Τι είναι η Method Validation;
Η επικύρωση αναλυτικής μεθόδου είναι η πειραματική απόδειξη ότι μια μέθοδος είναι κατάλληλη για την προβλεπόμενη χρήση της. Το ICH Q2(R2) ορίζει τα προς αξιολόγηση χαρακτηριστικά απόδοσης: ειδικότητα, γραμμικότητα και εύρος, ακρίβεια, ακρίβεια (επαναληψιμότητα και ενδιάμεση ακρίβεια), όρια ανίχνευσης και ποσοτικοποίησης και στιβαρότητα.
Σκοπός της Method Validation
Ο σκοπός είναι να δείξει ότι τα αναλυτικά δεδομένα που παράγονται είναι αξιόπιστα. Ένα αποτέλεσμα που παράγεται με μη επικυρωμένη μέθοδο δεν γίνεται αποδεκτό στον φάκελο της άδειας κυκλοφορίας ή σύμφωνα με την GMP.
Σε ποια προϊόντα εφαρμόζεται η Method Validation;
- Μέθοδοι προσδιορισμού και προσμίξεων
- Μέθοδοι δοκιμής διάλυσης
- Μέθοδοι επαλήθευσης καθαρισμού
- Μικροβιολογικές μέθοδοι
- Βιοαναλυτικές μέθοδοι
Σε ποιους τομείς χρησιμοποιείται η Method Validation;
Πρότυπα σχετικά με τη Method Validation
- ICH Q2(R2) (επικύρωση αναλυτικών διαδικασιών)
- ICH Q14 (ανάπτυξη αναλυτικής διαδικασίας)
- Ph. Eur. 5.21 (χημειομετρικές μέθοδοι) και σχετικά γενικά κεφάλαια
- USP <1225> (επικύρωση συμπληρωματικών διαδικασιών)
- USP <1226> (επαλήθευση συμπληρωματικών διαδικασιών)
Συνθήκες της Method Validation
- Τύπος μεθόδου
- Ταυτότητα, δοκιμασία, οριακή δοκιμή για ακαθαρσίες ή ποσοτική δοκιμή ακαθαρσιών. οι απαιτούμενες παράμετροι ποικίλλουν ανάλογα
- Κριτήρια αποδοχής
- Προκαθορισμένο στο πρωτόκολλο επικύρωσης
- Αναγκαστική υποβάθμιση
- Απαιτείται για μεθόδους ένδειξης σταθερότητας ως ένδειξη ειδικότητας
Εξοπλισμός για τη Method Validation
- Συστήματα HPLC / UPLC / GC
- Φασματοφωτόμετρα
- Πρότυπα αναφοράς και πρότυπα ακαθαρσιών
- Λογισμικό στατιστικής αξιολόγησης
Απαιτήσεις δείγματος για τη Method Validation
- Δείγματα δραστικής ουσίας, προϊόντος και εικονικού φαρμάκου
- Γνωστά πρότυπα ακαθαρσιών
- Δείγματα εξαναγκασμένης αποδόμησης
- Πρέπει να παρέχεται το σχέδιο της μεθόδου και η περιγραφή της προβλεπόμενης χρήσης
Διάρκεια της Method Validation
Μια πλήρης μελέτη επικύρωσης διαρκεί εβδομάδες λόγω του αριθμού των παραμέτρων και των απαιτήσεων αναπαραγωγής. Η επαλήθευση μιας συμπληρωματικής μεθόδου είναι συντομότερη.
Διαδικασία της Method Validation
- 1Καθορίζεται η προβλεπόμενη χρήση και ο τύπος της μεθόδου.
- 2Το πρωτόκολλο επικύρωσης και τα κριτήρια αποδοχής έχουν ετοιμαστεί.
- 3Πραγματοποιείται μελέτη ειδικότητας. εφαρμόζεται αναγκαστική υποβάθμιση εάν χρειάζεται.
- 4Πραγματοποιείται η μελέτη γραμμικότητας και εύρους.
- 5Εκτελούνται μελέτες ακρίβειας (ανάκτησης) και ακρίβειας.
- 6Τα όρια ανίχνευσης/ποσοτικοποίησης και η ευρωστία αξιολογούνται. συντάσσεται η έκθεση.
Κριτήρια αποδοχής της Method Validation
Τα κριτήρια αποδοχής ορίζονται στο πρωτόκολλο επικύρωσης ΠΡΙΝ τη μελέτη και ορίζονται σύμφωνα με την προβλεπόμενη χρήση της μεθόδου. Το ICH Q2(R2) ορίζει ποιες παράμετροι πρέπει να αξιολογηθούν. ο οργανισμός ορίζει τα αριθμητικά όρια αποδοχής με δική του αιτιολόγηση.
Αξιολόγηση Αποτελεσμάτων
Η επικύρωση δείχνει ότι η μέθοδος είναι κατάλληλη για την καθορισμένη χρήση, όχι ότι θα λειτουργήσει υπό όλες τις συνθήκες. Απαιτείται επανεκτίμηση εάν η μέθοδος πρόκειται να χρησιμοποιηθεί σε διαφορετικό πίνακα ή διαφορετικό εύρος συγκέντρωσης. Για τις μεθόδους φαρμακοποιίας, η επαλήθευση μπορεί να είναι επαρκής αντί για πλήρη επικύρωση.
Έκθεση της Method Validation
- Περιγραφή μεθόδου και προβλεπόμενη χρήση
- Πρωτόκολλο επικύρωσης και κριτήρια αποδοχής
- Ακατέργαστα δεδομένα και στατιστική αξιολόγηση για κάθε παράμετρο
- Σύγκριση αποτελεσμάτων με τα κριτήρια
- Συμπέρασμα και εύρος εγκυρότητας της μεθόδου
Διαπίστευση
Η EUROLAB κατέχει διεθνώς αναγνωρισμένη διαπίστευση που λαμβάνεται από φορείς διαπίστευσης που συμμετείχαν στις συμφωνίες πολυμερούς αναγνώρισης IAF και ILAC, σύμφωνα με το ISO/IEC 17025 για εργαστηριακές δοκιμές, το ISO/IEC 17020 για την επιθεώρηση και την επιτήρηση και το ISO/IEC 17021-1 και το σύστημα πιστοποίησης προϊόντων ISO/IEC. Αυτή η αλυσίδα διασφαλίζει ότι οι εκθέσεις και τα πιστοποιητικά που εκδίδονται γίνονται αποδεκτά παγκοσμίως.
Το εάν αυτή η δοκιμή μπορεί να προσφερθεί εντός αναγνωρισμένου πεδίου εξαρτάται από το προϊόν σας και το πρότυπο που εφαρμόζεται. Δεδομένου ότι η διαπίστευση βασίζεται στη μέθοδο, το πεδίο εφαρμογής επιβεβαιώνεται γραπτώς στο στάδιο της προσφοράς.
Πεδίο εφαρμογής και εξουσιοδοτήσειςΣχετικοί Κανονισμοί
- Οδηγία 2001/83/ΕΚ για τα φαρμακευτικά προϊόντα για ανθρώπινη χρήση
- Οδηγός GMP (EudraLex τόμος 4)
Φαρμακευτική Ανάλυση — Τι καλύπτει αυτός ο τομέας δοκιμών;
Η παρακάτω ενότητα περιγράφει τον τομέα στον οποίο ανήκει η δοκιμή Method Validation· οι συνθήκες και τα κριτήρια αποδοχής αυτής της συγκεκριμένης δοκιμής δίνονται στις παραπάνω ενότητες. Το πεδίο εφαρμογής που αφορά το προϊόν σας επιβεβαιώνεται εγγράφως στο στάδιο της προσφοράς.
Η φαρμακευτική ανάλυση προσδιορίζει την ταυτότητα, την καθαρότητα, την ποσότητα και τη συμπεριφορά της δραστικής ουσίας του φαρμάκου και του τελικού προϊόντος. Αυτό που διακρίνει αυτόν τον τομέα από τους άλλους είναι ότι οι μέθοδοι ορίζονται σε μεγάλο βαθμό στις ΦΑΡΜΑΚΟΠΟΙΙΕΣ: τόσο η Ευρωπαϊκή Φαρμακοποιία (Ph. Eur.) όσο και η Φαρμακοποιία των Ηνωμένων Πολιτειών (USP) παρέχουν τόσο τη μέθοδο όσο και το πλαίσιο αποδοχής.
Ο δεσμευτικός χαρακτήρας της μεθόδου της φαρμακοποιίας καθορίζει τον τρόπο λειτουργίας του τομέα. Ενώ σε άλλους κλάδους το εργαστήριο μπορεί να επιλέξει κατάλληλη μέθοδο, εδώ ισχύει η μέθοδος που ορίζεται στη μονογραφία· αν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί εναλλακτική μέθοδος, πρέπει να αποδειχθεί η ισοδυναμία της. Αυτό εξασφαλίζει ότι τα αποτελέσματα είναι συγκρίσιμα παγκοσμίως.
Οι αναλύσεις διεξάγονται σε διάφορες ομάδες. Ο προσδιορισμός ταυτότητας και ποσότητας (HPLC, UV, τιτλοδότηση) δείχνει τι είναι το προϊόν και πόση δραστική ουσία περιέχει. Το προφίλ ακαθαρσιών και τα υπολείμματα διαλυτών εντοπίζουν ανεπιθύμητες ενώσεις που προέρχονται από τη διαδικασία παραγωγής. Οι στοιχειακές ακαθαρσίες αφορούν μέταλλα που προέρχονται από καταλύτες και εξοπλισμό. Η συμπεριφορά διάλυσης και διασποράς αποτελεί τον σημαντικότερο δείκτη in vitro σχετικά με τη συμπεριφορά αποδέσμευσης του φαρμάκου στον οργανισμό.
Η ΔΟΚΙΜΗ ΔΙΑΛΥΣΗΣ αποτελεί μία από τις πιο κρίσιμες μετρήσεις στον τομέα αυτό. Δεν αρκεί ένα δισκίο να περιέχει τη σωστή ποσότητα δραστικής ουσίας· η ουσία αυτή πρέπει να διαλύεται με τον κατάλληλο ρυθμό. Το προφίλ διάλυσης χρησιμοποιείται για την αξιολόγηση της επίδρασης αλλαγών στη σύνθεση επί της βιοδιαθεσιμότητας και κατέχει κεντρική θέση στην έγκριση κυκλοφορίας γενοσήμων φαρμάκων.
Η ΕΠΙΚΥΡΩΣΗ ΤΗΣ ΜΕΘΟΔΟΥ αποτελεί υποχρεωτικό βήμα σε αυτήν την κατηγορία. Εάν χρησιμοποιείται μέθοδος της φαρμακοποιίας, επιβεβαιώνεται ότι η μέθοδος λειτουργεί κατάλληλα υπό τις συνθήκες του συγκεκριμένου εργαστηρίου. Εάν έχει αναπτυχθεί δική της μέθοδος, επικυρώνεται με βάση παραμέτρους όπως η γραμμικότητα, η ακρίβεια, η ορθότητα, η επιλεκτικότητα, τα όρια ανίχνευσης και προσδιορισμού, καθώς και η σταθερότητα. Τα αποτελέσματα που προκύπτουν από μια μέθοδο που δεν έχει επικυρωθεί δεν μπορούν να χρησιμοποιηθούν στον φάκελο αδειοδότησης.
Οι δοκιμές σταθερότητας καθορίζουν τη διάρκεια ζωής του προϊόντος και αποτελούν τη μακρότερη διαδικασία στον τομέα αυτό. Το προϊόν διατηρείται υπό καθορισμένες συνθήκες θερμοκρασίας και υγρασίας, αναλύεται σε τακτά χρονικά διαστήματα και τα αποτελέσματα αποτελούν τη βάση για δηλώσεις διάρκειας ζωής και συνθηκών αποθήκευσης. Οι επιταχυνόμενες συνθήκες παρέχουν προκαταρκτικές πληροφορίες, αλλά τα δεδομένα σε πραγματικό χρόνο είναι τα βασικά.
Ο μικροβιολογικός τομέας αποτελεί ξεχωριστό κλάδο: καταμέτρηση μικροβιακού φορτίου, αναζήτηση καθορισμένων μικροοργανισμών, δοκιμή αποστείρωσης σε αποστειρωμένα προϊόντα και δοκιμή βακτηριακών ενδοτοξινών. Στα αποστειρωμένα προϊόντα περιλαμβάνονται επίσης ο έλεγχος ακεραιότητας της συσκευασίας και η επικύρωση αποστείρωσης.
Η ακεραιότητα δεδομένων έχει μετακινηθεί στο επίκεντρο των επιθεωρήσεων τα τελευταία χρόνια. Δεν αρκεί το αποτέλεσμα να είναι σωστό· τα ακατέργαστα δεδομένα πρέπει να είναι ιχνηλάσιμα, αμετάβλητα και ελέγξιμα. Η επικύρωση ηλεκτρονικών συστημάτων καταγραφής έχει επομένως γίνει αναπόσπαστο μέρος της ανάλυσης.
Ομάδες μεθόδων σε αυτόν τον τομέα
Ταυτότητα και προσδιορισμός
HPLC, UPLC, φασματοφωτομετρία UV-Vis, τιτλοδότηση, επιβεβαίωση ταυτότητας με FTIR.
Προσμείξεις και υπολείμματα
Σχετικές προσμείξεις, προϊόντα αποδόμησης, υπολειμματικοί διαλύτες (GC-headspace), έλεγχος νιτροζαμινών.
Στοιχειακές προσμείξεις
Προσδιορισμός στοιχειακών προσμείξεων με ICP-MS και ICP-OES και σχετική αξιολόγηση κινδύνου.
Φυσικοχημικό
Διάλυση και αποσάθρωση, σκληρότητα, τριπτότητα, ομοιομορφία δοσολογικών μονάδων, περιεκτικότητα νερού (Karl Fischer), μέγεθος σωματιδίων.
Μικροβιολογικό
Μικροβιακή καταμέτρηση, καθορισμένοι μικροοργανισμοί, αποστείρωση, βακτηριακή ενδοτοξίνη, αποτελεσματικότητα συντηρητικού.
Σταθερότητα
Μελέτες σταθερότητας πραγματικού χρόνου και επιταχυνόμενης· φωτοσταθερότητα και σταθερότητα κατά τη χρήση.
Συχνές συγχύσεις σε αυτόν τον τομέα
- Η φαρμακοποιική μέθοδος είναι δεσμευτική· μια εναλλακτική μέθοδος μπορεί να χρησιμοποιηθεί μόνο αποδεικνύοντας την ισοδυναμία της.
- Ένα αποτέλεσμα που παράγεται χωρίς επικύρωση μεθόδου δεν μπορεί να χρησιμοποιηθεί σε φάκελο άδειας κυκλοφορίας.
- Η επιταχυνόμενη σταθερότητα δεν αντικαθιστά τα δεδομένα πραγματικού χρόνου· η διάρκεια ζωής υποστηρίζεται από αποτελέσματα πραγματικού χρόνου.
- Το προφίλ διάλυσης είναι ευαίσθητο στον τύπο συσκευής, τον ρυθμό ανάδευσης και το μέσο· οι συνθήκες πρέπει να είναι πλήρεις στην έκθεση.
- Μια ανεπάρκεια στην ακεραιότητα δεδομένων παράγει μη συμμόρφωση σε επιθεώρηση ακόμη κι αν το αποτέλεσμα είναι σωστό.
- Μια αλλαγή σύνθεσης ή προμηθευτή απαιτεί αναλυτική σύγκριση και, όπου χρειάζεται, νέα μελέτη σταθερότητας.
Ποιες αποφάσεις υποστηρίζουν αυτά τα αποτελέσματα
- Ο φάκελος άδειας κυκλοφορίας και η απελευθέρωση παρτίδας
- Καθορισμός διάρκειας ζωής και συνθηκών αποθήκευσης
- Μεταφορά μεθόδου και επικύρωση μεθόδου
- Έλεγχος αποδοχής εισερχόμενων πρώτων υλών από προμηθευτές
- Αξιολόγηση της επίδρασης αλλαγής σύνθεσης στη βιοϊσοδυναμία
Σχετικά τεστ
Συχνές ερωτήσεις για τη Method Validation
Απαιτείται επικύρωση για μια μέθοδο φαρμακοποιίας;
Συνήθως δεν απαιτείται πλήρης επικύρωση, αλλά η επαλήθευση είναι: πρέπει να αποδειχθεί ότι η μέθοδος λειτουργεί με το δείγμα σας στο εργαστήριό σας. Το USP <1226> ορίζει αυτήν την προσέγγιση.
Εάν αλλάξουμε τη μέθοδο, είναι υποχρεωτική η εκ νέου επικύρωση;
Εξαρτάται από το εύρος της αλλαγής. Για μικρές αλλαγές, μπορεί να αρκεί η επανεκτίμηση των επηρεαζόμενων παραμέτρων. μια αλλαγή που αλλάζει την αρχή του διαχωρισμού απαιτεί πλήρη επικύρωση.