Τι είναι η Listeria monocytogenes;
Η Listeria monocytogenes είναι ένα παθογόνο των τροφίμων που μπορεί να αναπτυχθεί ακόμη και σε θερμοκρασίες ψυγείου. Το ISO 11290 ορίζει δύο ξεχωριστές μεθόδους: Το 1ο μέρος είναι η αναζήτηση της παρουσίας βακτηρίων (παρουσία/απουσία σε μια συγκεκριμένη ποσότητα δείγματος), το 2ο μέρος είναι η καταμέτρησή τους.
Σκοπός της Listeria monocytogenes
Ο στόχος είναι να διαπιστωθεί εάν αυτό το παθογόνο υπάρχει, ειδικά σε κρύα προϊόντα που είναι έτοιμα για κατανάλωση και έχουν μεγάλη διάρκεια ζωής. Η λιστερίωση είναι σπάνια, αλλά η πορεία της είναι σοβαρή σε έγκυες γυναίκες, ηλικιωμένους και ανοσοκατεσταλμένους ανθρώπους. Γι' αυτό η νομοθεσία δίνει ιδιαίτερη θέση σε αυτό το παθογόνο.
Σε ποια προϊόντα εφαρμόζεται η Listeria monocytogenes;
- Έτοιμο προς κατανάλωση κρέας και προϊόντα ψαριών (καπνιστός σολομός, delicatessen)
- Μαλακά τυριά και προϊόντα από νωπό γάλα
- Έτοιμες σαλάτες και σάντουιτς
- Κατεψυγμένα λαχανικά και έτοιμα γεύματα
- Επιφανειακά μάκτρα γραμμής παραγωγής
Σε ποιους τομείς χρησιμοποιείται η Listeria monocytogenes;
Πρότυπα σχετικά με τη Listeria monocytogenes
- ISO 11290-1 (αναζήτηση)
- ISO 11290-2 (πλήθος)
- ISO 20776 / ISO 16140-2 (επαλήθευση εναλλακτικής μεθόδου)
- ΕΕ 2073/2005 Παράρτημα I (κριτήρια για έτοιμα προς κατανάλωση τρόφιμα)
Συνθήκες της Listeria monocytogenes
- Μέθοδος
- Αναζήτηση (παρών/απών) ή μέτρηση. επιλέγεται σύμφωνα με τα κριτήρια στα οποία υπόκειται το προϊόν
- Πλουτισμός
- Εμπλουτισμός δύο σταδίων σε ημιεκλεκτικό και επιλεκτικό ζωμό
- επιλεκτικά μέσα
- ALOA (Agar Listeria Ottaviani-Agosti) και δεύτερο επιλεκτικό μέσο
- Επαλήθευση
- Βιοχημική επιβεβαίωση και αιμόλυση σε τυπικές αποικίες
Εξοπλισμός για τη Listeria monocytogenes
- Ερμάριο βιοασφάλειας κατηγορίας II
- Θερμοκοιτίδες ελεγχόμενης θερμοκρασίας
- Στομάχι (περισταλτικός ομογενοποιητής) και αποστειρωμένοι σάκοι
- Αυτόκλειστο και αποστειρωτής ξηρού αέρα
- Συσκευή και μικροσκόπιο μέτρησης αποικιών
Απαιτήσεις δείγματος για τη Listeria monocytogenes
- Το δείγμα πρέπει να αποστέλλεται στην αρχική, ανοιχτή συσκευασία του.
- Τα προϊόντα που απαιτούν κρύα αλυσίδα πρέπει να παραδίδονται με ψυγείο και χωρίς σπάσιμο της αλυσίδας.
- Πρέπει να τηρούνται οι κανόνες ασηπτικής δειγματοληψίας. Το δοχείο πρέπει να είναι αποστειρωμένο.
- Οι πληροφορίες παρτίδας, ημερομηνίας παραγωγής και ημερομηνίας λήξης πρέπει να αναφέρονται μαζί με το δείγμα.
- Η ποσότητα που απαιτείται για την ανάλυση ποικίλλει ανάλογα με τον τύπο του προϊόντος. Η επιβεβαίωση πρέπει να ληφθεί πριν από την αποστολή.
Διάρκεια της Listeria monocytogenes
Λόγω του εμπλουτισμού και της επαλήθευσης σε δύο στάδια, η ανάλυση αναζήτησης είναι μια διαδικασία περίπου μίας εβδομάδας. Οι γρήγορες μέθοδοι (διαλογή βάσει PCR) δίνουν αρνητικά αποτελέσματα έγκαιρα. Οι θετικές οθόνες επιβεβαιώνονται από τον πολιτισμό.
Διαδικασία της Listeria monocytogenes
- 1Το δείγμα ζυγίζεται και μεταφέρεται σε ημιεκλεκτικό μέσο εμπλουτισμού.
- 2Ο πρώτος εμπλουτισμός γίνεται σε καθορισμένη θερμοκρασία και χρόνο.
- 3Γίνεται μεταφορά από την καλλιέργεια στο δεύτερο μέσο επιλεκτικού εμπλουτισμού.
- 4Η φύτευση γίνεται σε επιλεκτικά στερεά μέσα.
- 5Επιλέγονται τυπικές αποικίες και πραγματοποιούνται πειράματα επιβεβαίωσης.
- 6Το αποτέλεσμα αναφέρεται ως παρουσία/απουσία ή cfu/g στην ποσότητα του δείγματος.
Κριτήρια αποδοχής της Listeria monocytogenes
Η νομοθεσία και όχι η μέθοδος καθορίζει εάν το αποτέλεσμα θα κριθεί κατάλληλο ή όχι. Η σχετική ανακοίνωση του Τουρκικού Κώδικα Τροφίμων, ΕΕ 2073/2005 και 1881/2006 και οι προδιαγραφές της αγοραστής εταιρείας ορίζουν διαφορετικά όρια ανάλογα με την ομάδα προϊόντων. Η αναφορά δίνει τη μετρούμενη τιμή και παίρνει το όριο από την ισχύουσα νομοθεσία.
Αξιολόγηση Αποτελεσμάτων
Η αξιολόγηση εξαρτάται από την κατηγορία που εμπίπτει το προϊόν στην ΕΕ 2073/2005 και στον Τουρκικό Κώδικα Τροφίμων. Τα προϊόντα που υποστηρίζουν την αναπαραγωγή και αυτά που δεν υποστηρίζουν υπόκεινται σε διαφορετικά κριτήρια κατά τη διάρκεια της ζωής τους. Το εάν υποστηρίζει την αναπαραγωγή ή όχι φαίνεται από τη μελέτη διάρκειας ζωής.
Έκθεση της Listeria monocytogenes
- Περιγραφή δείγματος, πληροφορίες παρτίδας/παρτίδας και συνθήκες άφιξης
- Μέθοδος δειγματοληψίας (εάν ληφθεί από το εργαστήριο)
- Εφαρμοσμένη μέθοδος ανάλυσης και πρότυπο αναφοράς
- Ημερομηνία ανάλυσης και συνθήκες επώασης, εάν υπάρχουν
- Το αποτέλεσμα και η μονάδα του
- Αβεβαιότητα μέτρησης (εάν ζητηθεί)
- Δήλωση ότι το αποτέλεσμα ισχύει μόνο για το δείγμα που υποβάλλεται για δοκιμή
Διαπίστευση
Η EUROLAB κατέχει διεθνώς αναγνωρισμένη διαπίστευση που λαμβάνεται από φορείς διαπίστευσης που συμμετείχαν στις συμφωνίες πολυμερούς αναγνώρισης IAF και ILAC, σύμφωνα με το ISO/IEC 17025 για εργαστηριακές δοκιμές, το ISO/IEC 17020 για την επιθεώρηση και την επιτήρηση και το ISO/IEC 17021-1 και το σύστημα πιστοποίησης προϊόντων ISO/IEC. Αυτή η αλυσίδα διασφαλίζει ότι οι εκθέσεις και τα πιστοποιητικά που εκδίδονται γίνονται αποδεκτά παγκοσμίως.
Το εάν αυτή η δοκιμή μπορεί να προσφερθεί εντός αναγνωρισμένου πεδίου εξαρτάται από το προϊόν σας και το πρότυπο που εφαρμόζεται. Δεδομένου ότι η διαπίστευση βασίζεται στη μέθοδο, το πεδίο εφαρμογής επιβεβαιώνεται γραπτώς στο στάδιο της προσφοράς.
Πεδίο εφαρμογής και εξουσιοδοτήσειςΣχετικοί Κανονισμοί
- Κανονισμός Μικροβιολογικών Κριτηρίων του Τουρκικού Κώδικα Τροφίμων
- ΕΕ 2073/2005 — Μικροβιολογικά κριτήρια για τα τρόφιμα
- Νόμος αριθ. 5996 για τις κτηνιατρικές υπηρεσίες, την υγεία των φυτών, τα τρόφιμα και τις ζωοτροφές
Δοκιμές Τροφίμων — Τι καλύπτει αυτός ο τομέας δοκιμών;
Η παρακάτω ενότητα περιγράφει τον τομέα στον οποίο ανήκει η δοκιμή Listeria monocytogenes· οι συνθήκες και τα κριτήρια αποδοχής αυτής της συγκεκριμένης δοκιμής δίνονται στις παραπάνω ενότητες. Το πεδίο εφαρμογής που αφορά το προϊόν σας επιβεβαιώνεται εγγράφως στο στάδιο της προσφοράς.
Οι δοκιμές τροφίμων δείχνουν ότι ένα προϊόν είναι ασφαλές για κατανάλωση και περιέχει ό,τι αναγράφει η ετικέτα του. Η οικογένεια λειτουργεί σε τρεις άξονες: μικροβιολογική ασφάλεια, χημική ασφάλεια και διατροφική σύνθεση. Και οι τρεις απαιτούν διαφορετική εργαστηριακή υποδομή, διαφορετικό σώμα μεθόδων και διαφορετικό χρόνο απόκρισης.
Το πιο χαρακτηριστικό γνώρισμα του τομέα είναι η ΠΙΕΣΗ ΧΡΟΝΟΥ. Ένα δείγμα χάλυβα μπορεί να περιμένει σε ένα ράφι· ένα δείγμα ωμού γάλακτος ή φρέσκου κρέατος όχι. Η ώρα λήψης του δείγματος, η θερμοκρασία μεταφοράς και ο χρόνος άφιξης στο εργαστήριο καθορίζουν άμεσα την εγκυρότητα του αποτελέσματος. Γι' αυτό, στη μικροβιολογία τροφίμων, η καταγραφή της αλυσίδας ψύξης είναι αναπόσπαστο μέρος της έκθεσης δοκιμής.
Στη μικροβιολογική πλευρά υπάρχουν δύο διαφορετικά ερωτήματα που δεν πρέπει να συγχέονται. Η ΑΝΙΧΝΕΥΣΗ ενός παθογόνου είναι ποιοτικό ερώτημα: υπάρχει Σαλμονέλα στο δείγμα ή όχι; Η ΚΑΤΑΜΕΤΡΗΣΗ δεικτών μικροοργανισμών είναι ποσοτικό ερώτημα και δείκτης υγιεινής παραγωγής. Η απουσία παθογόνου σε ένα προϊόν δεν αποδεικνύει καλή υγιεινή· αν ο συνολικός αριθμός μεσόφιλων αερόβιων είναι υψηλός, υπάρχει πρόβλημα στη διεργασία.
Στη χημική πλευρά μετρώνται υπολείμματα φυτοφαρμάκων, μυκοτοξίνες, βαρέα μέταλλα, πρόσθετα, υπολείμματα κτηνιατρικών φαρμάκων και ρύποι διεργασίας (ακρυλαμίδιο, φουράνιο, PAH). Οι μέθοδοι πολλαπλών υπολειμμάτων σε αυτόν τον τομέα (LC-MS/MS και GC-MS/MS με βάση QuEChERS) μπορούν να ανιχνεύσουν εκατοντάδες δραστικές ουσίες σε μία ανάλυση· τα όρια ορίζονται ξεχωριστά για κάθε ζεύγος προϊόντος-ουσίας.
Στην πλευρά της σύστασης προσδιορίζονται πρωτεΐνη, λίπος, υγρασία, τέφρα, ίνες, προφίλ σακχάρων, σύσταση λιπαρών οξέων και περιεκτικότητα σε βιταμίνες και μέταλλα. Αυτές οι τιμές αποτελούν τη βάση της διατροφικής δήλωσης στην ετικέτα και τα εύρη ανοχής ορίζονται από τη νομοθεσία — η διαφορά μεταξύ δηλωμένης και μετρημένης τιμής πρέπει να παραμένει εντός αυτής της ανοχής.
ΔΕΝ υπάρχει σήμανση CE στα τρόφιμα, και αυτό διαμορφώνει τον τρόπο λειτουργίας του τομέα. Η συμμόρφωση αποδεικνύεται μέσω της λειτουργίας ενός συστήματος ασφάλειας τροφίμων βάσει HACCP, της τήρησης των κανόνων επισήμανσης και της μη υπέρβασης ορίων ρύπων, υπολειμμάτων και μικροβιολογικών παραμέτρων. Ένα αποτέλεσμα δοκιμής παράγει απόδειξη όχι για πιστοποιητικό αλλά για ένα λειτουργικό σύστημα.
Η διαχείριση αλλεργιογόνων έχει ιδιαίτερη βαρύτητα. Η παρουσία μη δηλωμένου αλλεργιογόνου σε ένα προϊόν είναι μία από τις πιο συχνές αιτίες ανάκλησης τροφίμων. Η ανάλυση εδώ συνοδεύεται από επικύρωση καθαρισμού: αποδεικνύεται ότι η γραμμή έχει καθαριστεί επαρκώς μετά από παραγωγή που περιείχε αλλεργιογόνο και ότι ο κίνδυνος διασταυρούμενης επιμόλυνσης είναι υπό έλεγχο.
Τα εθελοντικά σχήματα έχουν καταστεί ουσιαστικά υποχρεωτικά σε αυτόν τον τομέα. Οι αλυσίδες λιανικής απαιτούν από τους προμηθευτές τους πιστοποιητικό βάσει σχήματος αναγνωρισμένου από τη GFSI (BRCGS, IFS, FSSC 22000)· χωρίς αυτό, η είσοδος στο ράφι είναι πρακτικά αδύνατη.
Ομάδες μεθόδων σε αυτόν τον τομέα
Ανίχνευση παθογόνων
Ανίχνευση Σαλμονέλας, Listeria monocytogenes, Campylobacter, Cronobacter και E. coli παραγωγού τοξίνης Shiga· μέθοδοι καλλιέργειας και μοριακές μέθοδοι.
Καταμετρήσεις δεικτών
Συνολική μεσόφιλη αερόβια καταμέτρηση, Enterobacteriaceae, κολοβακτηριοειδή και E. coli, θετικοί σε κοαγκουλάση σταφυλόκοκκοι, ζύμες και μύκητες, γαλακτικά βακτήρια, θειοαναγωγικά Clostridia.
Υπολείμματα φυτοφαρμάκων και κτηνιατρικών
Ανίχνευση πολλαπλών υπολειμμάτων με LC-MS/MS και GC-MS/MS με εκχύλιση QuEChERS.
Μυκοτοξίνες και ρύποι
Αφλατοξίνες, ωχρατοξίνη Α, δεοξυνιβαλενόλη, πατουλίνη· βαρέα μέταλλα (ICP-MS), ακρυλαμίδιο και ενώσεις PAH.
Διατροφική σύνθεση
Πρωτεΐνη Kjeldahl, προφίλ λίπους και λιπαρών οξέων, υγρασία, τέφρα, διαιτητικές ίνες, προφίλ σακχάρων, αναλύσεις βιταμινών και μετάλλων.
Αλλεργιογόνα και αυθεντικότητα
Αναλύσεις αλλεργιογόνων γλουτένης, γάλακτος, αυγού, ξηρών καρπών και σόγιας· μοριακές μέθοδοι για ταυτοποίηση είδους και ανίχνευση νοθείας.
Συχνές συγχύσεις σε αυτόν τον τομέα
- Η δειγματοληψία είναι το μισό του αποτελέσματος. Ένα δείγμα που μεταφέρθηκε σε λάθος θερμοκρασία ή καθυστέρησε δίνει άκυρο αποτέλεσμα ακόμη κι αν αναλυθεί σωστά στο εργαστήριο.
- Η απουσία παθογόνου δεν αποδεικνύει καλή υγιεινή· οι καταμετρήσεις δεικτών δίνουν ξεχωριστή πληροφορία και οι δύο διαβάζονται μαζί.
- Ένα αποτέλεσμα από δείγμα που λήφθηκε από παρτίδα μπορεί να γενικευτεί σε ολόκληρη την παρτίδα μόνο αν το σχέδιο δειγματοληψίας έχει καταρτιστεί στατιστικά.
- Τα όρια ορίζονται σε ξεχωριστούς κανονισμούς ανά ομάδα προϊόντων και ενημερώνονται τακτικά· μια απόφαση συμμόρφωσης βασισμένη σε παρωχημένο πίνακα ορίων ενδέχεται να είναι λανθασμένη.
- Στις εξαγωγές, τα όρια της χώρας προορισμού ενδέχεται να διαφέρουν από τα όρια της ΕΕ· το ίδιο προϊόν μπορεί να είναι συμμορφούμενο σε μία αγορά και μη συμμορφούμενο σε άλλη.
Ποιες αποφάσεις υποστηρίζουν αυτά τα αποτελέσματα
- Επαλήθευση του σχεδίου HACCP και παρακολούθηση διεργασίας
- Η βάση της διατροφικής δήλωσης και των πληροφοριών αλλεργιογόνων στην ετικέτα
- Πιστοποιητικά υγείας πριν την εξαγωγή και συμμόρφωση με τα όρια της αγοράς προορισμού
- Έλεγχος αποδοχής βάσει προμηθευτή και παρτίδας
- Μελέτες διάρκειας ζωής και καθορισμός συνθηκών αποθήκευσης
- Παραγωγή αποδεικτικών στοιχείων για ελέγχους βάσει σχημάτων αναγνωρισμένων από τη GFSI
Σχετικά τεστ
Συχνές ερωτήσεις για τη Listeria monocytogenes
Η φύλαξη του στο ψυγείο εξαλείφει τον κίνδυνο της Listeria;
Όχι. Η Listeria monocytogenes μπορεί να συνεχίσει να αναπαράγεται, αν και αργά, σε ψυχρά περιβάλλοντα. Επομένως, ο κίνδυνος δεν μειώνεται στα κρύα προϊόντα με μεγάλη διάρκεια ζωής, αλλά μπορεί να αυξηθεί με την πάροδο του χρόνου.
Πρέπει να ζητηθεί κλήση ή καταμέτρηση;
Αυτό καθορίζεται από τα κριτήρια στα οποία υπόκειται το προϊόν. Σε ορισμένα προϊόντα απαιτείται να μην υπάρχει σε συγκεκριμένη ποσότητα δείγματος και σε άλλα απαιτείται να μην υπερβαίνει ένα ορισμένο επίπεδο καθ' όλη τη διάρκεια ζωής του.









