ما هو Listeria monocytogenes؟
الليستيريا المستوحدة هي أحد مسببات الأمراض الغذائية التي يمكن أن تنمو حتى في درجات حرارة الثلاجة. تحدد المواصفة ISO 11290 طريقتين منفصلتين: الجزء الأول هو البحث عن وجود البكتيريا (وجود/غياب في كمية معينة من العينة)، والجزء الثاني هو عدها.
الغرض من Listeria monocytogenes
والهدف من ذلك هو تحديد ما إذا كان هذا العامل الممرض موجودًا، خاصة في المنتجات الباردة الجاهزة للاستهلاك والتي تتمتع بفترة صلاحية طويلة. داء الليستريات نادر الحدوث، لكن مساره يكون شديدًا عند النساء الحوامل، وكبار السن، والأشخاص الذين يعانون من ضعف المناعة؛ ولهذا السبب يعطي التشريع مكانا خاصا لهذا العامل الممرض.
على أي منتجات يُطبَّق Listeria monocytogenes؟
- منتجات اللحوم والأسماك الجاهزة للأكل (سمك السلمون المدخن، الأطعمة المعلبة)
- الأجبان الطرية والمنتجات المصنوعة من الحليب الخام
- السلطات والسندويشات الجاهزة
- الخضروات المجمدة والوجبات الجاهزة
- مسحات سطح خط الإنتاج
في أي قطاعات يُستخدم Listeria monocytogenes؟
المواصفات المتعلقة بـ Listeria monocytogenes
- ISO 11290-1 (بحث)
- ISO 11290-2 (العدد)
- ISO 20776 / ISO 16140-2 (التحقق من الطريقة البديلة)
- الاتحاد الأوروبي 2073/2005 المرفق الأول (معايير الأطعمة الجاهزة للأكل)
شروط Listeria monocytogenes
- طريقة
- بحث (حاضر/غائب) أو العد؛ يتم اختياره وفقًا للمعايير التي يخضع لها المنتج
- التخصيب
- تخصيب من خطوتين في مرق شبه انتقائي وانتقائي
- وسائل الإعلام الانتقائية
- ALOA (Agar Listeria Ottaviani-Agosti) ووسيط انتقائي ثانٍ
- تَحَقّق
- تأكيد الكيمياء الحيوية وانحلال الدم في المستعمرات النموذجية
جهاز Listeria monocytogenes
- خزانة السلامة الحيوية من الدرجة الثانية
- حاضنات يتم التحكم بدرجة حرارتها
- المعدة (الخالط التمعجي) والأكياس المعقمة
- الأوتوكلاف ومعقم الهواء الجاف
- جهاز عد المستعمرات والمجهر
متطلبات العينة لـ Listeria monocytogenes
- يجب إرسال العينة في عبوتها الأصلية غير المفتوحة.
- يجب أن يتم تسليم المنتجات التي تتطلب سلسلة تبريد مع مبرد وبدون كسر السلسلة.
- ويجب اتباع قواعد أخذ العينات المعقمة؛ يجب أن تكون الحاوية معقمة.
- يجب الإبلاغ عن معلومات الدفعة وتاريخ الإنتاج وتاريخ انتهاء الصلاحية مع العينة.
- يختلف المبلغ المطلوب للتحليل حسب نوع المنتج؛ يجب أن يتم استلام التأكيد قبل الشحن.
مدة Listeria monocytogenes
نظرًا للإثراء والتحقق من خطوتين، فإن تحليل البحث هو عملية تستغرق حوالي أسبوع واحد. تعطي الطرق السريعة (الفحص المعتمد على تفاعل البوليميراز المتسلسل) نتائج سلبية مبكرًا؛ يتم تأكيد الشاشات الإيجابية عن طريق الثقافة.
إجراء Listeria monocytogenes
- 1يتم وزن العينة ونقلها إلى وسط تخصيب شبه انتقائي.
- 2يتم التخصيب الأول عند درجة حرارة ووقت محددين.
- 3يتم النقل من الثقافة إلى وسط التخصيب الانتقائي الثاني.
- 4تتم الزراعة على وسائط صلبة انتقائية.
- 5يتم تحديد المستعمرات النموذجية ويتم إجراء تجارب التأكيد.
- 6يتم الإبلاغ عن النتيجة كوجود/غياب أو cfu/g في كمية العينة.
معايير قبول Listeria monocytogenes
ويحدد التشريع، وليس الطريقة، ما إذا كانت النتيجة ستعتبر مناسبة أم لا. يحدد البيان ذو الصلة الصادر عن دستور الأغذية التركي، الاتحاد الأوروبي 2073/2005 و1881/2006 ومواصفات الشركة المشترية حدودًا مختلفة اعتمادًا على مجموعة المنتجات؛ يعطي التقرير القيمة المقاسة ويأخذ الحد من التشريعات المعمول بها.
تقييم النتائج
يعتمد التقييم على الفئة التي يندرج المنتج ضمنها في الاتحاد الأوروبي 2073/2005 ودستور الأغذية التركي. المنتجات التي تدعم الاستنساخ وتلك التي لا تخضع لمعايير مختلفة خلال فترة صلاحيتها؛ ما إذا كان يدعم التكاثر أم لا يتم عرضه من خلال دراسة مدة الصلاحية.
تقرير Listeria monocytogenes
- وصف العينة ومعلومات الدفعة/الدفعة وشروط الوصول
- طريقة أخذ العينات (إذا تم أخذها من قبل المختبر)
- طريقة التحليل التطبيقية والمعايير المرجعية
- تاريخ التحليل وظروف الحضانة إن وجدت
- النتيجة ووحدتها
- عدم اليقين في القياس (إذا طلب ذلك)
- إقرار بأن النتيجة تنطبق فقط على العينة المقدمة للاختبار
الاعتماد
حصلت EUROLAB على اعتماد معترف به دوليًا تم الحصول عليه من هيئات الاعتماد الأطراف في ترتيبات الاعتراف المتعددة الأطراف IAF وILAC، بموجب ISO/IEC 17025 للاختبارات المعملية، وISO/IEC 17020 للتفتيش والمراقبة، وISO/IEC 17021-1 وISO/IEC 17065 لشهادة النظام والمنتجات. تضمن هذه السلسلة قبول التقارير والشهادات الصادرة في جميع أنحاء العالم.
تعتمد إمكانية تقديم هذا الاختبار ضمن النطاق المعتمد على منتجك والمعيار المطبق؛ وبما أن الاعتماد يعتمد على الطريقة، يتم تأكيد النطاق كتابيًا في مرحلة عرض الأسعار.
النطاق والتفويضاتاللوائح ذات الصلة
- لائحة المعايير الميكروبيولوجية لدستور الأغذية التركي
- الاتحاد الأوروبي 2073/2005 — المعايير الميكروبيولوجية للمواد الغذائية
- القانون رقم 5996 بشأن الخدمات البيطرية وصحة النبات والأغذية والأعلاف
اختبارات الأغذية — ما الذي يغطيه مجال الاختبار هذا؟
يصف القسم أدناه المجال الذي ينتمي إليه اختبار Listeria monocytogenes؛ أما شروط ومعايير قبول هذا الاختبار تحديدًا فترد في الأقسام أعلاه. يتم تأكيد النطاق الخاص بمنتجكم كتابيًا في مرحلة العرض السعري.
تُظهر اختبارات الأغذية أن المنتج آمن للاستهلاك ويحتوي على ما هو مذكور على ملصقه. تعمل هذه العائلة على ثلاثة محاور: السلامة الميكروبيولوجية، والسلامة الكيميائية، والتركيب الغذائي. وتتطلب المحاور الثلاثة بنية مختبرية مختلفة، ومجموعة طرق مختلفة، ومدة قرار مختلفة.
أبرز سمة في هذا المجال هي ضغط الوقت. يمكن لعينة من الفولاذ أن تنتظر على الرف؛ أما عينة الحليب الخام أو اللحم الطازج فلا يمكنها ذلك. فوقت أخذ العينة ودرجة حرارة النقل ومدة الوصول إلى المختبر تحدد مباشرة صلاحية النتيجة. لذلك يُعد سجل سلسلة التبريد في ميكروبيولوجيا الأغذية جزءًا لا يتجزأ من تقرير الاختبار.
على الجانب الميكروبيولوجي، هناك سؤالان مختلفان يجب عدم الخلط بينهما. الكشف عن مسبب مرضي سؤال نوعي: هل توجد السالمونيلا في العينة أم لا؟ أما عد الكائنات الدليلية فهو سؤال كمي ومؤشر على نظافة الإنتاج. عدم وجود مسبب مرضي في منتج لا يدل على أن النظافة جيدة؛ فإذا كان العدد الكلي للهوائيات المعتدلة الحرارة مرتفعًا، فهناك مشكلة في العملية.
على الجانب الكيميائي، تُقاس بقايا المبيدات والسموم الفطرية والمعادن الثقيلة والمضافات وبقايا الأدوية البيطرية وملوثات العملية (الأكريلاميد والفوران ومركبات PAH). ويمكن لطرق البقايا المتعددة في هذا المجال (LC-MS/MS وGC-MS/MS القائمة على QuEChERS) فحص مئات المواد الفعالة في تحليل واحد؛ وتُحدَّد الحدود بشكل منفصل لكل زوج منتج-مادة.
على جانب التركيب، تُحدَّد البروتينات والدهون والرطوبة والرماد والألياف ونسبة السكر وتركيب الأحماض الدهنية ومحتوى الفيتامينات والمعادن. وتُشكِّل هذه القيم أساس البيان الغذائي على الملصق، وتُحدَّد نطاقات التفاوت في التشريع - ويجب أن يبقى الفرق بين القيمة المعلنة والقيمة المقاسة ضمن هذا التفاوت.
لا توجد علامة CE على الأغذية، وهذا يحدد طريقة عمل هذا المجال. تُثبت المطابقة من خلال تشغيل نظام سلامة غذائية قائم على HACCP، والامتثال لقواعد وضع العلامات، وعدم تجاوز حدود الملوثات والبقايا والحدود الميكروبيولوجية. لا تُنتج نتيجة الاختبار دليلًا لشهادة بل لنظام يعمل بفعالية.
لإدارة مسببات الحساسية أهمية خاصة. ووجود مسبب حساسية غير معلن في منتج هو أحد الأسباب الأكثر شيوعًا لسحب المنتجات الغذائية. ويسير التحليل هنا جنبًا إلى جنب مع التحقق من التنظيف: إذ يُثبت أن الخط قد نُظِّف بشكل كافٍ بعد دورة إنتاج تحتوي على مسبب حساسية وأن خطر التلوث المتبادل تحت السيطرة.
أصبحت المخططات الطوعية في هذا المجال إلزامية بحكم الأمر الواقع. وتطلب سلاسل البيع بالتجزئة من مورديها الحصول على شهادة بموجب مخطط معترف به من GFSI (مثل BRCGS وIFS وFSSC 22000)؛ ودون ذلك، يكاد يكون الوصول إلى الرف مستحيلاً عمليًا.
مجموعات الطرق في هذا المجال
الكشف عن مسببات الأمراض
الكشف عن السالمونيلا وListeria monocytogenes وCampylobacter وCronobacter وE. coli المنتجة لسموم شيغا؛ بالطرق القائمة على الاستنبات والطرق الجزيئية.
أعداد الكائنات الدليلية
العدد الكلي للهوائيات المعتدلة الحرارة، وEnterobacteriaceae، والقولونيات وE. coli، والمكورات العنقودية الموجبة للكواغولاز، والخمائر والعفن، وبكتيريا حمض اللاكتيك، والمطثيات المختزلة للكبريتيت.
بقايا المبيدات والأدوية البيطرية
فحص متعدد البقايا بواسطة LC-MS/MS وGC-MS/MS مع استخلاص QuEChERS.
السموم الفطرية والملوثات
الأفلاتوكسينات وأوكراتوكسين A ودي أوكسينيفالينول والباتولين؛ والمعادن الثقيلة (ICP-MS) والأكريلاميد ومركبات PAH.
التركيب الغذائي
بروتين كلداهل، وتركيب الدهون والأحماض الدهنية، والرطوبة، والرماد، والألياف الغذائية، ونسبة السكر، وتحليلات الفيتامينات والمعادن.
مسببات الحساسية والأصالة
تحليلات مسببات حساسية الغلوتين والحليب والبيض والمكسرات وفول الصويا؛ وطرق جزيئية لتحديد الأنواع والكشف عن الغش.
أمور يشيع الخلط بينها في هذا المجال
- أخذ العينة نصف النتيجة. فالعينة المنقولة في درجة حرارة خاطئة أو المتأخرة تعطي نتيجة غير صالحة حتى لو حُلِّلت بشكل صحيح في المختبر.
- عدم وجود مسبب مرضي لا يدل على أن النظافة جيدة؛ فأعداد الكائنات الدليلية تعطي معلومة منفصلة وتُقرأ الاثنتان معًا.
- لا يمكن تعميم نتيجة عينة مأخوذة من دفعة على الدفعة بأكملها إلا إذا كانت خطة أخذ العينات موضوعة إحصائيًا.
- تُحدَّد الحدود في لوائح منفصلة حسب فئة المنتج وتُحدَّث بانتظام؛ وقد يكون قرار المطابقة المستند إلى جدول حدود قديم خاطئًا.
- في التصدير، قد تختلف حدود بلد الوجهة عن حدود الاتحاد الأوروبي؛ فقد يكون المنتج نفسه مطابقًا في سوق وغير مطابق في سوق آخر.
ما القرارات التي تدعمها هذه النتائج
- التحقق من خطة HACCP ومراقبة العملية
- أساس البيان الغذائي ومعلومات مسببات الحساسية على الملصق
- شهادات صحية قبل التصدير والامتثال لحدود السوق المستهدف
- مراقبة القبول حسب المورد والدفعة
- دراسات مدة الصلاحية وتحديد شروط التخزين
- إنتاج أدلة لعمليات تدقيق المخططات المعترف بها من GFSI
الاختبارات ذات الصلة
الأسئلة الشائعة حول Listeria monocytogenes
هل تخزينه في الثلاجة يزيل خطر الإصابة بالليستيريا؟
لا، يمكن للليستيريا المستوحدة أن تستمر في التكاثر، ولو ببطء، في البيئات الباردة. ولذلك فإن الخطر لا ينخفض في المنتجات الباردة ذات العمر الافتراضي الطويل، بل قد يزيد مع مرور الوقت.
هل يجب طلب مكالمة أو حساب؟
ويتم تحديد ذلك من خلال المعايير التي يخضع لها المنتج. ويشترط في بعض المنتجات ألا يكون موجودا بكمية معينة في العينة، وفي البعض الآخر يشترط ألا يتجاوز مستوى معينا طوال مدة صلاحيته.