¿Qué es UV-VIS — análisis?
Un espectrofotómetro UV-VIS mide cuánta luz en la región ultravioleta y visible absorbe una solución. La absorbancia es directamente proporcional a la concentración, según la relación de Beer-Lambert.
Objetivo de UV-VIS — análisis
El objetivo es determinar la concentración de compuestos fotoabsorbentes de forma rápida y económica. En combinación con reactivos formadores de color, las sustancias que no se absorben por sí solas también se vuelven mensurables.
¿A qué productos se aplica UV-VIS — análisis?
- Parámetros como nitrato, fosfato, DQO en aguas potables y residuales.
- Ensayo de ingredientes activos en productos farmacéuticos.
- Medición de color y aditivos en alimentos y bebidas.
- Concentración de filtro UV en cosmética.
- Mediciones de concentración de enzimas y proteínas.
¿En qué sectores se utiliza UV-VIS — análisis?
Normas relacionadas con UV-VIS — análisis
- Farmacopea Europea 2.2.25 (espectrofotometría de absorción)
- ISO 7887 (calidad del agua — determinación del color)
- ISO 6060 / ISO 15705 (demanda química de oxígeno)
Condiciones de UV-VIS — análisis
- Dalga boyu
- Máximo de absorción del analito; definido en el método
- Bañera
- Cuarzo en la región UV, vidrio o plástico en la región visible
- rango lineal
- Se estudia en el rango de absorbancia donde Lambert-Beer es válido.
- Ciego
- La puesta a cero se realiza con disolvente o reactivo en blanco.
Equipo para UV-VIS — análisis
- espectrofotómetro UV-VIS
- Cubetas de cuarzo y vidrio
- Cambiador de cubetas automático
- Soporte para cubetas con temperatura controlada (para mediciones cinéticas)
Requisitos de muestra para UV-VIS — análisis
- La muestra debe ser una solución clara; la turbidez distorsiona el resultado
- Se aplica filtración o centrifugación si es necesario.
- Diluido si la concentración está por encima del rango lineal
- Generalmente son suficientes unos pocos mililitros de muestra.
Duración de UV-VIS — análisis
Una sola medición tarda unos segundos. La preparación de las muestras y los tiempos de espera de las reacciones de formación de color determinan la duración total.
Procedimiento de UV-VIS — análisis
- 1La muestra se disuelve, se filtra si es necesario y se diluye.
- 2Si se utiliza un reactivo formador de color, se añade y se respeta el tiempo de espera definido.
- 3El instrumento se pone a cero con la solución en blanco.
- 4Se mide la absorbancia de las soluciones de calibración.
- 5Se lee la absorbancia de la muestra.
- 6La concentración se calcula a partir de la curva de calibración.
Criterios de aceptación de UV-VIS — análisis
La aceptabilidad del resultado se determina comparándolo con los valores de la monografía de la farmacopea, los límites de descarga o las especificaciones del producto.
Evaluación de resultados
La medición es válida sólo dentro del rango donde la relación Beer-Lambert es lineal. La desviación comienza con valores de absorbancia elevados; en ese caso, un resultado tomado sin dilución no es fiable.
Informe de UV-VIS — análisis
- Descripción de la muestra, fecha de recepción y número de laboratorio.
- Método aplicado y estándar de referencia, si lo hubiera.
- Condiciones del instrumento y de medición.
- Pasos de preparación de muestras
- Resultados de medición y unidades.
- Incertidumbre de medición (si se solicita)
- Una declaración de que los resultados se relacionan únicamente con la muestra enviada para la prueba.
Acreditación
EUROLAB posee una acreditación reconocida internacionalmente obtenida de organismos de acreditación que forman parte de los acuerdos de reconocimiento multilateral de IAF e ILAC, según ISO/IEC 17025 para pruebas de laboratorio, ISO/IEC 17020 para inspección y vigilancia, e ISO/IEC 17021-1 e ISO/IEC 17065 para certificación de sistemas y productos. Esta cadena garantiza que los informes y certificados emitidos sean aceptados en todo el mundo.
La posibilidad de ofrecer esta prueba dentro del alcance acreditado depende de su producto y del estándar aplicado; Dado que la acreditación se basa en métodos, el alcance se confirma por escrito en la etapa de cotización.
Alcance y autorizacionesRegulaciones Relacionadas
- Reglamento de control de la contaminación del agua
- Reglamento sobre Aguas Destinadas al Consumo Humano
- Monografías de la Farmacopea Europea
Páginas donde se utiliza este método
Métodos analíticos — ¿Qué hace este grupo de métodos?
La siguiente sección describe el campo al que pertenece el ensayo UV-VIS — análisis; las condiciones y criterios de aceptación de este ensayo en particular figuran en las secciones anteriores. El alcance específico de su producto se confirma por escrito en la etapa de cotización.
Las páginas de métodos analíticos son páginas sobre una TÉCNICA DE MEDICIÓN más que sobre un ensayo. Esta diferencia importa: «ensayo de niebla salina» es un ensayo y responde a una pregunta; «ICP-MS» es una técnica y se utiliza en decenas de ensayos distintos. A veces el usuario no busca el ensayo sino la técnica, porque el nombre del método es lo que aparece en su especificación.
Esta distinción se vuelve decisiva a la hora de elegir un laboratorio. Cuando un cliente pide un «análisis de metales pesados», la verdadera pregunta es con qué técnica se realizará: la XRF es rápida y no destructiva pero no distingue compuestos; la AAS es económica para un solo elemento; el ICP-OES detecta varios elementos; el ICP-MS ve niveles traza. La misma muestra da resultados con límites de detección e incertidumbres distintos en las cuatro técnicas.
La selección del método se realiza según tres criterios. LÍMITE DE DETECCIÓN: ¿está la concentración buscada dentro del rango que el método puede detectar? COMPATIBILIDAD DE MATRIZ: ¿es la matriz de la muestra (plástico, alimento, suelo, metal) una que el método pueda manejar, y se requiere pretratamiento? VÍNCULO CON LA ESPECIFICACIÓN: ¿exige la norma de producto o la legislación un método particular? El tercero suele prevalecer sobre los dos primeros: la especificación vincula el método.
Las páginas de métodos construyen una CADENA. Una técnica está vinculada a las páginas de prueba donde se utiliza, a las normas en las que se basan esas pruebas, a la legislación a la que están vinculadas esas normas y, en última instancia, a los regímenes de acceso a los mercados. La cadena de ejemplo en el documento fuente funciona así: XRF → análisis de metales → cumplimiento de RoHS → restricción de metales pesados → páginas de recubrimiento. Cualquiera que sea el enlace desde el que ingresa el usuario, llega a los demás.
La preparación de la muestra es la mitad invisible del resultado en esta familia y es una fuente de error mayor que la técnica misma. El método de digestión, el grado de molienda, el disolvente de extracción y la proporción de dilución modifican notablemente el resultado. La misma muestra en el mismo instrumento da un resultado diferente con una preparación diferente; Por lo tanto, la definición del método también incluye la preparación.
La calibración y la verificación son el tercer componente determinante. Se calibra un instrumento con material de referencia certificado, la curva de calibración se verifica periódicamente y se analiza una muestra de control en cada lote. Sin estos pasos, no se puede rastrear una cantidad producida incluso si el instrumento funciona correctamente.
Grupos de métodos en este campo
Análisis elemental
ICP-OES, ICP-MS, AAS y XRF. Se diferencian en el límite de detección, la tolerancia de la matriz y la capacidad de múltiples elementos.
Cromatografía
GC, GC-MS, HPLC, LC-MS/MS y cromatografía iónica. Separa una mezcla en sus componentes y mide cada uno por separado.
Espectroscopía
FTIR, Raman, UV-Vis y emisión óptica. Para identidad de materiales, identificación de grupos funcionales y composición de aleaciones.
Análisis térmico
DSC, TGA, DMA y dilatometría. Temperaturas de transición, composición, descomposición y comportamiento dimensional.
Microscopía e imagenología
Microscopía óptica, SEM-EDS, radiografía y tomografía. Estructura, defectos y distribución elemental.
Química clásica (húmeda)
Titulación, gravimetría y colorimetría. Se utiliza como método de referencia y para confirmar resultados instrumentales.
Confusiones frecuentes en este campo
- XRF es una herramienta de detección; ve elementos y no distingue compuestos. Una decisión sobre un compuesto restringido requiere confirmación mediante química húmeda.
- La expresión "no detectado" no es prueba de ausencia; se interpreta junto con el límite de detección del método.
- La especificación vincula el método. No se acepta un método técnicamente mejor si la especificación exige otro.
- La preparación de la muestra es parte del resultado; un informe que no indique la preparación no es reproducible.
- Los resultados obtenidos mediante diferentes técnicas no se pueden comparar directamente; sus límites de detección e incertidumbres difieren.
- Una página de método no es una página de prueba; qué método se aplica a qué prueba proviene de la norma del producto.
Qué decisiones respaldan estos resultados
- Correspondencia del método de la especificación con el alcance del laboratorio
- Selección del método según el límite de detección y la compatibilidad de la matriz
- Confirmación de un resultado instrumental con un método de referencia
- Eliminación de desviaciones derivadas de la preparación de la muestra
Pruebas relacionadas
Preguntas frecuentes sobre UV-VIS — análisis
¿Se puede medir una muestra turbia?
No. La turbidez dispersa la luz, aumentando artificialmente la absorbancia. Primero se debe filtrar o centrifugar la muestra.
¿Se puede medir un solo componente en una mezcla?
Sólo si los demás componentes no absorben a la misma longitud de onda. Si hay interferencia, se requiere un método cromatográfico.