¿Qué es Assay?
El ensayo mide la cantidad de sustancia activa en el producto. HPLC es el método más común; También se pueden utilizar métodos titrimétricos o espectrofotométricos según la monografía. El resultado se expresa como porcentaje del contenido declarado.
Objetivo de Assay
El objetivo es verificar que el producto contenga la dosis declarada. La desviación de la dosis crea un riesgo directo tanto para la eficacia como para la seguridad.
¿A qué productos se aplica Assay?
- Comprimidos, cápsulas y grageas.
- Jarabes, suspensiones y gotas.
- Soluciones inyectables
- Cremas, geles y ungüentos.
- Ingredientes farmacéuticos activos
¿En qué sectores se utiliza Assay?
Normas relacionadas con Assay
- Ph.Eur. 2.2.29 (cromatografía líquida)
- Ph.Eur. 2.2.46 (técnicas de separación cromatográfica)
- USP <621> (cromatografía)
- ICH Q2(R2) (validación de procedimientos analíticos)
- Monografías de productos relevantes
Condiciones de Assay
- Idoneidad del sistema
- Los criterios de idoneidad del sistema contenidos en la monografía deben cumplirse en cada ejecución.
- Estándar de referencia
- Farmacopea o norma de trabajo calificada
- Preparación de muestras
- Extracción y dilución definidas en la monografía.
Equipo para Assay
- HPLC / UPLC (con detector DAD o UV)
- Valorador automático
- espectrofotómetro UV/Vis
- Balanza analítica (0,00001 g)
- Baño ultrasónico y centrífuga.
Requisitos de muestra para Assay
- El número de unidades especificadas en la monografía (tableta, cápsula, etc.)
- Se debe proporcionar el número de lote y la dosis declarada.
- El ejemplar deberá enviarse en su embalaje original.
- Se debe proporcionar información estándar de referencia.
Duración de Assay
El ensayo cromatográfico, junto con la preparación de la muestra y la prueba de idoneidad del sistema, lleva varios días laborables.
Procedimiento de Assay
- 1Se establecen el método y las condiciones de la monografía.
- 2Se prepara la solución estándar de referencia.
- 3Se realiza una prueba de idoneidad del sistema y se verifican los criterios.
- 4La muestra se prepara según la monografía.
- 5Se realiza una medición cromatográfica o titrimétrica.
- 6El contenido de sustancia activa se calcula como porcentaje del valor declarado.
Criterios de aceptación de Assay
El criterio de aceptación no se da en esta página: para cada sustancia activa y cada producto, el límite proviene de la monografía de la farmacopea correspondiente o de la especificación aprobada en el expediente de autorización de comercialización. El capítulo general de la farmacopea define el método; la monografía pone el límite.
Evaluación de resultados
Un resultado obtenido sin cumplir los criterios de idoneidad del sistema no es válido; Estos criterios demuestran que el método funcionó correctamente ese día. El resultado del ensayo por sí solo tampoco es suficiente: la uniformidad del contenido y las pruebas de disolución muestran que cada unidad del producto administra la dosis correcta.
Informe de Assay
- Identificación de la muestra, lote y dosis declarada.
- Condiciones de monografía y método aplicadas.
- Resultados de idoneidad del sistema
- Resultado del ensayo (% de lo declarado)
- Cromatogramas y cálculos.
Acreditación
EUROLAB posee una acreditación reconocida internacionalmente obtenida de organismos de acreditación que forman parte de los acuerdos de reconocimiento multilateral de IAF e ILAC, según ISO/IEC 17025 para pruebas de laboratorio, ISO/IEC 17020 para inspección y vigilancia, e ISO/IEC 17021-1 e ISO/IEC 17065 para certificación de sistemas y productos. Esta cadena garantiza que los informes y certificados emitidos sean aceptados en todo el mundo.
La posibilidad de ofrecer esta prueba dentro del alcance acreditado depende de su producto y del estándar aplicado; Dado que la acreditación se basa en métodos, el alcance se confirma por escrito en la etapa de cotización.
Alcance y autorizacionesRegulaciones Relacionadas
- Directiva 2001/83/CE sobre medicamentos de uso humano
- Guía GMP (EudraLex Volumen 4)
Análisis farmacéutico — ¿Qué abarca este campo de ensayo?
La siguiente sección describe el campo al que pertenece el ensayo Assay; las condiciones y criterios de aceptación de este ensayo en particular figuran en las secciones anteriores. El alcance específico de su producto se confirma por escrito en la etapa de cotización.
El análisis farmacéutico determina la identidad, la pureza, la cantidad y el comportamiento del principio activo del medicamento y del producto final. Lo que distingue a esta disciplina de las demás es que los métodos están definidos en gran medida en las farmacopeas: tanto la Farmacopea Europea (Ph. Eur.) como la Farmacopea de los Estados Unidos (USP) establecen conjuntamente tanto el método como el marco de aceptación.
El carácter vinculante del método de la farmacopea determina la forma de trabajar en este ámbito. Mientras que en otros sectores el laboratorio puede elegir un método adecuado, aquí es obligatorio seguir el método descrito en la monografía; si se va a utilizar un método alternativo, es necesario demostrar su equivalencia. Esto garantiza que los resultados sean comparables en todo el mundo.
Los análisis se llevan a cabo en varios grupos. La identificación y la determinación cuantitativa (HPLC, UV, titulación) indican qué es el producto y qué cantidad de principio activo contiene. El perfil de impurezas y los residuos de disolventes detectan compuestos no deseados procedentes del proceso de fabricación. Las impurezas elementales abordan los metales procedentes de catalizadores y equipos. El comportamiento de disolución y dispersión es el indicador in vitro más importante en relación con el comportamiento de liberación del medicamento en el organismo.
El ENSAYO DE DISOLUCIÓN es una de las mediciones más importantes en este ámbito. No basta con que un comprimido contenga la cantidad adecuada de principio activo; es necesario que dicho principio activo se disuelva a la velocidad adecuada. El perfil de disolución se utiliza para evaluar el efecto de los cambios en la formulación sobre la biodisponibilidad y ocupa un lugar fundamental en la autorización de comercialización de los medicamentos genéricos.
La VALIDACIÓN DEL MÉTODO es un paso obligatorio en esta familia. Si se utiliza un método de la farmacopea, se comprueba que dicho método funciona correctamente en las condiciones de ese laboratorio. Si se ha desarrollado un método propio, se valida mediante parámetros como la linealidad, la precisión, la exactitud, la selectividad, los límites de detección y de determinación, y la robustez. Los resultados obtenidos con un método no validado no pueden utilizarse en el expediente de autorización.
Los ensayos de estabilidad determinan la vida útil y constituyen el proceso más prolongado en este ámbito. El producto se mantiene en las condiciones de temperatura y humedad especificadas, se analiza a intervalos determinados y los resultados sirven de base para establecer la vida útil y las condiciones de conservación declaradas. Las condiciones aceleradas proporcionan información preliminar, pero los datos en tiempo real son fundamentales.
La parte microbiológica constituye un ámbito independiente: recuento de la carga microbiana, búsqueda de microorganismos específicos, ensayo de esterilidad en productos estériles y ensayo de endotoxinas bacterianas. En el caso de los productos estériles, también se tienen en cuenta la integridad del envase y la validación de la esterilización.
La integridad de los datos se ha convertido en el centro de las inspecciones en los últimos años. No basta con que el resultado sea correcto; los datos brutos deben ser trazables, inalterables y auditables. La validación de los sistemas de registro electrónico se ha convertido, por tanto, en una parte inseparable del análisis.
Grupos de métodos en este campo
Identidad y valoración
HPLC, UPLC, espectrofotometría UV-Vis, valoración, confirmación de identidad por FTIR.
Impurezas y residuos
Impurezas relacionadas, productos de degradación, disolventes residuales (GC-headspace), cribado de nitrosaminas.
Impurezas elementales
Determinación de impurezas elementales por ICP-MS e ICP-OES y evaluación de riesgo asociada.
Fisicoquímico
Disolución y desintegración, dureza, friabilidad, uniformidad de unidades de dosificación, contenido de agua (Karl Fischer), tamaño de partícula.
Microbiológico
Recuento microbiano, microorganismos especificados, esterilidad, endotoxina bacteriana, eficacia del conservante.
Estabilidad
Estudios de estabilidad en tiempo real y acelerada; fotoestabilidad y estabilidad en uso.
Confusiones frecuentes en este campo
- El método farmacopeico es vinculante; un método alternativo solo puede usarse demostrando su equivalencia.
- Un resultado producido sin validación del método no puede usarse en un expediente de registro.
- La estabilidad acelerada no sustituye a los datos en tiempo real; la vida útil se respalda con resultados en tiempo real.
- El perfil de disolución es sensible al tipo de aparato, la velocidad de agitación y el medio; las condiciones deben estar completas en el informe.
- Una deficiencia en la integridad de los datos genera una no conformidad en una inspección, incluso si el resultado es correcto.
- Un cambio de formulación o proveedor requiere comparación analítica y, si es necesario, un nuevo estudio de estabilidad.
Qué decisiones respaldan estos resultados
- El expediente de registro y la liberación de lotes
- Determinación de la vida útil y las condiciones de almacenamiento
- Transferencia de método y validación de método
- Control de aceptación de materias primas entrantes de proveedores
- Evaluación del efecto de un cambio de formulación en la bioequivalencia
Pruebas relacionadas
Preguntas frecuentes sobre Assay
El resultado del ensayo fue aprobado. ¿Cumple el producto?
No por sí solo. El ensayo da el contenido promedio; la uniformidad del contenido se necesita por separado para la distribución de unidad a unidad y las pruebas de disolución para predecir la biodisponibilidad.