Che cos'è Bioburden?
Il test della carica batterica determina il numero e la natura della popolazione di microrganismi vitali presenti sul prodotto prima della sterilizzazione. Poiché la determinazione della dose e del processo di sterilizzazione dipende direttamente dalla carica batterica, si tratta di un input fondamentale per la convalida della sterilizzazione.
Scopo di Bioburden
Lo scopo è produrre i dati microbiologici di base necessari per progettare e verificare il processo di sterilizzazione e monitorare la continuità dell'igiene della produzione.
A quali prodotti si applica Bioburden?
- Dispositivi medici pre-sterilizzazione
- Impianti e strumenti chirurgici
- Set monouso
- Componenti dell'imballaggio sterile
- Prodotti per la cura delle ferite
In quali settori si utilizza Bioburden?
Norme relative a Bioburden
- ISO 11737-1determinazione della carica microbica nei dispositivi medici test
- ISO 11135
- ISO 11137-1
- ISO 11137-2
- USP <61>
Condizioni di Bioburden
- Recupero
- Il metodo di rimozione dei microrganismi dal campione (agitazione, sonicazione, risciacquo) deve essere convalidato
- Efficienza del recupero
- La quantità di microorganismi recuperata dal metodo viene determinata e applicata al risultato come fattore di correzione
- Mezzi di cultura
- Terreni di coltura e condizioni di incubazione separati per la conta batterica e fungina
Apparecchiatura per Bioburden
- Sonicatore e agitatore
- Unità di filtrazione a membrana
- Incubatori
- Sistema di conteggio delle colonie
- Gabinetto di biosicurezza
Requisiti del campione per Bioburden
- Prodotto prelevato dalla linea di produzione, prima della sterilizzazione
- Il numero di campioni è determinato in base alla norma ISO 11737-1
- La data di campionamento, le informazioni sulla linea e sul lotto devono essere registrate
- I campioni devono essere trasportati in condizioni che non consentano la crescita microbica
Durata di Bioburden
Lo studio iniziale, compreso lo studio di recupero, richiede diverse settimane; i risultati del monitoraggio di routine si ottengono entro pochi giorni, a seconda del periodo di incubazione.
Procedura di Bioburden
- 1Viene selezionato il metodo di recupero e viene determinata la sua efficienza.
- 2I campioni vengono prelevati in condizioni asettiche.
- 3I microrganismi vengono rimossi dal prodotto.
- 4Il liquido risultante viene inoculato in terreni di coltura o filtrato.
- 5Viene incubato alla temperatura e alla durata appropriate.
- 6Le colonie vengono contate e corrette in base al fattore di recupero.
- 7Il risultato è riportato come CFU per prodotto.
Criteri di accettazione di Bioburden
Il test della carica batterica non ha limiti di accettazione propri; il risultato è un input. L'organizzazione definisce un limite di allarme e di azione per il livello di carica batterica utilizzato nella convalida della sterilizzazione e confronta i risultati di routine con questi limiti.
Valutazione dei risultati
I risultati vengono valutati come tendenza nel tempo. Un aumento della carica batterica può richiedere una rivalutazione della dose di sterilizzazione; il monitoraggio di routine rientra quindi nel mantenimento della validità della sterilizzazione.
Rapporto di Bioburden
- Standard e metodo applicati
- Descrizione del campione, lotto e data di campionamento
- Metodo di recupero e fattore di efficienza
- Terreni di coltura e condizioni di incubazione
- Risultati CFU per prodotto
- Confronto con i limiti di avviso/azione
Accreditamento
EUROLAB detiene un accreditamento riconosciuto a livello internazionale ottenuto da organismi di accreditamento parte degli accordi di riconoscimento multilaterale IAF e ILAC, secondo ISO / IEC 17025 per prove di laboratorio, ISO / IEC 17020 per ispezione e sorveglianza e ISO / IEC 17021-1 e ISO / IEC 17065 per certificazione di sistema e prodotto. Questa catena garantisce che i rapporti e i certificati emessi siano accettati in tutto il mondo.
Se questo test può essere offerto nell'ambito accreditato dipende dal prodotto e dallo standard applicato; poiché l'accreditamento è basato sul metodo, l'ambito viene confermato per iscritto in fase di offerta.
Ambito e autorizzazioniRegolamenti correlati
- MDR (UE) 2017/745
- ISO 11135 / ISO 11137
Analisi farmaceutica — Cosa copre questo ambito di prova?
La sezione seguente descrive l'ambito a cui appartiene la prova Bioburden; le condizioni e i criteri di accettazione di questa prova specifica sono riportati nelle sezioni precedenti. L'ambito specifico del vostro prodotto viene confermato per iscritto in fase di offerta.
L'analisi farmaceutica determina l'identità, la purezza, la quantità e il comportamento del principio attivo del medicinale e del prodotto finito. Ciò che contraddistingue questa disciplina dalle altre è il fatto che i metodi sono in gran parte definiti nelle FARMACOPEE: la Farmacopea Europea (Ph. Eur.) e la Farmacopea degli Stati Uniti (USP) forniscono sia il metodo che il quadro di riferimento per l'accettazione.
Il carattere vincolante del metodo della farmacopea determina le modalità operative del settore. Mentre in altri settori il laboratorio può scegliere un metodo adeguato, in questo caso è fondamentale attenersi al metodo indicato nella monografia; se si intende utilizzare un metodo alternativo, è necessario dimostrarne l'equivalenza. Ciò garantisce che i risultati siano comparabili a livello mondiale.
Le analisi vengono condotte in diversi gruppi. L'identificazione e la determinazione quantitativa (HPLC, UV, titolazione) indicano la natura del prodotto e la quantità di principio attivo in esso contenuta. Il profilo di impurità e i residui di solventi individuano i composti indesiderati derivanti dal processo di produzione. Le impurità elementari riguardano i metalli provenienti dai catalizzatori e dalle attrezzature. Il comportamento di dissoluzione e dispersione costituisce il principale indicatore in vitro relativo al comportamento di rilascio del farmaco nell'organismo.
L'ESPERIMENTO DI DISCIOLUZIONE è una delle misurazioni più critiche in questo campo. Non è sufficiente che una compressa contenga la giusta quantità di principio attivo; tale sostanza deve disciogliersi alla velocità adeguata. Il profilo di dissoluzione viene utilizzato per valutare l'effetto delle modifiche alla formulazione sulla biodisponibilità e riveste un ruolo centrale nell'autorizzazione all'immissione in commercio dei farmaci generici.
La CONVALIDA DEL METODO è una fase obbligatoria in questa famiglia. Se si utilizza un metodo della Farmacopea, si verifica che il metodo funzioni correttamente nelle condizioni specifiche di quel laboratorio. Se è stato sviluppato un metodo proprio, questo viene convalidato in base a parametri quali linearità, precisione, accuratezza, selettività, limiti di rilevabilità e di determinazione, nonché robustezza. I risultati ottenuti con un metodo non convalidato non possono essere utilizzati nel fascicolo di autorizzazione.
I test di stabilità determinano la durata di conservazione e rappresentano l'attività più lunga in questo settore. Il prodotto viene lasciato a riposo in condizioni di temperatura e umidità specificate, viene analizzato a intervalli regolari e i risultati costituiscono la base per la dichiarazione relativa alla durata di conservazione e alle condizioni di conservazione. Le condizioni accelerate forniscono informazioni preliminari, ma i dati in tempo reale sono fondamentali.
L'aspetto microbiologico costituisce un ambito a sé stante: conteggio della carica microbica, ricerca di microrganismi specifici, prova di sterilità sui prodotti sterili e prova delle endotossine batteriche. Per i prodotti sterili entrano in gioco anche la verifica dell'integrità della confezione e la convalida della sterilizzazione.
L'integrità dei dati si è spostata al centro delle ispezioni negli ultimi anni. Non basta che il risultato sia corretto; i dati grezzi devono essere tracciabili, inalterabili e verificabili. La convalida dei sistemi di registrazione elettronica è quindi diventata una parte inseparabile dell'analisi.
Gruppi di metodi in questo ambito
Identità e dosaggio
HPLC, UPLC, spettrofotometria UV-Vis, titolazione, conferma dell'identità mediante FTIR.
Impurezze e residui
Impurezze correlate, prodotti di degradazione, solventi residui (GC-headspace), screening delle nitrosammine.
Impurezze elementari
Determinazione delle impurezze elementari mediante ICP-MS e ICP-OES e relativa valutazione del rischio.
Fisico-chimico
Dissoluzione e disgregazione, durezza, friabilità, uniformità delle unità di dosaggio, contenuto d'acqua (Karl Fischer), dimensione delle particelle.
Microbiologico
Conta microbica, microrganismi specificati, sterilità, endotossina batterica, efficacia del conservante.
Stabilità
Studi di stabilità in tempo reale e accelerata; fotostabilità e stabilità in uso.
Confusioni frequenti in questo ambito
- Il metodo farmacopeico è vincolante; un metodo alternativo può essere usato solo dimostrandone l'equivalenza.
- Un risultato prodotto senza convalida del metodo non può essere utilizzato in un dossier di registrazione.
- La stabilità accelerata non sostituisce i dati in tempo reale; la shelf-life è supportata da risultati in tempo reale.
- Il profilo di dissoluzione è sensibile al tipo di apparecchio, alla velocità di agitazione e al mezzo; le condizioni devono essere complete nel rapporto.
- Una carenza nell'integrità dei dati produce una non conformità in un'ispezione anche se il risultato è corretto.
- Una modifica della formulazione o del fornitore richiede un confronto analitico e, se necessario, un nuovo studio di stabilità.
Quali decisioni supportano questi risultati
- Il dossier di registrazione e il rilascio dei lotti
- Determinazione della shelf-life e delle condizioni di conservazione
- Trasferimento del metodo e convalida del metodo
- Controllo di accettazione delle materie prime in ingresso dai fornitori
- Valutazione dell'effetto di una modifica della formulazione sulla bioequivalenza
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Domande frequenti su Bioburden
Perché la carica batterica influisce sulla dose di sterilizzazione?
La sterilizzazione riduce logaritmicamente la conta dei microrganismi. Maggiore è la conta iniziale dei microrganismi, maggiore sarà la dose o più lungo il tempo necessario per raggiungere lo stesso livello di garanzia di sterilità (SAL). La carica batterica è quindi un input diretto per la determinazione della dose.
Perché viene misurata l’efficienza di recupero?
Non tutti i microrganismi possono essere rimossi dal prodotto. Se non si conosce il fattore di efficienza, la carica batterica reale appare inferiore e la dose di sterilizzazione viene giudicata inadeguata; questo è un rischio diretto per la sicurezza.