Endotoxin | EUROLAB

Qu'est-ce que Endotoxin ?

Le test des endotoxines mesure la quantité de lipopolysaccharide (endotoxine) provenant de la paroi cellulaire des bactéries à Gram négatif. L'endotoxine résiste à la chaleur : la stérilisation tue la bactérie mais ne détruit pas l'endotoxine. Un produit stérile peut donc toujours être pyrogène et doit être testé séparément.

Objectif de Endotoxin

L'objectif est de montrer que le niveau d'endotoxines dans les dispositifs qui entrent en contact avec le corps via la circulation sanguine, le liquide céphalo-rachidien ou l'implantation est inférieur à la limite autorisée.

À quels produits Endotoxin s'applique-t-il ?

Cathéters intraveineux et sets de perfusion
Implants
Sets de dialyse
Instruments et sets chirurgicaux
Appareils en contact avec le liquide céphalo-rachidien

Dans quels secteurs Endotoxin est-il utilisé ?

Dispositif médicalSoins de santéMédicaments

Normes relatives à Endotoxin

PE 2.6.14
USP <85>
ANSI/AAMI ST72
ISO 11737-3
ISO 11607emballage barrière stérile du produit final test

Conditions de Endotoxin

Méthode: Méthodes LAL par gel-clot, turbidimétrique ou chromogénique
Extraction: Les surfaces en contact avec le corps du produit sont extraites avec de l'eau sans endotoxines
Contrôle des interférences: Il faut vérifier que le produit n'inhibe ni n'améliore le test

Équipement pour Endotoxin

Kits et réactifs de test LAL
Verrerie sans endotoxines
Lecteur de microplaques (pour méthodes cinétiques)
Four à chaleur sèche (pour la dépyrogénation)
Incubateur à température contrôlée

Exigences d'échantillon pour Endotoxin

Le produit final stérilisé
La surface en contact avec le corps doit être connue
Le nombre d'échantillons est déterminé en fonction de la pharmacopée et des informations sur le lot.
L'échantillon doit être préparé et transporté dans des conteneurs sans endotoxines

Durée de Endotoxin

Le test initial, y compris l’étude d’interférence (inhibition/amélioration), prend plusieurs jours ; les tests de routine sont plus courts.

Procédure de Endotoxin

1La limite d'endotoxines du produit est calculée.
2Une étude d'interférence est réalisée, ou une référence est faite à une étude existante.
3Le produit est extrait avec de l'eau sans endotoxines.
4L'extrait est mélangé au réactif LAL.
5Il est incubé à la température définie.
6La formation de caillots, la turbidité ou le développement de la couleur sont mesurés, selon la méthode.
7La quantité d'endotoxine est calculée à partir de la courbe étalon.

Critères d'acceptation de Endotoxin

Le critère d'acceptation est la limite d'endotoxines calculée pour le produit. Cette limite est calculée selon la formule définie dans la pharmacopée, en fonction de la voie de contact du dispositif et du poids du patient ; la limite est nettement inférieure pour les dispositifs en contact avec le liquide céphalo-rachidien.

Évaluation des résultats

Le résultat est comparé à la limite calculée. Si l'étude d'interférence n'est pas valide, le résultat ne peut pas être interprété ; lorsque le produit supprime la réaction LAL, un facteur de dilution doit être déterminé.

Rapport de Endotoxin

Pharmacopée appliquée et méthode
Description de l'échantillon, lot et surface
Limite d'endotoxine calculée
Résultat de l'étude d'interférence et facteur de dilution
Valeur d'endotoxine mesurée (UE/appareil ou UE/mL)
Comparaison avec la limite

Accréditation

EUROLAB détient une accréditation internationalement reconnue obtenue auprès des organismes d'accréditation parties aux accords de reconnaissance multilatérale de l'IAF et de l'ILAC, selon ISO/IEC 17025 pour les tests en laboratoire, ISO/IEC 17020 pour l'inspection et la surveillance, et ISO/IEC 17021-1 et ISO/IEC 17065 pour la certification des systèmes et des produits. Cette chaîne garantit que les rapports et certificats délivrés sont acceptés dans le monde entier.

La possibilité de proposer ce test dans le cadre d'une accréditation dépend de votre produit et de la norme appliquée ; l'accréditation étant méthodologique, le périmètre est confirmé par écrit au stade du devis.

Portée et autorisations

Règlements connexes

MDR (UE) 2017/745
Exigences de la pharmacopée

Medikal Cihaz Testleri — Que couvre ce domaine d'essai ?

La section ci-dessous décrit le domaine auquel appartient l'essai Endotoxin ; les conditions et critères d'acceptation de cet essai figurent dans les sections ci-dessus. Le périmètre propre à votre produit est confirmé par écrit au stade du devis.

Les essais sur dispositifs médicaux démontrent qu'un dispositif est sûr pour le patient et l'utilisateur et qu'il conserve sa performance prévue. Dans ce domaine, la sécurité ne consiste pas seulement à éviter un dommage ; l'incapacité du dispositif à remplir sa fonction attendue est aussi traitée comme un risque. Un moniteur qui manque une alarme ou une pompe qui délivre une mauvaise dose est directement un événement de sécurité du patient.

Au cœur du domaine se trouve la GESTION DES RISQUES, ce qui distingue le médical des autres secteurs. Le processus de gestion des risques mené selon l'ISO 14971 détermine également quels essais sont requis. La liste des essais n'est pas recopiée d'un tableau de normes ; elle est déduite et justifiée à partir de l'usage prévu du dispositif, de la nature et de la durée du contact avec le patient, de l'environnement d'utilisation et du mésusage raisonnablement prévisible.

L'évaluation comprend plusieurs domaines de travail distincts, chacun avec son propre ensemble de normes. La biocompatibilité relève de la série ISO 10993, la sécurité électrique de la série IEC 60601, la stérilisation de l'ISO 11135/11137/17665, l'emballage de l'ISO 11607, le logiciel de l'IEC 62304 et l'utilisabilité de l'IEC 62366. Le système qualité (ISO 13485) est le cadre qui relie ces éléments.

Les essais requis sont déterminés par la CLASSE du dispositif et son MODE DE CONTACT AVEC LE CORPS. Un produit en contact bref avec la peau et un implant pénétrant dans la circulation sanguine ne suivent pas le même ensemble d'essais ; le périmètre est fixé par un plan d'évaluation biologique préparé selon l'ISO 10993-1. Ce plan justifie par écrit quels critères sont requis et pourquoi les autres ne le sont pas.

L'emballage et la stérilisation sont pris aussi au sérieux que le dispositif lui-même dans ce domaine. Pour un dispositif stérile, l'emballage n'est pas un conteneur de transport mais la barrière qui maintient la stérilité ; si la barrière est rompue, le dispositif n'est plus stérile. Les procédés d'emballage sont donc validés et la durée de conservation est étayée par des données de vieillissement en temps réel.

Pour les dispositifs contenant un logiciel, l'évaluation se déplace des essais vers l'assurance PROCESSUS. L'IEC 62304 définit les étapes de développement et de vérification à suivre selon la classe de sécurité du logiciel ; la preuve est la traçabilité du processus de développement. Ce n'est pas le test du logiciel qui le rend sûr, mais l'enregistrement du processus.

Le volet clinique est une colonne distincte du dossier technique. Les rapports d'essai montrent que le dispositif est techniquement sûr ; l'évaluation clinique établit que le dispositif apporte le bénéfice clinique attendu et que la balance bénéfice-risque est acceptable. Aucun des deux ne remplace l'autre.

Groupes de méthodes dans ce domaine

Biocompatibilité
Cytotoxicité, irritation, sensibilisation cutanée, toxicité systémique, hémocompatibilité, génotoxicité et effets locaux après implantation. Les critères requis sont fixés par le plan ISO 10993-1.
Sécurité des dispositifs électriques
IEC 60601-1 sécurité de base et performances essentielles ; exigences CEM, alarme, aptitude à l'utilisation et environnementales via les normes collatérales.
Validation de la stérilisation
Validation des procédés de stérilisation à l'oxyde d'éthylène, par rayonnement ou par chaleur humide ; études de bioburden et de niveau d'assurance de stérilité.
Conditionnement
Intégrité du système de barrière stérile, résistance du scellage, simulation de distribution et études de durée de conservation.
Essais microbiologiques
Détermination du bioburden, essai de stérilité, endotoxine bactérienne et, si nécessaire, études de validation du support.
Logiciel et aptitude à l'utilisation
Preuves de cycle de vie IEC 62304 et évaluation axée sur les erreurs d'utilisation selon l'IEC 62366.

Confusions fréquentes dans ce domaine

La cytotoxicité à elle seule ne constitue pas une preuve de biocompatibilité ; l'ensemble requis de paramètres est déterminé et justifié conformément à la norme ISO 10993-1.
Un certificat ISO 13485 ne confère pas le marquage CE ; la classification selon le RDM, le dossier technique et le processus de l'organisme notifié sont distincts.
Le vieillissement accéléré ne remplace pas le vieillissement en temps réel ; une allégation de durée de conservation est étayée par des données en temps réel.
Un changement de matériau (fournisseur, pigment, méthode de stérilisation) peut nécessiter la répétition de l'évaluation biologique ; ce n'est pas un changement silencieux.
Une évaluation réalisée sans les normes collatérales et particulières de l'IEC 60601-1 est incomplète ; les normes -1-x et -2-x appliquées doivent figurer dans le rapport.
Les dispositifs de diagnostic in vitro relèvent de l'IVDR et non du MDR, et les équipements de laboratoire relèvent souvent de l'IEC 61010-1.

Quelles décisions ces résultats étayent

Dossier technique MDR/IVDR et évaluation par l'organisme notifié
Finalisation du plan d'évaluation biologique
Validation de la stérilisation et de l'emballage
Détermination de la durée de conservation et des conditions de stockage
Détermination de l'étendue de la réévaluation après une modification de conception

Tests associés

Questions fréquentes sur Endotoxin

Mon produit est stérile : pourquoi un test d’endotoxines est-il nécessaire ?

L'endotoxine est résistante à la chaleur ; bien que la stérilisation tue la bactérie, elle ne décompose pas l’endotoxine, qui est un résidu de la paroi cellulaire. Un produit stérile peut donc toujours provoquer une réaction pyrogène et les endotoxines doivent être mesurées séparément.

Comment est déterminée la limite d’endotoxines ?

Elle est calculée selon la formule définie dans la pharmacopée, en fonction de la voie de contact du dispositif et de la dose autorisée. Pour les dispositifs en contact avec le liquide céphalo-rachidien, la limite est bien inférieure ; le calcul doit être indiqué dans le rapport.