Sitotoksisite – ISO 10993-5

Was ist Zytotoxizität — ISO 10993-5?

Beim Zytotoxizitätstest wird in der Zellkultur untersucht, ob das Medizinprodukt oder Material eine toxische Wirkung auf Zellen hat. ISO 10993-5 definiert drei Ansätze: den Extrakttest, den direkten Kontakt und den indirekten Kontakt (Agardiffusion oder Filterdiffusion). Die Extraktionsmethode wird am häufigsten verwendet.

Zweck von Zytotoxizität — ISO 10993-5

Ziel ist es, frühzeitig und kostengünstig festzustellen, ob aus dem Material freigesetzte Bestandteile Zellen schädigen. Zytotoxizität ist der Screening-Schritt der biologischen Bewertung: Das Ergebnis hat hier direkten Einfluss auf die Planung nachfolgender Endpunkte.

Bei welchen Produkten wird Zytotoxizität — ISO 10993-5 angewendet?

Medizinische Geräte aller Kontaktarten
Implantate und Implantatbeschichtungen
Katheter, Kanülen und Sets
Wundauflagen und Bandagen
Dentalmaterialien

In welchen Branchen wird Zytotoxizität — ISO 10993-5 eingesetzt?

Medizinisches GerätArzneimittelGesundheitspflegeBiotechnologie

Normen zu Zytotoxizität — ISO 10993-5

ISO 10993-5in vitro sitotoksisite prüfen

Prüfbedingungen für Zytotoxizität — ISO 10993-5

Verfahren: Auszug, direkter Kontakt oder indirekter Kontakt
Zelllinie: Im Standard empfohlene kontinuierliche Zelllinie (üblicherweise L929)
Extraktion: Oberfläche/Volumen-Verhältnis, Lösungsmittel, Temperatur und Dauer gemäß ISO 10993-12
Bewertung: Messung der Zelllebensfähigkeit (z. B. MTT/XTT) und morphologische Einstufung

Prüfgerät für Zytotoxizität — ISO 10993-5

Zellkulturlabor und CO₂-Inkubator
Biosicherheitsschrank der Klasse II
Mikroplatten-Reader
Inverses Mikroskop
Temperaturgesteuerter Ofen zur Extraktion

Probenanforderungen für Zytotoxizität — ISO 10993-5

Die Probe muss im Endzustand angeliefert werden, der alle Serienprozesse (einschließlich Sterilisation) durchlaufen hat.
Es müssen die Oberfläche und die Masse des Geräts im Patientenkontakt angegeben werden.
Materialzusammensetzung, Herstellungshilfsmittel und ggf. Beschichtungsinformationen müssen weitergegeben werden.
Aus der Oberfläche errechnet sich die zur Extraktion benötigte Probenmenge; Dies muss vor dem Versand bestätigt werden.
Bei sterilen Produkten muss die Verpackungsintegrität gewahrt bleiben.

Dauer von Zytotoxizität — ISO 10993-5

Bei Extraktion und Zellinkubation ist der Test in der Regel innerhalb einer Woche abgeschlossen. Dazu gehört auch die Vorbereitung der Zellkultur.

Ablauf von Zytotoxizität — ISO 10993-5

1Es werden Kontaktart und Oberfläche des Gerätes ermittelt.
2Die Extraktionsbedingungen werden gemäß ISO 10993-12 ausgewählt und der Extrakt vorbereitet.
3Die Zellen werden in Platten ausgesät und dort anhaften gelassen.
4Der Extrakt (oder die Probe) wird auf die Zellen aufgetragen; Parallel dazu werden Positiv- und Negativkontrollen durchgeführt.
5Die Lebensfähigkeit der Zellen wird am Ende der Inkubation gemessen.
6Morphologische Veränderungen werden unter dem Mikroskop beurteilt.
7Das Ergebnis wird anhand der Kontrollen bewertet.

Annahmekriterien für Zytotoxizität — ISO 10993-5

Das Akzeptanzkriterium wird entsprechend der Kontaktart des Geräts (Oberfläche, externe Kommunikation, Implantat), der Kontaktdauer und dem Verwendungszweck aus dem entsprechenden Abschnitt der Norm ausgewählt. Die Bewertung basiert nicht auf einem einzelnen Testergebnis, sondern auf dem gemäß ISO 10993-1 durchgeführten biologischen Bewertungsplan. Auf dieser Seite gibt es daher kein festes Limit.

Auswertung der Ergebnisse

Das Ergebnis wird anhand der Verringerung der Lebensfähigkeit der Zellen im Vergleich zur Negativkontrolle interpretiert. Ein als zytotoxisch befundenes Material wird nicht direkt abgelehnt; Die Quelle des Befundes (Herstellungsrückstände, Sterilisationsnebenprodukt, Zusatzstoff) wird untersucht und zusammen mit der Risikobewertung berücksichtigt.

Prüfbericht zu Zytotoxizität — ISO 10993-5

Geräteidentifikation, Modell und Chargennummer, falls vorhanden
Art des Gerätekontakts, Dauer und Verwendungszweck
Norm und Abschnitt angewendet
Extraktions- oder Probenvorbereitungsbedingungen
Verwendete Zelllinie, Testsystem oder Testanlage
Kontrollen und ihre Ergebnisse
Beobachtungen, Messergebnisse und Bewertung
Eine Aussage, dass das Ergebnis nur für die zum Test eingereichte Probe gilt

Akkreditierung

EUROLAB verfügt über eine international anerkannte Akkreditierung, die von Akkreditierungsstellen erhalten wurde, die Vertragspartei der multilateralen Anerkennungsvereinbarungen IAF und ILAC sind, gemäß ISO/IEC 17025 für Labortests, ISO/IEC 17020 für Inspektion und Überwachung sowie ISO/IEC 17021-1 und ISO/IEC 17065 für System- und Produktzertifizierung. Diese Kette stellt sicher, dass die ausgestellten Berichte und Zertifikate weltweit akzeptiert werden.

Ob dieser Test im akkreditierten Rahmen angeboten werden kann, hängt von Ihrem Produkt und der angewandten Norm ab; Da die Akkreditierung methodenbasiert erfolgt, wird der Umfang bereits im Angebotsstadium schriftlich bestätigt.

Geltungsbereich und Berechtigungen

Medikal Cihaz Testleri — Was umfasst dieser Prüfbereich?

Der folgende Abschnitt beschreibt das Gebiet, zu dem der Test Zytotoxizität gehört; die Bedingungen und Abnahmekriterien dieses konkreten Tests stehen in den obigen Abschnitten. Der für Ihr Produkt spezifische Umfang wird schriftlich im Angebotsstadium festgelegt.

Medizinprodukteprüfungen zeigen, dass ein Gerät für Patient und Anwender sicher ist und seine beabsichtigte Leistung beibehält. In diesem Bereich bedeutet Sicherheit nicht nur, Schaden zu vermeiden; auch das Versagen der erwarteten Funktion wird als Risiko behandelt. Ein Monitor, der einen Alarm verpasst, oder eine Pumpe, die die falsche Dosis abgibt, ist unmittelbar ein Patientensicherheitsereignis.

Im Zentrum des Fachgebiets steht das RISIKOMANAGEMENT, und das unterscheidet den Medizinbereich von anderen Sektoren. Der nach ISO 14971 durchgeführte Risikomanagementprozess legt auch fest, welche Prüfungen erforderlich sind. Die Prüfliste wird nicht aus einer Normentabelle kopiert; sie wird aus dem Verwendungszweck des Geräts, der Art und Dauer des Patientenkontakts, der Nutzungsumgebung und dem vorhersehbaren Fehlgebrauch abgeleitet und begründet.

Die Bewertung besteht aus mehreren getrennten Arbeitsbereichen, jeder mit eigenem Normensatz. Die Biokompatibilität folgt der ISO-10993-Reihe, die elektrische Gerätesicherheit der IEC-60601-Reihe, die Sterilisation ISO 11135/11137/17665, die Verpackung ISO 11607, die Software IEC 62304 und die Gebrauchstauglichkeit IEC 62366. Das Qualitätsmanagementsystem (ISO 13485) bildet den verbindenden Rahmen.

Welche Prüfungen erforderlich sind, bestimmt sich nach der KLASSE des Geräts und seiner ART DES KÖRPERKONTAKTS. Ein Produkt mit kurzem Hautkontakt und ein in den Blutkreislauf eindringendes Implantat durchlaufen nicht denselben Prüfumfang; der Umfang wird durch einen nach ISO 10993-1 erstellten biologischen Bewertungsplan festgelegt. Dieser Plan begründet schriftlich, welche Endpunkte erforderlich sind und warum andere nicht.

Verpackung und Sterilisation werden in diesem Bereich ebenso ernst genommen wie das Gerät selbst. Bei einem sterilen Gerät ist die Verpackung kein Transportbehälter, sondern die Barriere, die die Sterilität aufrechterhält; wird die Barriere durchbrochen, ist das Gerät nicht mehr steril. Verpackungsprozesse werden daher validiert, und die Haltbarkeit wird durch Echtzeit-Alterungsdaten gestützt.

Bei Geräten mit Software verlagert sich die Bewertung von der Prüfung hin zur PROZESS-Sicherung. IEC 62304 legt fest, welche Entwicklungs- und Verifizierungsschritte je nach Sicherheitsklasse der Software befolgt werden müssen; der Nachweis ist die Rückverfolgbarkeit des Entwicklungsprozesses. Nicht das Testen der Software macht sie sicher, sondern die Prozessdokumentation.

Die klinische Seite ist eine eigene Säule der technischen Dokumentation. Prüfberichte zeigen, dass das Gerät technisch sicher ist; die klinische Bewertung belegt, dass das Gerät den beabsichtigten klinischen Nutzen erbringt und das Nutzen-Risiko-Verhältnis akzeptabel ist. Keines ersetzt das andere.

Methodengruppen in diesem Bereich

Biokompatibilität
Zytotoxizität, Reizung, Hautsensibilisierung, systemische Toxizität, Hämokompatibilität, Genotoxizität und lokale Effekte nach Implantation. Die erforderlichen Endpunkte werden durch den ISO-10993-1-Plan festgelegt.
Sicherheit elektrischer Geräte
IEC 60601-1 grundlegende Sicherheit und wesentliche Leistungsmerkmale; EMV-, Alarm-, Gebrauchstauglichkeits- und Umgebungsanforderungen über die Nebennormen.
Sterilisationsvalidierung
Validierung von Sterilisationsprozessen durch Ethylenoxid, Bestrahlung oder feuchte Hitze; Bioburden- und Sterilitätssicherheitsniveau-Studien.
Verpackung
Integrität des sterilen Barrieresystems, Siegelfestigkeit, Vertriebssimulation und Haltbarkeitsstudien.
Mikrobiologische Prüfungen
Bioburden-Bestimmung, Sterilitätsprüfung, bakterielles Endotoxin und, falls erforderlich, Trägervalidierungsstudien.
Software und Gebrauchstauglichkeit
IEC-62304-Lebenszyklusnachweise und auf Bedienfehler fokussierte Bewertung gemäß IEC 62366.

Häufig verwechselt in diesem Bereich

Zytotoxizität allein ist kein Beweis für Biokompatibilität; Der erforderliche Satz an Endpunkten wird gemäß ISO 10993-1 ermittelt und begründet.
Ein ISO-13485-Zertifikat verleiht keine CE-Kennzeichnung; die Klassifizierung nach MDR, die technische Dokumentation und das Verfahren der Benannten Stelle laufen gesondert.
Die beschleunigte Alterung ersetzt nicht die Echtzeitalterung; Eine Haltbarkeitsaussage wird durch Echtzeitdaten gestützt.
Ein Materialwechsel (Lieferant, Pigment, Sterilisationsmethode) kann eine Wiederholung der biologischen Beurteilung erfordern; er ist keine stille Änderung.
Eine Bewertung ohne die Neben- und Sondernormen zu IEC 60601-1 ist unvollständig; welche -1-x- und -2-x-Normen angewendet wurden, muss im Bericht erscheinen.
In-vitro-Diagnostika fallen unter die IVDR und nicht die MDR, und Laborgeräte liegen oft im Bereich der IEC 61010-1.

Welche Entscheidungen diese Ergebnisse unterstützen

MDR/IVDR-Technische Dokumentation und Bewertung durch die Benannte Stelle
Abschluss des Plans zur biologischen Beurteilung
Sterilisations- und Verpackungsvalidierung
Bestimmung von Haltbarkeit und Lagerbedingungen
Festlegung des Umfangs der Neubewertung nach einer Konstruktionsänderung

Häufige Fragen zu Zytotoxizität — ISO 10993-5

Bedeutet ein zytotoxisches Ergebnis, dass das Gerät nicht verwendet werden kann?

Nein. Der Befund ist eine Warnung; seine Quelle wird untersucht. Oft handelt es sich um Rückstände nach der Reinigung oder Sterilisation, und das Ergebnis ändert sich, sobald der Prozess korrigiert wird.

Welches Extraktionslösungsmittel wird verwendet?

ISO 10993-12 erfordert die gemeinsame Verwendung sowohl polarer als auch unpolarer Lösungsmittel; Die Auswahl erfolgt auf der Grundlage der Beschaffenheit des Materials und des klinischen Einsatzzustands.

Zytotoxizität — ISO 10993-5