E. coli

E. coli是什麼？

大腸桿菌分析回答了兩個不同的問題。 COUNT (ISO 16649) 給出了大腸桿菌總數，作為糞便污染的指標。 STEC DETECTION (ISO 13136) 透過基於 PCR 的方法研究產生志賀毒素的致病性血清群的存在；這是一項安全分析，不應與人口普查混淆。

E. coli的目的

目的是檢測糞便污染並調查致病性大腸桿菌菌株的存在。由於 STEC 即使數量很少也可能導致嚴重疾病，因此它被視為存在/不存在問題，而不是人口普查。

E. coli適用於哪些產品？

生的和未煮熟的肉製品
生奶和用生奶生產的乳酪
新鮮水果、蔬菜和豆芽
飲用水和生活用水
即食產品

E. coli應用於哪些行業？

食品农业零售环境

與E. coli相關的標準

TS ISO 16649-1/-2/-3（β-葡萄醣醛酸酶陽性大腸桿菌計數）
TS EN ISO 9308-1（水中的大腸桿菌和大腸桿菌群 — 膜過濾）
TS EN ISO 13136（STEC 檢測 — 即時 PCR）
TS EN ISO 6887 系列（樣品製備）

E. coli的測試條件

人口普查: 在選擇性介質中，在標準規定的溫度和時間下
STEC: 富集後以PCR篩選stx和eae基因
確認: PCR 陽性樣本中的培養分離

E. coli的測試設備

無菌櫃及培養箱
實時螢光定量PCR系統
免疫磁分離裝置
Membran filtrasyon sistemi
菌落計數器

E. coli的樣品要求

樣品必須以未開封的原包裝形式發送，以保持冷鏈。抽樣方法是否具有批次代表性決定了結果的有效性；單一單位的結果不足以對政黨做出決定。
在 STEC 分析中，樣品量必須達到標準中定義的水平。
水樣本必須在規定的時間內裝在無菌容器中交付。
抽樣方案應根據產品類別來決定

E. coli的測試時程

計數持續時間與潛伏期一樣長。 STEC分析中有富集和PCR步驟；在 PCR 陽性樣本中，培養確認會顯著延長時間。

E. coli的測試程序

1標本是在無菌條件下製備的。
2為了計數，將它們種植在選擇性培養基中並孵育。
3必要時對典型菌落進行計數和驗證。
4對於 STEC，樣本得到了富集。
5應用DNA提取和實時PCR。
6如果結果呈陽性，則進行分離和血清分型。

E. coli的允收準則

對於 STEC (EC) 2073/2005 定義了某些食品類別的食品安全標準，這是存在/不存在的標準。大腸桿菌計數被視為製程衛生標準。驗收標準是 (EU) 2073/2005 中根據食品類別定義的微生物標準。該法規區分了兩類標準：食品安全標準（產品是否可以投放市場）和製程衛生標準（生產過程受到控制）。適用哪一種取決於產品類別，並由適用法規的文字確認。

結果評估

大腸桿菌計數低並不意味著不存在 STEC：致病菌株可導致疾病的數量非常少，並且可能不會出現在總體計數中。這兩種分析回答了不同的問題且不可互換。

E. coli測試報告

樣本識別和批次信息
適用標準和方法
計數結果和測量不確定度
STEC 的 PCR 結果與目標基因
陽性病例的分離情形及血清型訊息

認證

EUROLAB 擁有 IAF 和 ILAC 多邊認可安排締約方認證機構獲得的國際認可認證，根據 ISO/IEC 17025 實驗室測試、ISO/IEC 17020 檢查和監督以及 ISO/IEC 17021-1 和 ISO/IEC 17065 系統和產品認證。該鏈條確保所發布的報告和證書在全球範圍內得到接受。

是否可以在認可範圍內提供此測試取決於您的產品和所採用的標準；由於認證是基於方法的，因此範圍在報價階段以書面形式確認。

範圍和授權

食品測試 — 此測試領域涵蓋哪些內容？

以下段落說明 E. coli 測試所屬的領域；此測試本身的條件與允收標準列於上方各節。您產品專屬的範圍將在報價階段以書面確認。

食品检测证明产品对食用安全,且含有标签所声明的成分。该系列在三个维度上运作:微生物安全、化学安全和营养成分。三者各需要不同的实验室基础设施、不同的方法体系和不同的周转时间。

该领域最鲜明的特点是时间压力。钢材试样可以在架子上等待;而生乳或鲜肉样品不能。取样时间、运输温度以及送达实验室所需的时长直接决定结果的有效性。因此在食品微生物学中,冷链记录是检测报告不可分割的一部分。

在微生物学方面存在两个不同的问题,不应混淆。病原体检测是定性问题:样品中是否存在沙门氏菌?指示菌计数是定量问题,是生产卫生状况的指标。产品中未检出病原体并不代表卫生状况良好;如果嗜温需氧菌总数较高,说明工艺存在问题。

在化学方面,检测农药残留、真菌毒素、重金属、添加剂、兽药残留及工艺污染物(丙烯酰胺、呋喃、多环芳烃)。该领域的多残留方法(基于QuEChERS的LC-MS/MS和GC-MS/MS)可在一次分析中筛查数百种活性物质;限量按每个产品-物质组合分别规定。

在成分方面,测定蛋白质、脂肪、水分、灰分、纤维、糖分、脂肪酸组成及维生素矿物质含量。这些数值是标签营养声明的依据,容差范围由法规规定——声明值与实测值之间的差异必须保持在该容差之内。

食品没有CE标志,这决定了该领域的运作方式。合规性通过运行基于HACCP的食品安全体系、遵守标签规则以及不超过污染物、残留物和微生物限量来证明。检测结果所提供的证据不是为了某张证书,而是为了证明一个正在运行的体系。

过敏原管理具有特殊重要性。产品中存在未声明的过敏原是食品召回最常见的原因之一。此处的分析与清洁验证同步进行:证明产线在含过敏原的生产批次之后已得到充分清洁,交叉污染风险处于受控状态。

自愿性认证方案在该领域已实际上成为强制要求。零售连锁要求供应商持有GFSI认可方案(BRCGS、IFS、FSSC 22000)下的证书;没有它,产品实际上无法上架。

此領域的方法群組

病原体检测
沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌、弯曲杆菌、克罗诺杆菌及产志贺毒素大肠杆菌的检测;基于培养和分子的方法。
指示菌计数
嗜温需氧菌总数、肠杆菌科、大肠菌群及大肠杆菌、凝固酶阳性葡萄球菌、酵母和霉菌、乳酸菌、亚硫酸盐还原梭菌。
农药与兽药残留
采用QuEChERS萃取的LC-MS/MS及GC-MS/MS多残留筛查。
真菌毒素与污染物
黄曲霉毒素、赭曲霉毒素A、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、展青霉素;重金属(ICP-MS)、丙烯酰胺及多环芳烃化合物。
营养成分
凯氏定氮蛋白质、脂肪及脂肪酸谱、水分、灰分、膳食纤维、糖分谱、维生素及矿物质分析。
过敏原与真实性
麸质、牛奶、鸡蛋、坚果和大豆过敏原分析;用于物种鉴定和掺假检测的分子方法。

此領域常見混淆之處

取样是结果的一半。若样品运输温度不当或延误,即使在实验室中分析正确,结果也是无效的。
未检出病原体并不代表卫生状况良好;指示菌计数提供另一层信息,两者需结合解读。
从批次中抽取样品所得的结果,只有在抽样方案经过统计学设计的情况下,才能推及整个批次。
限量按产品类别在不同法规中分别规定,并定期更新;若依据过时的限量表作出合规判断,可能是错误的。
在出口方面,目的地国家的限量可能与欧盟限量不同;同一产品在一个市场可能合规,在另一个市场则可能不合规。

這些結果支持哪些決策

HACCP计划的验证与过程监控
标签上营养声明和过敏原信息的依据
出口前的卫生证书及对目标市场限量的符合性
基于供应商与批次的验收控制
保质期研究与储存条件确定
为GFSI认可方案审核提供证据

關於E. coli的常見問題

PCR結果呈陽性，產品一定被污染了嗎？

PCR顯示目標基因的存在；它並不能單獨證明存在活細菌。因此，該標準要求透過文化隔離對陽性結果進行驗證。核查結果作為最終決定的依據。