accesso al mercato. La catena di esempio nel documento sorgente funziona in questo modo: XRF → analisi dei metalli → conformità RoHS → restrizione sui metalli pesanti → pagine di rivestimento. Qualunque sia il collegamento da cui accede l'utente, raggiunge gli altri.
In questa famiglia, la preparazione del campione rappresenta la metà invisibile del risultato ed è una fonte di errore maggiore della tecnica stessa. Il metodo di digestione, il grado di macinazione, il solvente di estrazione e il rapporto di diluizione modificano notevolmente il risultato. Lo stesso campione sullo stesso strumento dà un risultato diverso con una preparazione diversa; la definizione del metodo copre quindi anche la preparazione.
La calibrazione e la verifica sono il terzo componente determinante. Uno strumento viene calibrato con materiale di riferimento certificato, la curva di calibrazione viene verificata periodicamente e in ciascun lotto viene analizzato un campione di controllo. Senza questi passaggi un numero prodotto non è tracciabile anche se lo strumento funziona correttamente.
Gruppi di metodi in questo ambito
Analisi elementare
ICP-OES, ICP-MS, AAS e XRF. Differiscono nel limite di rilevamento, nella tolleranza della matrice e nella capacità multielemento.
Cromatografia
GC, GC-MS, HPLC, LC-MS/MS e cromatografia ionica. Separa una miscela nei suoi componenti e li misura separatamente.
Spettroscopia
FTIR, Raman, UV-Vis ed emissione ottica. Per l'identità del materiale, l'identificazione del gruppo funzionale e la composizione della lega.
Analisi termica
DSC, TGA, DMA e dilatometria. Temperature di transizione, composizione, decomposizione e comportamento dimensionale.
Microscopia e imaging
Microscopia ottica, SEM-EDS, radiografia e tomografia. Struttura, difetti e distribuzione degli elementi.
Chimica classica (per via umida)
Titolazione, gravimetria e colorimetria. Utilizzato come metodo di riferimento e per confermare i risultati strumentali.
Confusioni frequenti in questo ambito
- XRF è uno strumento di screening; vede gli elementi e non distingue i composti. Una decisione su un composto limitato richiede la conferma mediante chimica umida.
- L'espressione «non rilevato» non è prova di assenza; va letta insieme al limite di rilevazione del metodo.
- La specifica vincola il metodo. Un metodo tecnicamente migliore non viene accettato se la specifica ne richiede un altro.
- La preparazione del campione è parte del risultato; un verbale che non ne dichiari la preparazione non è riproducibile.
- I risultati ottenuti con tecniche diverse non possono essere confrontati direttamente; i loro limiti di rilevamento e le incertezze differiscono.
- Una pagina di metodo non è una pagina di test; quale metodo si applica a quale test deriva dalla norma di prodotto.
Quali decisioni supportano questi risultati
- Corrispondenza del metodo della specifica con l'ambito del laboratorio
- Scelta del metodo in base al limite di rilevamento e alla compatibilità della matrice
- Conferma di un risultato strumentale con un metodo di riferimento
- Eliminazione delle deviazioni dovute alla preparazione del campione
Test correlati
Domande frequenti su UV-VIS — analisi
È possibile misurare un campione torbido?
No. La torbidità disperde la luce, aumentando artificialmente l'assorbanza. Il campione deve essere prima filtrato o centrifugato.
È possibile misurare un singolo componente in una miscela?
Solo se gli altri componenti non assorbono alla stessa lunghezza d'onda. Se c'è interferenza, è necessario un metodo cromatografico.