Microbial Limits

Che cos'è Microbial Limits?

I test sui limiti microbici valutano la qualità microbiologica nei prodotti che non devono essere sterili. Sono costituiti da due parti: conta microbica aerobica totale insieme alla conta totale di lieviti e muffe (Ph. Eur. 2.6.12) e test per microrganismi specifici determinati per categoria di prodotto (Ph. Eur. 2.6.13).

Scopo di Microbial Limits

Lo scopo è dimostrare che il prodotto soddisfa i criteri di qualità microbiologica ed è esente dagli agenti patogeni specificati. I criteri variano in base alla via di somministrazione del prodotto.

A quali prodotti si applica Microbial Limits?

Forme solide e liquide orali
Creme, gel e unguenti topici
Prodotti per inalazioni
Prodotti medicinali a base di erbe
Eccipienti

In quali settori si utilizza Microbial Limits?

Prodotti farmaceuticiBiotecnologiaCosmetici

Norme relative a Microbial Limits

Ph.Eur. 2.6.12 (test di conta microbica)
Ph.Eur. 2.6.13 (test per i microrganismi specificati)
Ph.Eur. 5.1.4 (qualità microbiologica dei prodotti non sterili)
USP <61>, <62> e <1111>

Condizioni di Microbial Limits

Idoneità del metodo: È necessario verificare che l'effetto antimicrobico del prodotto sia stato neutralizzato
Incubazione: Mezzi, temperature e durate definite nella farmacopea
Microrganismi specificati: L'elenco da testare varia in base alla via di somministrazione

Apparecchiatura per Microbial Limits

Armadietto sterile e incubatori
Configurazione della filtrazione su membrana
Autoclave e sistema di preparazione dei terreni
Contatore di colonie

Requisiti del campione per Microbial Limits

Esemplare nella sua confezione originale non aperta
Per lo studio di idoneità del metodo è necessario un campione aggiuntivo
È necessario indicare la via di somministrazione del prodotto — determina per quali microrganismi vengono testati
Devono essere fornite informazioni sulla formulazione e sul sistema conservante

Durata di Microbial Limits

Il conteggio e l'analisi dei microrganismi specifici richiedono lo stesso periodo di incubazione definito nella farmacopea. Se lo studio sull'idoneità del metodo viene eseguito per la prima volta, la sua durata verrà aumentata.

Procedura di Microbial Limits

1L'idoneità del metodo è verificata; l'effetto antimicrobico del prodotto viene neutralizzato.
2Il campione viene preparato in modo asettico.
3La piastra viene eseguita per la conta microbica aerobica totale.
4Viene effettuata un'impiattamento separata per il conteggio dei lieviti e delle muffe.
5I microrganismi specifici vengono testati in base alla via di somministrazione.
6I risultati vengono confrontati con i criteri della farmacopea.

Criteri di accettazione di Microbial Limits

Ph.Eur. 5.1.4 definisce i limiti microbici accettabili e i microrganismi specificati da testare, per via di somministrazione. I criteri differiscono per i prodotti orali, topici e per inalazione. Il criterio di accettazione non è riportato in questa pagina: per ogni principio attivo e ogni prodotto il limite deriva dalla relativa monografia della farmacopea o dalla specifica approvata nel dossier di autorizzazione all'immissione in commercio. Il capitolo generale della farmacopea definisce il metodo; la monografia pone il limite.

Valutazione dei risultati

Lo studio di idoneità del metodo non può essere saltato: se il sistema conservante del prodotto non viene neutralizzato, i microrganismi non possono svilupparsi sul terreno e il risultato appare migliore di quanto non sia in realtà. Questo è l’errore più comune nei test sui limiti microbici.

Rapporto di Microbial Limits

Identificazione del prodotto, lotto e via di somministrazione
Risultati dello studio di idoneità del metodo
Conteggio aerobico totale e conteggio di lieviti/muffe
Microrganismi specifici testati e relativi risultati
Criteri della farmacopea a confronto

Accreditamento

EUROLAB detiene un accreditamento riconosciuto a livello internazionale ottenuto da organismi di accreditamento parte degli accordi di riconoscimento multilaterale IAF e ILAC, secondo ISO / IEC 17025 per prove di laboratorio, ISO / IEC 17020 per ispezione e sorveglianza e ISO / IEC 17021-1 e ISO / IEC 17065 per certificazione di sistema e prodotto. Questa catena garantisce che i rapporti e i certificati emessi siano accettati in tutto il mondo.

Se questo test può essere offerto nell'ambito accreditato dipende dal prodotto e dallo standard applicato; poiché l'accreditamento è basato sul metodo, l'ambito viene confermato per iscritto in fase di offerta.

Ambito e autorizzazioni

Regolamenti correlati

Direttiva 2001/83/CE sui medicinali per uso umano
Guida alle GMP (EudraLex Volume 4)

Analisi farmaceutica — Cosa copre questo ambito di prova?

La sezione seguente descrive l'ambito a cui appartiene la prova Microbial Limits; le condizioni e i criteri di accettazione di questa prova specifica sono riportati nelle sezioni precedenti. L'ambito specifico del vostro prodotto viene confermato per iscritto in fase di offerta.

L'analisi farmaceutica determina l'identità, la purezza, la quantità e il comportamento del principio attivo del medicinale e del prodotto finito. Ciò che contraddistingue questa disciplina dalle altre è il fatto che i metodi sono in gran parte definiti nelle FARMACOPEE: la Farmacopea Europea (Ph. Eur.) e la Farmacopea degli Stati Uniti (USP) forniscono sia il metodo che il quadro di riferimento per l'accettazione.

Il carattere vincolante del metodo della farmacopea determina le modalità operative del settore. Mentre in altri settori il laboratorio può scegliere un metodo adeguato, in questo caso è fondamentale attenersi al metodo indicato nella monografia; se si intende utilizzare un metodo alternativo, è necessario dimostrarne l'equivalenza. Ciò garantisce che i risultati siano comparabili a livello mondiale.

Le analisi vengono condotte in diversi gruppi. L'identificazione e la determinazione quantitativa (HPLC, UV, titolazione) indicano la natura del prodotto e la quantità di principio attivo in esso contenuta. Il profilo di impurità e i residui di solventi individuano i composti indesiderati derivanti dal processo di produzione. Le impurità elementari riguardano i metalli provenienti dai catalizzatori e dalle attrezzature. Il comportamento di dissoluzione e dispersione costituisce il principale indicatore in vitro relativo al comportamento di rilascio del farmaco nell'organismo.

L'ESPERIMENTO DI DISCIOLUZIONE è una delle misurazioni più critiche in questo campo. Non è sufficiente che una compressa contenga la giusta quantità di principio attivo; tale sostanza deve disciogliersi alla velocità adeguata. Il profilo di dissoluzione viene utilizzato per valutare l'effetto delle modifiche alla formulazione sulla biodisponibilità e riveste un ruolo centrale nell'autorizzazione all'immissione in commercio dei farmaci generici.

La CONVALIDA DEL METODO è una fase obbligatoria in questa famiglia. Se si utilizza un metodo della Farmacopea, si verifica che il metodo funzioni correttamente nelle condizioni specifiche di quel laboratorio. Se è stato sviluppato un metodo proprio, questo viene convalidato in base a parametri quali linearità, precisione, accuratezza, selettività, limiti di rilevabilità e di determinazione, nonché robustezza. I risultati ottenuti con un metodo non convalidato non possono essere utilizzati nel fascicolo di autorizzazione.

I test di stabilità determinano la durata di conservazione e rappresentano l'attività più lunga in questo settore. Il prodotto viene lasciato a riposo in condizioni di temperatura e umidità specificate, viene analizzato a intervalli regolari e i risultati costituiscono la base per la dichiarazione relativa alla durata di conservazione e alle condizioni di conservazione. Le condizioni accelerate forniscono informazioni preliminari, ma i dati in tempo reale sono fondamentali.

L'aspetto microbiologico costituisce un ambito a sé stante: conteggio della carica microbica, ricerca di microrganismi specifici, prova di sterilità sui prodotti sterili e prova delle endotossine batteriche. Per i prodotti sterili entrano in gioco anche la verifica dell'integrità della confezione e la convalida della sterilizzazione.

L'integrità dei dati si è spostata al centro delle ispezioni negli ultimi anni. Non basta che il risultato sia corretto; i dati grezzi devono essere tracciabili, inalterabili e verificabili. La convalida dei sistemi di registrazione elettronica è quindi diventata una parte inseparabile dell'analisi.

Gruppi di metodi in questo ambito

Identità e dosaggio
HPLC, UPLC, spettrofotometria UV-Vis, titolazione, conferma dell'identità mediante FTIR.
Impurezze e residui
Impurezze correlate, prodotti di degradazione, solventi residui (GC-headspace), screening delle nitrosammine.
Impurezze elementari
Determinazione delle impurezze elementari mediante ICP-MS e ICP-OES e relativa valutazione del rischio.
Fisico-chimico
Dissoluzione e disgregazione, durezza, friabilità, uniformità delle unità di dosaggio, contenuto d'acqua (Karl Fischer), dimensione delle particelle.
Microbiologico
Conta microbica, microrganismi specificati, sterilità, endotossina batterica, efficacia del conservante.
Stabilità
Studi di stabilità in tempo reale e accelerata; fotostabilità e stabilità in uso.

Confusioni frequenti in questo ambito

Il metodo farmacopeico è vincolante; un metodo alternativo può essere usato solo dimostrandone l'equivalenza.
Un risultato prodotto senza convalida del metodo non può essere utilizzato in un dossier di registrazione.
La stabilità accelerata non sostituisce i dati in tempo reale; la shelf-life è supportata da risultati in tempo reale.
Il profilo di dissoluzione è sensibile al tipo di apparecchio, alla velocità di agitazione e al mezzo; le condizioni devono essere complete nel rapporto.
Una carenza nell'integrità dei dati produce una non conformità in un'ispezione anche se il risultato è corretto.
Una modifica della formulazione o del fornitore richiede un confronto analitico e, se necessario, un nuovo studio di stabilità.

Quali decisioni supportano questi risultati

Il dossier di registrazione e il rilascio dei lotti
Determinazione della shelf-life e delle condizioni di conservazione
Trasferimento del metodo e convalida del metodo
Controllo di accettazione delle materie prime in ingresso dai fornitori
Valutazione dell'effetto di una modifica della formulazione sulla bioequivalenza

Test correlati

Domande frequenti su Microbial Limits

L'idoneità del metodo deve essere ripetuta per ogni lotto?

No, viene eseguita una volta per prodotto e rimane valida a meno che la formulazione o il metodo non cambino. Va rifatto, però, se cambia la formulazione, il sistema conservante o il metodo.