E. coli

Was ist E. coli?

Die E. coli-Analyse beantwortet zwei verschiedene Fragen. COUNT (ISO 16649) gibt die Gesamtzahl von E. coli als Indikator für eine Kontamination durch Fäkalien an. STEC DETECTION (ISO 13136) untersucht das Vorhandensein pathogener Serogruppen, die Shiga-Toxin produzieren, mit einer PCR-basierten Methode; Dies ist eine Sicherheitsanalyse und sollte nicht mit einer Volkszählung verwechselt werden.

Zweck von E. coli

Ziel ist es, fäkale Kontaminationen zu erkennen und das Vorhandensein pathogener E. coli-Stämme zu untersuchen. Da STEC bereits in geringer Zahl schwere Krankheiten verursachen kann, wird es als An-/Abwesenheitsfrage und nicht als Zählung behandelt.

Bei welchen Produkten wird E. coli angewendet?

Rohe und ungekochte Fleischprodukte
Rohmilch und Käse aus Rohmilch
Frisches Obst, Gemüse und Sprossen
Trink- und Brauchwasser
Fertiggerichte

In welchen Branchen wird E. coli eingesetzt?

LebensmittelLandwirtschaftEinzelhandelUmwelt

Normen zu E. coli

TS ISO 16649-1/-2/-3 (Beta-Glucuronidase-positive E. coli-Anzahl)
TS EN ISO 9308-1 (E. coli und coliforme Bakterien in Wasser — Membranfiltration)
TS EN ISO 13136 (STEC-Nachweis — Echtzeit-PCR)
TS EN ISO 6887-Reihe (Probenvorbereitung)

Prüfbedingungen für E. coli

Volkszählung: In selektivem Medium, bei der in der Norm definierten Temperatur und Zeit
STEC: Screening von stx- und eae-Genen mittels PCR nach Anreicherung
Überprüfung: Kulturelle Isolation in PCR-positiven Proben

Prüfgerät für E. coli

Sterilschrank und Inkubatoren
Echtzeit-PCR-System
Immunmagnetisches Trenngerät
Membran filtrasyon sistemi
Koloniezähler

Probenanforderungen für E. coli

Die Probe muss ungeöffnet und in der Originalverpackung unter Einhaltung der Kühlkette verschickt werden. Ob die Probenahmemethode für die Charge repräsentativ ist, bestimmt die Gültigkeit des Ergebnisses; Das Ergebnis einer einzelnen Einheit reicht nicht aus, um eine Entscheidung über die Partei zu treffen.
Bei der STEC-Analyse muss die Probenmenge dem im Standard definierten Niveau entsprechen.
Wasserproben müssen in einem sterilen Behälter und innerhalb einer definierten Zeit geliefert werden.
Der Probenahmeplan sollte je nach Produktkategorie festgelegt werden

Dauer von E. coli

Die Zählung dauert so lange wie die Inkubationszeit. Bei der STEC-Analyse gibt es Anreicherungs- und PCR-Schritte; Bei PCR-positiven Proben verlängert die kulturelle Bestätigung die Zeit deutlich.

Ablauf von E. coli

1Die Probe wird aseptisch vorbereitet.
2Zur Zählung werden sie in selektive Medien gepflanzt und inkubiert.
3Typische Kolonien werden gezählt und bei Bedarf überprüft.
4Für STEC wird die Probe angereichert.
5Es kommen DNA-Extraktion und Echtzeit-PCR zum Einsatz.
6Bei positiven Ergebnissen werden Isolierung und Serotypisierung durchgeführt.

Annahmekriterien für E. coli

Denn STEC (EG) 2073/2005 definiert Lebensmittelsicherheitskriterien in bestimmten Lebensmittelkategorien und es handelt sich hierbei um ein Anwesenheits-/Abwesenheitskriterium. Die Anzahl der E. coli gilt als Kriterium der Prozesshygiene. Akzeptanzkriterien sind mikrobiologische Kriterien, die in der Verordnung (EU) 2073/2005 auf der Grundlage einer Lebensmittelkategorie definiert sind. Die Verordnung unterscheidet zwei Arten von Kriterien: das Lebensmittelsicherheitskriterium (kann das Produkt auf den Markt gebracht werden) und das Prozesshygienekriterium (ist der Produktionsprozess unter Kontrolle). Welche davon gilt, hängt von der Produktkategorie ab und wird durch den Text der geltenden Verordnung bestätigt.

Auswertung der Ergebnisse

Eine niedrige E. coli-Zahl bedeutet nicht, dass kein STEC vorhanden ist: Krankheitserregerstämme können in sehr geringer Zahl Krankheiten verursachen und erscheinen möglicherweise nicht in der Gesamtzahl. Die beiden Analysen beantworten unterschiedliche Fragen und sind nicht austauschbar.

Prüfbericht zu E. coli

Probenidentifizierung und Chargeninformationen
Angewandter Standard und Methode
Zählergebnis und Messunsicherheit
PCR-Ergebnisse und Zielgene für STEC
Informationen zur Isolierung und zum Serotyp bei positiven Fällen

Akkreditierung

EUROLAB verfügt über eine international anerkannte Akkreditierung, die von Akkreditierungsstellen erhalten wurde, die Vertragspartei der multilateralen Anerkennungsvereinbarungen IAF und ILAC sind, gemäß ISO/IEC 17025 für Labortests, ISO/IEC 17020 für Inspektion und Überwachung sowie ISO/IEC 17021-1 und ISO/IEC 17065 für System- und Produktzertifizierung. Diese Kette stellt sicher, dass die ausgestellten Berichte und Zertifikate weltweit akzeptiert werden.

Ob dieser Test im akkreditierten Rahmen angeboten werden kann, hängt von Ihrem Produkt und der angewandten Norm ab; Da die Akkreditierung methodenbasiert erfolgt, wird der Umfang bereits im Angebotsstadium schriftlich bestätigt.

Geltungsbereich und Berechtigungen

Lebensmittelprüfung — Was umfasst dieser Prüfbereich?

Der folgende Abschnitt beschreibt das Gebiet, zu dem der Test E. coli gehört; die Bedingungen und Abnahmekriterien dieses konkreten Tests stehen in den obigen Abschnitten. Der für Ihr Produkt spezifische Umfang wird schriftlich im Angebotsstadium festgelegt.

Lebensmittelprüfungen zeigen, dass ein Produkt für den Verzehr sicher ist und das enthält, was auf dem Etikett steht. Die Familie arbeitet entlang dreier Achsen: mikrobiologische Sicherheit, chemische Sicherheit und Nährstoffzusammensetzung. Alle drei erfordern eine unterschiedliche Laborinfrastruktur, einen anderen Methodenkörper und eine unterschiedliche Bearbeitungszeit.

Das auffälligste Merkmal dieses Bereichs ist der ZEITDRUCK. Eine Stahlprobe kann im Regal warten; eine Rohmilch- oder Frischfleischprobe nicht. Der Zeitpunkt der Probenahme, die Transporttemperatur und die Zeit bis zum Erreichen des Labors bestimmen unmittelbar die Gültigkeit des Ergebnisses. Deshalb ist die Kühlkettenaufzeichnung in der Lebensmittelmikrobiologie ein untrennbarer Teil des Prüfberichts.

Auf der mikrobiologischen Seite gibt es zwei unterschiedliche Fragen, die nicht verwechselt werden dürfen. Der NACHWEIS eines Erregers ist eine qualitative Frage: Ist Salmonella in der Probe vorhanden oder nicht? Die KEIMZAHLBESTIMMUNG von Indikatororganismen ist eine quantitative Frage und ein Indikator für die Produktionshygiene. Das Fehlen eines Erregers in einem Produkt zeigt nicht, dass die Hygiene gut ist; ist die Gesamtzahl mesophiler aerober Keime hoch, liegt ein Problem im Prozess vor.

Auf der chemischen Seite werden Pestizidrückstände, Mykotoxine, Schwermetalle, Zusatzstoffe, Tierarzneimittelrückstände und Prozesskontaminanten (Acrylamid, Furan, PAK) gemessen. Multirückstandsmethoden in diesem Bereich (QuEChERS-basiertes LC-MS/MS und GC-MS/MS) können Hunderte Wirkstoffe in einer einzigen Analyse erfassen; Grenzwerte sind für jedes Produkt-Wirkstoff-Paar separat festgelegt.

Auf der Zusammensetzungsseite werden Protein, Fett, Feuchtigkeit, Asche, Ballaststoffe, Zuckerprofil, Fettsäurezusammensetzung sowie Vitamin- und Mineralstoffgehalt bestimmt. Diese Werte sind die Grundlage der Nährwertangabe auf dem Etikett, und die Toleranzbereiche sind gesetzlich festgelegt — die Abweichung zwischen deklariertem und gemessenem Wert muss innerhalb dieser Toleranz bleiben.

Es gibt KEINE CE-Kennzeichnung für Lebensmittel, und das prägt die Arbeitsweise dieses Bereichs. Die Konformität wird durch den Betrieb eines HACCP-basierten Lebensmittelsicherheitssystems, die Einhaltung der Kennzeichnungsvorschriften und die Nichtüberschreitung von Kontaminanten-, Rückstands- und mikrobiologischen Grenzwerten nachgewiesen. Ein Prüfergebnis liefert Belege nicht für ein Zertifikat, sondern für ein funktionierendes System.

Das Allergenmanagement hat besonderes Gewicht. Das Vorhandensein eines nicht deklarierten Allergens in einem Produkt ist eine der häufigsten Ursachen für Lebensmittelrückrufe. Die Analyse läuft hier zusammen mit der Reinigungsvalidierung: Es wird gezeigt, dass die Linie nach einem allergenhaltigen Produktionslauf ausreichend gereinigt wurde und das Risiko einer Kreuzkontamination unter Kontrolle ist.

Freiwillige Systeme sind in diesem Bereich faktisch verpflichtend geworden. Einzelhandelsketten verlangen von ihren Lieferanten ein Zertifikat nach einem GFSI-anerkannten Schema (BRCGS, IFS, FSSC 22000); ohne dieses ist der Weg ins Regal praktisch unmöglich.

Methodengruppen in diesem Bereich

Erregernachweis
Nachweis von Salmonella, Listeria monocytogenes, Campylobacter, Cronobacter und Shigatoxin-bildenden E. coli; kultur- und molekularbasierte Methoden.
Indikatorkeimzahlen
Gesamtzahl mesophiler aerober Keime, Enterobacteriaceae, Koliforme und E. coli, koagulase-positive Staphylokokken, Hefen und Schimmelpilze, Milchsäurebakterien, sulfitreduzierende Clostridien.
Pestizid- und Tierarzneimittelrückstände
Multirückstands-Screening mittels LC-MS/MS und GC-MS/MS mit QuEChERS-Extraktion.
Mykotoxine und Kontaminanten
Aflatoxine, Ochratoxin A, Deoxynivalenol, Patulin; Schwermetalle (ICP-MS), Acrylamid und PAK-Verbindungen.
Nährwertzusammensetzung
Kjeldahl-Protein, Fett- und Fettsäureprofil, Feuchtigkeit, Asche, Ballaststoffe, Zuckerprofil, Vitamin- und Mineralstoffanalysen.
Allergene und Authentizität
Gluten-, Milch-, Ei-, Nuss- und Soja-Allergenanalysen; molekulare Methoden zur Artbestimmung und Verfälschungserkennung.

Häufig verwechselt in diesem Bereich

Die Probenahme ist die halbe Miete des Ergebnisses. Eine bei falscher Temperatur transportierte oder verspätete Probe liefert ein ungültiges Ergebnis, selbst wenn sie im Labor korrekt analysiert wird.
Das Fehlen eines Erregers zeigt nicht, dass die Hygiene gut ist; Indikatorkeimzahlen liefern eine separate Information, und beide werden gemeinsam gelesen.
Ein Ergebnis aus einer aus einer Charge entnommenen Probe kann nur dann auf die gesamte Charge verallgemeinert werden, wenn der Probenahmeplan statistisch aufgestellt wurde.
Grenzwerte werden in separaten Verordnungen je Produktgruppe festgelegt und regelmäßig aktualisiert; eine Konformitätsentscheidung auf Basis einer veralteten Grenzwerttabelle kann falsch sein.
Bei Exporten können die Grenzwerte des Ziellandes von den EU-Grenzwerten abweichen; dasselbe Produkt kann in einem Markt konform und in einem anderen nicht konform sein.

Welche Entscheidungen diese Ergebnisse unterstützen

Verifizierung des HACCP-Plans und Prozessüberwachung
Die Grundlage für die Nährwertangabe und die Allergeninformation auf dem Etikett
Gesundheitszeugnisse vor dem Export und Einhaltung der Grenzwerte des Zielmarkts
Lieferanten- und chargenbasierte Abnahmekontrolle
Haltbarkeitsstudien und Festlegung der Lagerbedingungen
Erstellung von Nachweisen für Audits nach GFSI-anerkannten Systemen

Häufige Fragen zu E. coli

PCR war positiv, ist das Produkt definitiv kontaminiert?

PCR zeigt das Vorhandensein des Zielgens an; Dies allein beweist nicht, dass es lebende Bakterien gibt. Daher erfordert der Standard die Überprüfung positiver Ergebnisse durch kulturelle Isolierung. Das Prüfergebnis wird als Grundlage für die endgültige Entscheidung herangezogen.